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建立了两步连续离子交换制备色谱分离、纯化聚乙二醇与重组人粒细胞集落刺激因子(Recombinant human granulocytestimulating factor,rhG-CSF)偶联物的方法.首先用阳离子交换色谱将偶联蛋白质和非偶联蛋白质分开,然后使用阴离子交换色谱去除过量的游离聚乙二醇杂质,并分离纯化偶联蛋白异构体分别得到单聚乙二醇化、双聚乙二醇化和三聚乙二醇化的rhG-CSF.它们经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析均为单带.采用基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱(