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摘要 目的：探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、胶体金免疫层析法（GICA）对梅毒的诊断价值。方法：对200份梅毒阳性标本和200份梅毒阴性标本采用ELISA、TRUST、GICA三种方法进行检测。结果：ELISA的敏感度为100%，特异性为100.0%，TRUST的灵敏度为52.5%，特异性为100%，GICA的灵敏度为99%，特异性为100.0%。ELISA与TRUST的灵敏度比较，差异有统计学意义（X?=9.41，P<0.05），GICA与TRUST的灵敏度比较，差异有统计学意义（X?=9.38，P<0.05），ELISA与GICA的灵敏度比较无显著差异。结论：用GICA对梅毒进行筛查，ELISA双抗原夹心法对梅毒进行确诊，并用ELISA结合TRUST进行疗效判断，既能快速筛查又具备较高特异性，是较为理想的梅毒血清学检查项目组合。
关键词：梅毒抗体，酶联免疫吸附试验，甲苯胺红不加热血清试验，胶体金免疫层析法
梅毒属于一种性传播疾病，病原体为苍白密螺旋体苍白亚种，又称梅毒螺旋体，梅毒螺旋体主要通过性接触直接传染，手术、哺乳、输血、接触污染物也可被传染【1】。近年来为控制梅毒的传播，多数医院对手术、输血及各种创伤性检查的患者都进行梅毒的实验室检查【2】。机体感染梅毒螺旋体后可产生特异性抗螺旋体抗体（TP-Ab）和非特异性抗类脂质抗体。TP-Ab是诊断梅毒螺旋体感染的依据。因此，选择灵敏度高的实验室检测方法，对梅毒的早期诊断早期治疗，尤其对控制其蔓延至关重要。为了解酶联免疫吸附试验（ELISA）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、胶体金免疫层析法（GICA）灵敏度和特异性的差异，作者对200份梅毒阳性标本和200份梅毒阴性标本分别进行检测，现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 收集梧州红十字会医院2014年1月至2014年3月住院及门诊被确诊为梅毒患者的200份阳性血清作为实验组，其中男性105例，女性95例，年龄22-70岁；同期本院经健康体检为健康人的200份梅毒阴性血清为健康对照组，男98例，女性102例，年龄20-75岁。
1.2仪器与试剂 ELISA试剂盒由英科新创（厦门）科技有限公司生产，GICA试剂条由英科新创（厦门）科技有限公司生产，TRUST试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供。采用DYNEX-CB371酶标仪，汇松PW-960洗板机，EZR-H6000微型振荡器。
1.3方法 所以受检者均空腹抽静脉血3ml，3000转/分离心10分钟分离血清，血清标本如在24h内检测则置于4℃冰箱保存。所有标本分别用3种方法同时检测，其操作均严格按试剂盒内的操作说明书进行，质控血清由广西临床检验中心提供，靈敏度和特异性计算方法：灵敏度（%）=真阳性/（真阳性+假阴性） ×100%，特异性（%）=真阴性/（真阴性+假阳性）×100%。
1.4统计学处理 计数资料采用X?检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 梅毒质控品选用广西临床检验中心下发的梅毒室间质评样本。使用试剂盒内阳性血清作对照，结果均为阳性，使用试剂盒内阴性血清作对照，结果均为阴性。200份健康人标本结果均为阴性。
2.2 TRUST法与ELISA法比较，P<0.05；TRUST法与GICA法比较，P<0.05；ELISA法与GICA法比较，P>0.05。3种试剂盒的特性比较见表1，方法检测结果见表2。
从表1、表2可见ELISA法无论在灵敏度、特异性、真阳性率、真阴性率的结果都与确证试验GICA法差异无统计学意义（P>0.05），且明显高于TRUST法。
3 讨论
梅毒螺旋体抗体检测作为诊断梅毒的依据，其实验方法选择尤其重要。梅毒螺旋体（TP）感染机体后可产生特异性的密螺旋体抗体和非特异性的抗类脂质抗体（即反应素）。TRUST法检测血清中反应素的非特异性试验，是采用活化心磷脂卵磷脂胆固醇配制VDRL抗原重悬于含甲苯胺红特制溶液中与梅毒患者血清中反应素发生粉红色凝集，因而检测出梅毒。但其灵敏度和特异性较差，仅作为血清筛查试验。同时TRUST实验对早期梅毒、晚期梅毒及治疗后梅毒检测的灵敏度低，以及对神经梅毒的不敏感性，常出现假阴性而漏检，只作为梅毒疗效观察或随访有否复发或再感染的指标【3】。目前我院实验室采用双抗原夹心ELISA法检测梅毒螺旋体抗体，所检测的是特异性抗体，酶标仪仪器判读特异性高，纯度高，具有较好的重复性，结果清晰，费用相对较低，对各期梅毒均有较高灵敏度和特异性等优点，可用于临床大批量样本的初筛和梅毒感染的确证；ELISA法梅毒特异性抗体出现早、消失迟，即便经过正规抗梅治疗，仍可检出其特异性抗体，甚至可终生检出【4】。GICA法采用胶体金免疫检测技术和层析原理，定性检测血清（浆）样本中的梅毒螺旋体抗体，其特异性强，操作简便、快速，灵敏度高，已是目前公认的梅毒血清确证试验，特别适用于检测梅毒潜伏期，缺点是单个检测成本较高，大批量样本检测时经济成本较高。综上所述，ELISA法与GICA法无统计学意义，梅毒血清检查应同时做TRUST过筛试验和GICA法、ELISA法确证试验，这将对梅毒早期诊断与治疗及控制蔓延到至关重要的作用。
参考文献：
[1] 丛玉隆，尹一兵，陈瑜.检验医学高级教程下册2010，66：1114.
[2] 程玉萍，梅毒研究近况[J].医学综述，2007，13（19）：1470-1472.
[3] 庞妍，张志勇，赵燕玲，等.天津医科大学学报，2007，13（3）：441.
[4] 刘嫦娥.两种方法检测梅毒抗体的方法学评价[J].检验医学与临床，2008，5（5）：273-274.
关键词：梅毒抗体，酶联免疫吸附试验，甲苯胺红不加热血清试验，胶体金免疫层析法
梅毒属于一种性传播疾病，病原体为苍白密螺旋体苍白亚种，又称梅毒螺旋体，梅毒螺旋体主要通过性接触直接传染，手术、哺乳、输血、接触污染物也可被传染【1】。近年来为控制梅毒的传播，多数医院对手术、输血及各种创伤性检查的患者都进行梅毒的实验室检查【2】。机体感染梅毒螺旋体后可产生特异性抗螺旋体抗体（TP-Ab）和非特异性抗类脂质抗体。TP-Ab是诊断梅毒螺旋体感染的依据。因此，选择灵敏度高的实验室检测方法，对梅毒的早期诊断早期治疗，尤其对控制其蔓延至关重要。为了解酶联免疫吸附试验（ELISA）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、胶体金免疫层析法（GICA）灵敏度和特异性的差异，作者对200份梅毒阳性标本和200份梅毒阴性标本分别进行检测，现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 收集梧州红十字会医院2014年1月至2014年3月住院及门诊被确诊为梅毒患者的200份阳性血清作为实验组，其中男性105例，女性95例，年龄22-70岁；同期本院经健康体检为健康人的200份梅毒阴性血清为健康对照组，男98例，女性102例，年龄20-75岁。
1.2仪器与试剂 ELISA试剂盒由英科新创（厦门）科技有限公司生产，GICA试剂条由英科新创（厦门）科技有限公司生产，TRUST试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供。采用DYNEX-CB371酶标仪，汇松PW-960洗板机，EZR-H6000微型振荡器。
1.3方法 所以受检者均空腹抽静脉血3ml，3000转/分离心10分钟分离血清，血清标本如在24h内检测则置于4℃冰箱保存。所有标本分别用3种方法同时检测，其操作均严格按试剂盒内的操作说明书进行，质控血清由广西临床检验中心提供，靈敏度和特异性计算方法：灵敏度（%）=真阳性/（真阳性+假阴性） ×100%，特异性（%）=真阴性/（真阴性+假阳性）×100%。
1.4统计学处理 计数资料采用X?检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 梅毒质控品选用广西临床检验中心下发的梅毒室间质评样本。使用试剂盒内阳性血清作对照，结果均为阳性，使用试剂盒内阴性血清作对照，结果均为阴性。200份健康人标本结果均为阴性。
2.2 TRUST法与ELISA法比较，P<0.05；TRUST法与GICA法比较，P<0.05；ELISA法与GICA法比较，P>0.05。3种试剂盒的特性比较见表1，方法检测结果见表2。
从表1、表2可见ELISA法无论在灵敏度、特异性、真阳性率、真阴性率的结果都与确证试验GICA法差异无统计学意义（P>0.05），且明显高于TRUST法。
3 讨论
梅毒螺旋体抗体检测作为诊断梅毒的依据，其实验方法选择尤其重要。梅毒螺旋体（TP）感染机体后可产生特异性的密螺旋体抗体和非特异性的抗类脂质抗体（即反应素）。TRUST法检测血清中反应素的非特异性试验，是采用活化心磷脂卵磷脂胆固醇配制VDRL抗原重悬于含甲苯胺红特制溶液中与梅毒患者血清中反应素发生粉红色凝集，因而检测出梅毒。但其灵敏度和特异性较差，仅作为血清筛查试验。同时TRUST实验对早期梅毒、晚期梅毒及治疗后梅毒检测的灵敏度低，以及对神经梅毒的不敏感性，常出现假阴性而漏检，只作为梅毒疗效观察或随访有否复发或再感染的指标【3】。目前我院实验室采用双抗原夹心ELISA法检测梅毒螺旋体抗体，所检测的是特异性抗体，酶标仪仪器判读特异性高，纯度高，具有较好的重复性，结果清晰，费用相对较低，对各期梅毒均有较高灵敏度和特异性等优点，可用于临床大批量样本的初筛和梅毒感染的确证；ELISA法梅毒特异性抗体出现早、消失迟，即便经过正规抗梅治疗，仍可检出其特异性抗体，甚至可终生检出【4】。GICA法采用胶体金免疫检测技术和层析原理，定性检测血清（浆）样本中的梅毒螺旋体抗体，其特异性强，操作简便、快速，灵敏度高，已是目前公认的梅毒血清确证试验，特别适用于检测梅毒潜伏期，缺点是单个检测成本较高，大批量样本检测时经济成本较高。综上所述，ELISA法与GICA法无统计学意义，梅毒血清检查应同时做TRUST过筛试验和GICA法、ELISA法确证试验，这将对梅毒早期诊断与治疗及控制蔓延到至关重要的作用。
参考文献：
[1] 丛玉隆，尹一兵，陈瑜.检验医学高级教程下册2010，66：1114.
[2] 程玉萍，梅毒研究近况[J].医学综述，2007，13（19）：1470-1472.
[3] 庞妍，张志勇，赵燕玲，等.天津医科大学学报，2007，13（3）：441.
[4] 刘嫦娥.两种方法检测梅毒抗体的方法学评价[J].检验医学与临床，2008，5（5）：273-274.