探讨NALP3炎症小体在间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征(IC/BPS)中的表达和作用。
方法收集2015年12月至2018年1月我院行膀胱镜检查的女性IC/PBS患者膀胱组织和膀胱癌患者癌旁正常膀胱组织各16例，通过蛋白质印迹法检测NALP3及凋亡蛋白-1(caspase-1)、白介素-1β(IL-1β)含量；同时采用ELISA法检测女性IC/PBS患者及正常人(各16例)尿液中IL-1β含量。将60只成年雌性SD大鼠(体重200～250 g)，通过分层随机分组法分为4组，每组各15只：对照组(膀胱灌注生理盐水0.5ml)、模型组[膀胱灌注透明质酸酶(4 mg/ml)0.5 ml]、NALP3拮抗组[膀胱灌注透明质酸酶(4 mg/ml)0.5 ml ＋格列本脲(10 mg/kg)]、黏膜保护剂组[膀胱灌注透明质酸酶(4 mg/ml)0.5 ml＋透明质酸(0.8 mg/ml)]。构建各组大鼠模型，采用尿动力学检测评估膀胱功能变化；甲苯胺蓝染色检测肥大细胞变化；蛋白质印迹法检测NALP3、caspase-1、IL-1β含量；HE染色检测膀胱组织炎症情况；ELISA法检测大鼠尿液中IL-1β含量；记录VonFrey刷0.07、0.4、1.0 g刺激强度的疼痛评分；Transwell实验比较200、400 ng IL-1β和200 ng干细胞因子对肥大细胞的趋化作用。
结果蛋白质印迹法检测结果显示，IC/PBS患者膀胱组织中NALP3、caspase-1、IL-1β的表达量较膀胱癌癌旁正常组织明显升高(0.22±0.08与0.11±0.02，0.25±0.03与0.10±0.01，0.19±0.04与0.11±0.02，均P<0.05)；IC/PBS患者尿液中IL-1β含量高于正常人[(381±112) μg/L与(98±40) μg/L，P<0.01]。在大鼠实验中，模型组较对照组大鼠排尿时间间隔缩短[(120.0±15.6)s与(447.3±24.6)s]，膀胱容量降低[(0.34±0.02)ml与(1.33±0.04)ml]；黏膜保护剂组和NALP3拮抗组大鼠排尿时间间隔[(323.0±16.3)s ，(280.0±12.5)s]和膀胱容量[(1.14±0.05)ml，(0.84±0.04)ml]均较模型组明显增加(P<0.05)。模型组大鼠膀胱肥大细胞的数量高于对照组[(3.4±0.8)个与(0.4±0.2)个，P<0.05]，黏膜保护剂组和NALP3拮抗组膀胱肥大细胞数量[(1.8±0.5)个，(1.5±0.7)个]均低于模型组(P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示，模型组较对照组大鼠膀胱中NALP3(5.91±0.33与1.00±0.12)、caspase-1(6.75±0.42与1.00±0.22)、IL-1β(7.12±0.45与1.00±0.18)的含量均明显升高，黏膜保护剂组和NALP3拮抗组NALP3(2.921±0.21，2.07±0.18)、caspase-1(3.28±0.31，2.25±0.19)、IL-1β(3.33±0.41，1.98±0.21)的含量均低于模型组(P<0.001)。模型组较对照组大鼠疼痛评分均显著增加(0.07 g：7.5±1.8与2.1±0.5；0.4 g：9.2±1.9与5.2±1.1；1.0 g：15.4±3.8与6.8±1.5；P<0.05)；黏膜保护剂组和NALP3拮抗组较模型组大鼠疼痛评分明显下降(0.07 g：2.4±0.3，2.8±0.7；0.4 g：5.2±0.4，6.5±1.3；1.0 g：6.4±0.8，7.3±1.1；P<0.05)。体外Transwell实验结果显示400 ng的IL-1β对肥大细胞的趋化作用与200 ng的干细胞因子类似[(3 800±400)个与(4 800±500)个，P>0.05]。
结论NALP3炎症小体在IC/BPS膀胱组织中高表达，其可能通过促进IL-1β释放而趋化肥大细胞，从而加重IC/BPS炎症反应和临床症状。