论文部分内容阅读
摘要：本文对清热解毒口服液的提取工艺进行研究。水提之前用稀乙醇浸渍最佳提取工艺为乙醇体积分数40%，加醇量为2倍，浸泡时间为5小时。新制备工艺使黄芩苷的含量提高了为原来的1.6倍。检测方法为流动相：甲醇-水-磷酸（50：50：0.3）检测波长：276nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。测定方法可用于清热解毒口服液中黄芩苷的含量测定。
关键词：清热解毒口服液；提取；研究
清热解毒口服液具有清热解毒的功效。清热解毒口服液由石膏、金银花、玄参、地黄、连翘、栀子、甜地丁、黄芩、龙胆、板蓝根、知母、麦冬组成。清热解毒口服液用于烦躁口渴、咽喉肿痛、流感、上呼吸道感染等[1-3]。主要生产清热解毒口服液的厂家有黑龙江乌苏里江制药有限公司、吉林敖东集团力源制药股份有限、洛阳伊龙药业有限公司、江西济民可信药业有限公司、哈药集团三精制药股份有限公司、河南明康制药有限公司、河南灵佑药业有限公司、三门峡广宇生物制药有限公司、西安利君制药有限责任公司、国药集团新疆制药有限公司、河北恒祥医药集团扁鹊制药有限、上海宝龙安庆药业有限公司等。本文对清热解毒口服液的提取工艺进行研究。
1.1仪器
安捷伦1100高效液相色谱仪、安捷伦色谱工作站、安捷伦1100可变波长检测器、QT3120K脱气可调型超声波清洗器（天津市瑞普电子仪器公司）；奥豪斯Explorer专业型分析天平（奥豪斯仪器上海有限公司）；TGL20MW台式大容量高速冷冻离心机（湖南赫西离心机仪器有限公司）；MOLPW医药生物行业用超纯水系统（上海摩勒科学仪器有限公司）；722s分光光度计（上海精科有限公司）；10L-50L大型旋转蒸发仪（北京赛美思仪器设备有限公司）；UWB-6恒温水浴箱（北京优晟联合科技有限公司）；pHS-2C型精密酸度计（上海精科雷磁厂）。
1.2色谱柱
安捷伦 十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218mm×4.6mm，5μm）。
1.3对照品
黄芩苷 购自中国药品生物制品检定所。
1.4试剂
甲醇、乙腈为色谱纯；水为纯化水，其它试剂均为分析纯。
2.提取工艺的研究
2.1制备方法
分别称取石膏804g、金银花160.8g、玄参128.4g、地黄96g、连翘80.4g、栀子80.4g、甜地丁80.4g、黄芩80.4g、龍胆80.4g、板蓝根80.4g、知母64.8g、麦冬64.8g，加入用稀乙醇浸渍，加相当于生药总量8倍的水，煮沸1小时，过滤，药渣加相当于生药总量6倍的水，煎煮40分钟，滤过。合并药液浓缩至标准相对密度1.17（80℃）。
2.2正交试验
本实验采用水提之前用稀乙醇浸渍，将乙醇浓度、乙醇用量、浸渍时间作为考察因素，采用正交试验法对影响提取效率的其它工艺条件进行优选。采用3个考察水平，用L9（34）正交表进行试验，因素水平表见表1（略）。
3.含量测定
3.1流动相的选择
分别考察乙腈一0.05mol·L磷酸盐缓冲溶液（45：55），甲醇-水-磷酸（50：50：0.3），甲醇-乙腈-水-冰醋酸（30：20：50：0.1），甲醇-水-醋酸（50∶50∶1），水-甲醇-冰醋酸（50∶50∶0.02）不同比例的流动相，结果以甲醇-水-磷酸（50：50：0.3）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-水-磷酸（50：50：0.3）为流动相。
3.2检测波长的选择
制备黄芩苷对照品稀释液照紫外-可见分光光度法（中国药典2010版一部 附录ⅤA），于190～900nm波长范围内进行全波长光谱扫描，记录吸收光谱。在276nm处有最大吸收峰，故选用276nm为检测波长。
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：甲醇-水-磷酸（50：50：0.3）检测波长：276nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按黄芩苷峰计算应不得低于2000。
3.3对照品溶液的制备
精密称取在100℃减压干燥至恒重的黄芩苷对照品，加流动相制成每1ml含0.01mg的溶液，即得。
3.4供试品溶液的制备
取清热解毒口服液浓缩膏适量，精密量取1ml，置100mL量瓶中，加流动相适量，超声处理20min使溶解，放置至室温，加流动相稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
3.5专属性试验
取石膏、金银花、玄参、地黄、连翘、栀子、甜地丁、龙胆、板蓝根、知母、麦冬按样品制备工艺制成阴性对照样品，照3.4项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在黄芩苷出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
3.6对照品的线性考察
精密称取100℃减压干燥至恒重的黄芩苷对照品5mg，置100ml容量瓶中，加入流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取1、2、3、4、5mL，置于10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照3.2项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，黄芩苷在5～25μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
4.讨论
实验结果表明水提之前用稀乙醇浸渍最佳提取工艺为乙醇体积分数40%，加醇量为2倍，浸泡时间为5小时。测定方法可用于清热解毒口服液中黄芩苷的含量测定。新制备工艺使黄芩苷的含量提高了为原来的1.6倍。
参考文献：
[1]袁梦哲，李绍峰.HPLC法测定清热解毒口服液中绿原酸的含量[J].数理医药学杂志，2011（01）.74
[2]李洪兵.抗炎合剂质量控制的初步探讨[J].中国医药指南，2010（09）.3
[3]赵琦，张军武，安国军.清热解毒口服液薄层鉴别方法的改进研究[J].长春中医药大学学报，2010（06）.34
关键词：清热解毒口服液；提取；研究
清热解毒口服液具有清热解毒的功效。清热解毒口服液由石膏、金银花、玄参、地黄、连翘、栀子、甜地丁、黄芩、龙胆、板蓝根、知母、麦冬组成。清热解毒口服液用于烦躁口渴、咽喉肿痛、流感、上呼吸道感染等[1-3]。主要生产清热解毒口服液的厂家有黑龙江乌苏里江制药有限公司、吉林敖东集团力源制药股份有限、洛阳伊龙药业有限公司、江西济民可信药业有限公司、哈药集团三精制药股份有限公司、河南明康制药有限公司、河南灵佑药业有限公司、三门峡广宇生物制药有限公司、西安利君制药有限责任公司、国药集团新疆制药有限公司、河北恒祥医药集团扁鹊制药有限、上海宝龙安庆药业有限公司等。本文对清热解毒口服液的提取工艺进行研究。
1.1仪器
安捷伦1100高效液相色谱仪、安捷伦色谱工作站、安捷伦1100可变波长检测器、QT3120K脱气可调型超声波清洗器（天津市瑞普电子仪器公司）；奥豪斯Explorer专业型分析天平（奥豪斯仪器上海有限公司）；TGL20MW台式大容量高速冷冻离心机（湖南赫西离心机仪器有限公司）；MOLPW医药生物行业用超纯水系统（上海摩勒科学仪器有限公司）；722s分光光度计（上海精科有限公司）；10L-50L大型旋转蒸发仪（北京赛美思仪器设备有限公司）；UWB-6恒温水浴箱（北京优晟联合科技有限公司）；pHS-2C型精密酸度计（上海精科雷磁厂）。
1.2色谱柱
安捷伦 十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218mm×4.6mm，5μm）。
1.3对照品
黄芩苷 购自中国药品生物制品检定所。
1.4试剂
甲醇、乙腈为色谱纯；水为纯化水，其它试剂均为分析纯。
2.提取工艺的研究
2.1制备方法
分别称取石膏804g、金银花160.8g、玄参128.4g、地黄96g、连翘80.4g、栀子80.4g、甜地丁80.4g、黄芩80.4g、龍胆80.4g、板蓝根80.4g、知母64.8g、麦冬64.8g，加入用稀乙醇浸渍，加相当于生药总量8倍的水，煮沸1小时，过滤，药渣加相当于生药总量6倍的水，煎煮40分钟，滤过。合并药液浓缩至标准相对密度1.17（80℃）。
2.2正交试验
本实验采用水提之前用稀乙醇浸渍，将乙醇浓度、乙醇用量、浸渍时间作为考察因素，采用正交试验法对影响提取效率的其它工艺条件进行优选。采用3个考察水平，用L9（34）正交表进行试验，因素水平表见表1（略）。
3.含量测定
3.1流动相的选择
分别考察乙腈一0.05mol·L磷酸盐缓冲溶液（45：55），甲醇-水-磷酸（50：50：0.3），甲醇-乙腈-水-冰醋酸（30：20：50：0.1），甲醇-水-醋酸（50∶50∶1），水-甲醇-冰醋酸（50∶50∶0.02）不同比例的流动相，结果以甲醇-水-磷酸（50：50：0.3）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-水-磷酸（50：50：0.3）为流动相。
3.2检测波长的选择
制备黄芩苷对照品稀释液照紫外-可见分光光度法（中国药典2010版一部 附录ⅤA），于190～900nm波长范围内进行全波长光谱扫描，记录吸收光谱。在276nm处有最大吸收峰，故选用276nm为检测波长。
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：甲醇-水-磷酸（50：50：0.3）检测波长：276nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按黄芩苷峰计算应不得低于2000。
3.3对照品溶液的制备
精密称取在100℃减压干燥至恒重的黄芩苷对照品，加流动相制成每1ml含0.01mg的溶液，即得。
3.4供试品溶液的制备
取清热解毒口服液浓缩膏适量，精密量取1ml，置100mL量瓶中，加流动相适量，超声处理20min使溶解，放置至室温，加流动相稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
3.5专属性试验
取石膏、金银花、玄参、地黄、连翘、栀子、甜地丁、龙胆、板蓝根、知母、麦冬按样品制备工艺制成阴性对照样品，照3.4项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在黄芩苷出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
3.6对照品的线性考察
精密称取100℃减压干燥至恒重的黄芩苷对照品5mg，置100ml容量瓶中，加入流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取1、2、3、4、5mL，置于10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照3.2项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，黄芩苷在5～25μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
4.讨论
实验结果表明水提之前用稀乙醇浸渍最佳提取工艺为乙醇体积分数40%，加醇量为2倍，浸泡时间为5小时。测定方法可用于清热解毒口服液中黄芩苷的含量测定。新制备工艺使黄芩苷的含量提高了为原来的1.6倍。
参考文献：
[1]袁梦哲，李绍峰.HPLC法测定清热解毒口服液中绿原酸的含量[J].数理医药学杂志，2011（01）.74
[2]李洪兵.抗炎合剂质量控制的初步探讨[J].中国医药指南，2010（09）.3
[3]赵琦，张军武，安国军.清热解毒口服液薄层鉴别方法的改进研究[J].长春中医药大学学报，2010（06）.34