【摘 要】
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目的 探讨单端孢菌素对肺癌耐顺铂细胞系A549/DDP顺铂耐药性的逆转作用及机制.方法 应用MTS法检测单端孢菌素对A549/DDP细胞顺铂敏感性的影响,流式细胞术检测肿瘤细胞表面P-
【机 构】
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天津市第五中心医院药剂科,天津300450;天津市儿童医院,天津市儿科研究所,天津300074
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目的 探讨单端孢菌素对肺癌耐顺铂细胞系A549/DDP顺铂耐药性的逆转作用及机制.方法 应用MTS法检测单端孢菌素对A549/DDP细胞顺铂敏感性的影响,流式细胞术检测肿瘤细胞表面P-糖蛋白(P-Glycoprotein,P-pg)表达以及胞内罗丹明-123(Rhodamine-123,Rh-123)含量的变化,生化法检测细胞内SOD和GSH的水平,Western blot法和Real timePCR检测肿瘤细胞多药耐药蛋白MDR1、MRP1和Survivin表达的变化,Western blot法检测Akt磷酸化的变化,液相芯片法检测TGF-β,IL-6和IL-8的变化,应用双萤光报告基因技术检测细胞NF-κB和AP-1转录活性.结果 单端孢菌素可增加细胞对顺铂的敏感性,经5 μg·mL-1和10 μg·mL-1单端孢菌素作用72 h后,耐药逆转倍数(RF)为1.84和3.95倍.经5 μg·mL-1和10 μg·mL-1单端孢菌素作用24 h后,肿瘤细胞P-gp表达分别下降了62.6％和19.8％,细胞中Rh-123含量分别提高了183.3％和308.3％,细胞内SOD水平下降65.2％和50.1％,GSH水平下降71.6％和46.3％,MDR1的mRNA水平下降了72.7％和52.3％,MRP1的mRNA水平下降了64.0％和22.5％,Survivin的mRNA水平下降了45.8％和14.7％,Akt磷酸化水平下降,TGF-β分泌水平下降了80.2％和51.5％,IL-6分泌水平下降了73.4％和37.2％,IL-8分泌水平下降了71.2％和43.2％,NF-κB转录活性下降42.3％和22.7％,AP-1的转录活性下降了57.4％和32.5％.结论 单端孢菌素逆转A549/DDP对顺铂的耐药性,这一作用与抑制药物外排,负调控肿瘤耐药相关蛋白的表达有关.
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