【摘 要】
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从匍枝根霉TP-02中克隆得到cbh1的c DNA,序列测定分析表明,该基因编码526个氨基酸的蛋白质。通过DS2.5同源模拟分析,CBHI酶的活性部位是一个＂桶状＂的隧道结构。将cbh1基因的c D
【机 构】
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安徽工程大学生物与化学工程学院,微生物发酵安徽省工程技术研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31270135）,安徽省自然科学青年基金资助项目（1408085QC61）
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从匍枝根霉TP-02中克隆得到cbh1的c DNA,序列测定分析表明,该基因编码526个氨基酸的蛋白质。通过DS2.5同源模拟分析,CBHI酶的活性部位是一个＂桶状＂的隧道结构。将cbh1基因的c DNA序列克隆到大肠杆菌表达载体p ET22b（＋）中,在大肠杆菌BL21（DE3）中进行诱导表达。采用两步层析法对重组的CBHI蛋白进行纯化,对纯酶的特性进行分析。结果表明：在异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导终浓度为0.5 mmol/L,诱导温度为20℃,诱导时间为14 h,经过纯化后获得比活力为3.57
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