【摘 要】
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目的：探讨过表达叉头转录因子1 （FOXO1）的骨髓间充质干细胞（BMSCs）对哮喘小鼠肺嗜酸性粒细胞浸润和气道重构的抑制作用，并阐明其可能的作用机制。方法：分离小鼠的BMSCs，采用油红O染色和茜素红染色鉴定BMSCs，流式细胞术鉴定BMSCs的表型。取对数生长期的BMSCs，分为对照组（不进行处理），FOXO1-BMSCs组（感染携带FOXO1基因的重组慢病毒）和NC-BMSCs组（感染阴性对
【基金项目】
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新疆生产建设兵团科技局科技攻关与成果转化计划项目（2021AD006）；
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目的：探讨过表达叉头转录因子1 （FOXO1）的骨髓间充质干细胞（BMSCs）对哮喘小鼠肺嗜酸性粒细胞浸润和气道重构的抑制作用，并阐明其可能的作用机制。方法：分离小鼠的BMSCs，采用油红O染色和茜素红染色鉴定BMSCs，流式细胞术鉴定BMSCs的表型。取对数生长期的BMSCs，分为对照组（不进行处理），FOXO1-BMSCs组（感染携带FOXO1基因的重组慢病毒）和NC-BMSCs组（感染阴性对照重组慢病毒）。采用实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法检测各组BMSCs中FOXO1 mRNA表达水平，Western blotting法检测各组BMSCs中FOXO1蛋白表达水平。将40只小鼠随机分为对照组（给予生理盐水）、模型组（给予生理盐水）、NC-BMSCs组（给予NCBMSCs悬液）和FOXO1-BMSCs组（给予FOXO1-BMSCs悬液），每组10只。除对照组外，其他3组小鼠采用卵清蛋白（OVA）和雾化激发的方法制备哮喘动物模型。检测各组小鼠BALF中细胞分类计数，HE染色观察各组小鼠肺组织病理形态表现，免疫荧光法检测各组小鼠肺组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和增殖细胞核蛋白（PCNA）表达情况，Image-Pro Plus软件测量各组小鼠支气管管腔内周长（Pi）、管壁面积（W）、支气管平滑肌面积（S）和支气管平滑肌细胞核数目（N），并计算S/Pi、W/Pi和N/Pi,Western blotting法检测各组小鼠肺组织中基质金属蛋白酶9 （MMP-9）、基质金属蛋白酶12 （MMP-12）和基质金属蛋白酶组织抑制因子1 （TIMP-1）蛋白表达水平。结果：分离培养的BMSCs呈纺锤形，油红O染色和茜素红染色后可见明显红色脂滴形成和橘红色沉淀，BMSCs表面CD29、CD44和CD71表达量升高，CD34、CD45和HLA-DR表达量降低。与对照组和NCBMSCs组比较，FOXO1-BMSCs组BMSCs中FOXO1 mRNA和蛋白表达水平升高（P＜0.05）。与模型组和NC-BMSCs组比较，FOXO1-BMSCs组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞数减少（P＜0.05），气道及肺泡中炎性细胞浸润程度减轻，S/Pi、W/Pi和N/Pi降低（P＜0.05），肺组织中α-SMA和PCNA表达量降低，MMP-9、MMP-12和TIMP-1蛋白表达水平降低（P＜0.05）。结论：过表达FOXO1的BMSCs能够减轻哮喘小鼠肺部炎性细胞浸润，尤其以嗜酸性粒细胞为主，并抑制气道重构，从而缓解哮喘的症状。
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