【摘 要】
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目的 制备加载白血病抗原肽PR1的HLA-A*0201四聚体.方法 构建HLA-A*0201-BSP和β2-微球蛋白(β2M)原核表达载体,进行目的蛋白表达、纯化.在体外将PR1(VLQELNVTV)与纯化的HLA-
【机 构】
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北京第二炮兵总医院血液科,军事医学科学院基础医学研究所
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目的 制备加载白血病抗原肽PR1的HLA-A*0201四聚体.方法 构建HLA-A*0201-BSP和β2-微球蛋白(β2M)原核表达载体,进行目的蛋白表达、纯化.在体外将PR1(VLQELNVTV)与纯化的HLA-A*0201-BSP、β2M通过稀释复性折叠成HLA-A*0201-PR1复合物.利用BirA酶进行生物素标记.再经阴离子交换纯化得到生物素化的HIA-A*0201-PR1复合物单体.此单体与PE标记的链霉亲和素按4:1比例混合,即可形成四聚体.结果 成功制备了HLA-A*0201-PR1四聚体.结论 制备的HLA-A*0201-PR1四聚体为定量检测白血病患者体内PR1抗原特异性的细胞毒性T淋巴细胞提供了有力工具.
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