Oenococcus oeni苹果酸-乳酸酶基因克隆及其在酿酒酵母中的表达

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【摘要】

：

苹果酸-乳酸酶是苹果酸-乳酸发酵过程中负责苹果酸转化为乳酸的功能酶.在进行酒酒球菌SD-2a的苹果酸-乳酸酶基因(mleA)克隆测序基础上,以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件

【作者】

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刘延琳蒋思欣何秀萍李华张博润

【机构】

：

西北农林科技大学葡萄酒学院,中国科学院微生物研究所

【出处】

：

中国生物工程杂志

【发表日期】

：

2005年12期

【关键词】

：

酒酒球菌苹果酸-乳酸酶基因转化表达 Oenococcus oeni Malo-lactic enzyme gene Expression Saccharom

【基金项目】

：

陕西省自然科学基金，西北农林科技大学校科研和教改项目

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苹果酸-乳酸酶是苹果酸-乳酸发酵过程中负责苹果酸转化为乳酸的功能酶.在进行酒酒球菌SD-2a的苹果酸-乳酸酶基因(mleA)克隆测序基础上,以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件,以大肠杆菌-酵母菌穿梭质粒YEp352为载体,构建了重组表达质粒并转化酿酒酵母YS58.酵母转化子用SD/-Ura平板筛选鉴定.斑点杂交检测表明目的基因mleA转化到受体菌中,SDS-PAGE检测表明获得的转化子表达了约60kDa的目标蛋白.获得的转化子在添加了L-苹果酸的培养基中培养4d;取培养液上清用HPLC检测L-苹

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