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摘 要：采用乙醇提取法分别对梵净山绿茶、石阡苔茶和梵净山翠峰中的茶多糖进行提取，用蒽酮-硫酸比色法测定茶多糖的含量。结果表明：3种茶叶的多糖含量依次为：梵净山绿茶为4.99%，石阡苔茶为5.40%，梵净山翠峰为9.03%。由此可知，茶多糖的含量与其品种及产地有密切关系。
关键词：茶多糖；含量；比较分析；蒽酮-硫酸法
中图分类号 S571.1 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）20-23-02
茶叶作为世界三大传统饮料之一，因具有多种营养、保健功能而倍受消费者欢迎[1]。茶叶中含有多种药理成分，如生物碱、蛋白质、芳香物质、果胶质、糖类和多酚类等化合物。茶多糖（Tea Polysaccharide，TPS）是一种类似灵芝多糖和人参多糖的高分子化合物，具有很多功能，是重要的生理活性物质。其杰出功效是降血糖、降血脂，从而达到防治糖尿病的作用，除此之外，还具有抗凝血、降血栓、防辐射等作用[2-7]。目前，国内外学者对茶多糖的提取、分离、纯化工艺进行了较为深入的研究[8]，而对梵净山茶叶中的茶多糖研究则未见报道。因此，笔者对梵净山3种茶叶的茶多糖含量进行分析，以期对开展茶叶的综合利用提供参考，为进一步开发利用本地茶叶及后续研究提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料 梵净山绿茶、石阡苔茶、梵净山翠峰，专卖店购买，预处理保存备用。
1.2 试剂 95%乙醇，天津市富宇精细化工有限公司；无水乙醇，天津市富宇精细化工有限公司；氢氧化钠固体，天津市大茂化学试剂厂；蒽酮，国药集团化学试剂有限公司；葡萄糖，天津市恒兴化学试剂制造有限公司；盐酸，遵义师范学院化学试剂厂；浓硫酸，遵义师范学院化工试剂厂。以上试剂均为国产分析纯。水为二重蒸馏水。
1.3 仪器 101-3型电热鼓风干燥箱，北京科伟永兴仪器有限公司；SHZ-D（Ⅲ）型循环水式真空泵，巩义市予华仪器有限责任公司；T6新世纪型紫外分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司；MM823EC8-PS（X）型美的微波炉，佛山市顺德区美的微波电器制造有限公司；80-2型离心沉淀机，江苏金坛市中大仪器厂；AR124CN型电子天平，奥豪斯仪器上海有限公司。
1.4 实验方法[9-12]
1.4.1 材料预处理 用乙酸乙酯浸泡茶叶3.5h后，再用无水乙醇清洗2次，烘干至恒重。乙酸乙酯（mL）：茶叶（g）=6：1。
1.4.2 葡萄糖标准曲线制作[13] 准确称取0.1g葡萄糖（分析纯），溶解并用蒸馏水定容至1 000mL后，分别吸0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2配制成浓度为0.02、0.04、0.06、0.08、0.10、0.12mg/mL，各取2mL于试管中，再加入4mL的蒽酮试剂，迅速浸入冰水中冷却，待几支试管均匀加完后一起浸入沸水浴中，准确保温10min后取出冷却，以空白管作对照，在波长620nm处测定吸光度。
1.4.3 配制蒽酮-硫酸试液 精密称取0.165g蒽酮，加50mL浓硫酸，置于棕色瓶中，混合摇匀置于冰箱中（现配现用）。
1.5 测定样品中茶多糖含量[14]
1.5.1 茶多糖的提取 预处理后的茶叶→粉碎→过60目筛→加入浸提剂→微波辅助提取→离心取上清液→Sevage法脱蛋白→离心→活性炭脱色→浓缩→加乙醇沉淀24h→离心取沉淀→乙醇洗涤→定容显色→测吸光值→计算多糖提取率。
1.5.2 茶多糖的含量测定 精密吸取所得样品溶液1mL于具塞试管中，按绘制标准曲线的方法测定吸光度（A），由回归方程计算出样品中茶多糖的含量。
2 结果与分析
2.1 葡萄糖标准曲线 以吸光度（A）为纵坐标，葡萄糖浓度（C）为横坐标，得标准曲线（图1）。
由此可以得出多糖提取率的计算公式：提取率（%）=[（A-0.004）∕8.178×V∕M∕1 000]×100。式中：A为吸光度；M为称取茶的质量（g）；V为浸提液体积（mL）。
2.2 3种茶叶中茶多糖的含量 梵净山中的茶叶多糖含量在4.99%～9.03%，3种茶叶中梵净山翠峰茶多糖含量最高（9.03%），其次是石阡苔茶（5.40%），再次是梵净山绿茶（4.99%），由于它们的生境不同，因此茶多糖含量有一定差异。
3 结果与讨论
采用乙醇提取法对梵净山3种茶叶茶多糖在微波作用下进行提取，蒽酮-硫酸比色法进行比色，通过葡萄糖标准曲线计算茶多糖含量，此法操作简便。研究结果表明：茶多糖含量最高为梵净山翠峰（9.03%），其次为石阡苔茶（5.40%），再次为梵净山绿茶（4.99%）。
茶叶中茶多糖的含量与许多因素有关，一般认为，不同种类和产地茶叶中的茶多糖含量有所不同。余正文等[15]对贵州十大名茶遵义毛峰、湄江翠片、都匀毛尖、雀舌报春、湄潭翠芽、东坡毛尖、贵定雪芽、富硒绿茶、瀑布毛峰、羊艾毛峰的多糖含量进行了研究，结果表明：茶多糖的含量与其品种及产地有密切关系。此外，加工方法对茶叶中多糖含量也产生较大影响。
参考文献
[1]杨晓萍，倪德江，郭大勇，等.微波萃取茶叶有效成分的研究[J].华中农业大学学报，2003，22（5）：505-507.
[2]陈海霞，谢笔钧.茶多糖药效研究概况[J].中药材，2001，24（1）：65-67.
[3]王盈峰，王登良，严玉琴.茶多糖的研究进展[J].福建茶叶，2003（2）：14-16.
[4]傅博强，谢明勇，周鹏.茶叶多糖的提取纯化、组成及药理作用研究进展[J].南昌大学学报，2001，25（4）：225-228.
[5]王淑如，王丁刚.茶叶多糖的抗凝血及抗血栓作用[J].中草药，1992，23（5）： 254-256.
[6]陈海霞，谢笔筠.茶多糖小鼠实验性糖尿病的防治作用[J].营养学报，2002，24（1）： 85-86.
[7]周杰，丁建平，王泽农，等.茶多糖对小鼠血糖、血脂和免疫功能的影响[J].茶叶科学，1997，17（1）： 75-79.
[8]赵龙飞，周红杰，安文杰.云南普洱茶保健功效的研究[J].食品研究与开发，2005，26（2）：114-116.
[9]王妍馨，颜仁龙，张小荣，等.峨眉山粗老茶中茶多糖的含量测定[J].时珍国医药，2009，20（5）：1 106-1 107.
[10]李碧婵，马森.武夷岩茶中茶多糖的提取研究[J].南平师专学报，2007，26（2）：40-42.
[11]杨辉.蒽酮-硫酸比色法测定玉竹多糖含量的研究[J].安徽医药，2006，10（8）：587.
[12]林建军，秦菁莉，周平.黄金茶多糖的含量测定[J].大理学院学报，2009，8（6）：18-19.
[13]李粉玲，蔡汉权，朱梓文.凤凰茶多糖微波提取工艺[J].食品与发酵工业，2011，37（11）：235-238.
[14]田玲.六盘水地区4 种茶叶茶多糖含量的比较[J].六盘水师范高等专科学校学报，2010，22（3）：31-33.
[15]Park J，Kim B C.Conventional versus ultrasonic synthesis of zeolite 4A from kaolin[J].Journal of Materials Science Letters，2001，20：53l-533.
（责编：徐世红）
关键词：茶多糖；含量；比较分析；蒽酮-硫酸法
中图分类号 S571.1 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）20-23-02
茶叶作为世界三大传统饮料之一，因具有多种营养、保健功能而倍受消费者欢迎[1]。茶叶中含有多种药理成分，如生物碱、蛋白质、芳香物质、果胶质、糖类和多酚类等化合物。茶多糖（Tea Polysaccharide，TPS）是一种类似灵芝多糖和人参多糖的高分子化合物，具有很多功能，是重要的生理活性物质。其杰出功效是降血糖、降血脂，从而达到防治糖尿病的作用，除此之外，还具有抗凝血、降血栓、防辐射等作用[2-7]。目前，国内外学者对茶多糖的提取、分离、纯化工艺进行了较为深入的研究[8]，而对梵净山茶叶中的茶多糖研究则未见报道。因此，笔者对梵净山3种茶叶的茶多糖含量进行分析，以期对开展茶叶的综合利用提供参考，为进一步开发利用本地茶叶及后续研究提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料 梵净山绿茶、石阡苔茶、梵净山翠峰，专卖店购买，预处理保存备用。
1.2 试剂 95%乙醇，天津市富宇精细化工有限公司；无水乙醇，天津市富宇精细化工有限公司；氢氧化钠固体，天津市大茂化学试剂厂；蒽酮，国药集团化学试剂有限公司；葡萄糖，天津市恒兴化学试剂制造有限公司；盐酸，遵义师范学院化学试剂厂；浓硫酸，遵义师范学院化工试剂厂。以上试剂均为国产分析纯。水为二重蒸馏水。
1.3 仪器 101-3型电热鼓风干燥箱，北京科伟永兴仪器有限公司；SHZ-D（Ⅲ）型循环水式真空泵，巩义市予华仪器有限责任公司；T6新世纪型紫外分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司；MM823EC8-PS（X）型美的微波炉，佛山市顺德区美的微波电器制造有限公司；80-2型离心沉淀机，江苏金坛市中大仪器厂；AR124CN型电子天平，奥豪斯仪器上海有限公司。
1.4 实验方法[9-12]
1.4.1 材料预处理 用乙酸乙酯浸泡茶叶3.5h后，再用无水乙醇清洗2次，烘干至恒重。乙酸乙酯（mL）：茶叶（g）=6：1。
1.4.2 葡萄糖标准曲线制作[13] 准确称取0.1g葡萄糖（分析纯），溶解并用蒸馏水定容至1 000mL后，分别吸0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2配制成浓度为0.02、0.04、0.06、0.08、0.10、0.12mg/mL，各取2mL于试管中，再加入4mL的蒽酮试剂，迅速浸入冰水中冷却，待几支试管均匀加完后一起浸入沸水浴中，准确保温10min后取出冷却，以空白管作对照，在波长620nm处测定吸光度。
1.4.3 配制蒽酮-硫酸试液 精密称取0.165g蒽酮，加50mL浓硫酸，置于棕色瓶中，混合摇匀置于冰箱中（现配现用）。
1.5 测定样品中茶多糖含量[14]
1.5.1 茶多糖的提取 预处理后的茶叶→粉碎→过60目筛→加入浸提剂→微波辅助提取→离心取上清液→Sevage法脱蛋白→离心→活性炭脱色→浓缩→加乙醇沉淀24h→离心取沉淀→乙醇洗涤→定容显色→测吸光值→计算多糖提取率。
1.5.2 茶多糖的含量测定 精密吸取所得样品溶液1mL于具塞试管中，按绘制标准曲线的方法测定吸光度（A），由回归方程计算出样品中茶多糖的含量。
2 结果与分析
2.1 葡萄糖标准曲线 以吸光度（A）为纵坐标，葡萄糖浓度（C）为横坐标，得标准曲线（图1）。
由此可以得出多糖提取率的计算公式：提取率（%）=[（A-0.004）∕8.178×V∕M∕1 000]×100。式中：A为吸光度；M为称取茶的质量（g）；V为浸提液体积（mL）。
2.2 3种茶叶中茶多糖的含量 梵净山中的茶叶多糖含量在4.99%～9.03%，3种茶叶中梵净山翠峰茶多糖含量最高（9.03%），其次是石阡苔茶（5.40%），再次是梵净山绿茶（4.99%），由于它们的生境不同，因此茶多糖含量有一定差异。
3 结果与讨论
采用乙醇提取法对梵净山3种茶叶茶多糖在微波作用下进行提取，蒽酮-硫酸比色法进行比色，通过葡萄糖标准曲线计算茶多糖含量，此法操作简便。研究结果表明：茶多糖含量最高为梵净山翠峰（9.03%），其次为石阡苔茶（5.40%），再次为梵净山绿茶（4.99%）。
茶叶中茶多糖的含量与许多因素有关，一般认为，不同种类和产地茶叶中的茶多糖含量有所不同。余正文等[15]对贵州十大名茶遵义毛峰、湄江翠片、都匀毛尖、雀舌报春、湄潭翠芽、东坡毛尖、贵定雪芽、富硒绿茶、瀑布毛峰、羊艾毛峰的多糖含量进行了研究，结果表明：茶多糖的含量与其品种及产地有密切关系。此外，加工方法对茶叶中多糖含量也产生较大影响。
参考文献
[1]杨晓萍，倪德江，郭大勇，等.微波萃取茶叶有效成分的研究[J].华中农业大学学报，2003，22（5）：505-507.
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[5]王淑如，王丁刚.茶叶多糖的抗凝血及抗血栓作用[J].中草药，1992，23（5）： 254-256.
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[8]赵龙飞，周红杰，安文杰.云南普洱茶保健功效的研究[J].食品研究与开发，2005，26（2）：114-116.
[9]王妍馨，颜仁龙，张小荣，等.峨眉山粗老茶中茶多糖的含量测定[J].时珍国医药，2009，20（5）：1 106-1 107.
[10]李碧婵，马森.武夷岩茶中茶多糖的提取研究[J].南平师专学报，2007，26（2）：40-42.
[11]杨辉.蒽酮-硫酸比色法测定玉竹多糖含量的研究[J].安徽医药，2006，10（8）：587.
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[13]李粉玲，蔡汉权，朱梓文.凤凰茶多糖微波提取工艺[J].食品与发酵工业，2011，37（11）：235-238.
[14]田玲.六盘水地区4 种茶叶茶多糖含量的比较[J].六盘水师范高等专科学校学报，2010，22（3）：31-33.
[15]Park J，Kim B C.Conventional versus ultrasonic synthesis of zeolite 4A from kaolin[J].Journal of Materials Science Letters，2001，20：53l-533.
（责编：徐世红）