探讨马钱苷(Loganin)对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响及分子机制。
方法常规培养人胃癌细胞株AGS、BGC823及SGC7901。噻唑蓝(MTT)技术检测Loganin干预对细胞活性的影响。划痕实验及Transwell小室侵袭实验检测Loganin对BGC823细胞迁移及侵袭能力的影响。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)方法检测BGC823细胞株在药物干预前后相关基因和磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路蛋白变化。
结果噻唑蓝(MTT)结果显示，Loganin作用48 h后，AGS、BGC823及SGC7901细胞的活性分别为(0.748±0.051)、(0.581±0.042)、(0.412±0.037)，BGC823的活性最低(F＝44.101，P<0.01)。随着Loganin剂量增加，增殖细胞核抗原(PCNA)的mRNA和蛋白表达水平逐渐降低(F＝36.298、47.942，P<0.01)。与对照组比较，Loganin作用后BGC823细胞的迁移、侵袭能力下降，高剂量(200 mg/L)Loganin的作用比低剂量组(50 mg/L)明显(迁移：F＝87.750，P<0.01；侵袭：F＝85.749，P<0.01)。qPCR和Western blot结果显示，与对照组比较，Loganin作用后BGC823细胞侵袭迁移相关基因的mRNA和蛋白水平发生改变，高剂量Loganin作用更明显(P<0.01)。qPCR和Western blot结果显示，与对照组比较，Loganin作用后，BGC823细胞EMT相关基因发生改变，高剂量Loganin作用更明显(P<0.01)。Loganin作用后，BGC823细胞的PI3K-Akt信号通路的活性减弱，p-PI3K和p-Akt的表达明显降低，高剂量Loganin的作用更明显(F＝38.590、63.563，P<0.01)。
结论Loganin可能通过调控PI3K-Akt信号通路的活性而抑制胃癌细胞EMT。