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摘 要：本文采用高校液相测定了注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量，固定相为：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-甲醇-四氢呋喃-磷酸二氢铵水溶液-10%四丁基氢氧化铵（20∶255∶25∶700∶12.8）为流动相，检测波长为272nm，流速1.0mL·min-1，柱温：30℃。本文对注射用头孢美唑钠中的头孢美唑钠进行含量测定的试验方法，结果表明该法不受其它成分的干扰，分离度好，精密度、重现性佳，可用于注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量测定。
关键词：注射用头孢美唑钠；反相高效液相色谱法；含量
注射用头孢美唑钠，适应症为本品适用于治疗由对头孢美唑钠敏感的金黄色葡萄球菌、变形杆菌、摩氏摩根菌、大肠杆菌、肺炎杆菌、普罗维登斯菌属、拟杆菌属所引起的呼吸系统感染、胆道感染、腹膜炎、尿路感染、妇产科、口腔外科等感染[1-2]。反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系，它正好與由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系（正相色谱）相反。RP-HPLC是当今液相色谱的最主要的分离模式，几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。本文采用高校液相测定了注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量。
1 仪器与试药
屹谱仪器U-1810准双光束紫外可见分光光度计（屹谱仪器制造（上海）有限公司）；Aurora-F1实验室自动洗瓶机（杭州喜瓶者生物技术有限公司）；1810-B石英自动双重蒸馏水器（上海康路仪器设备有限公司）；LC-5520高效液相色谱仪（北京东西分析仪器有限公司）；FR224CN奥豪斯电子天平（上海书培实验设备有限公司）；HYYTH-10小型实验室污水处理设备（潍坊浩宇环保有限公司）；HH-601超级恒温水浴（江苏金坛市亿通电子有限公司）；SCQ-7201E双频加热型超声波清洗机（上海声彦超声波仪器有限公司）；UV2800双光束紫外可见分光光度计（四川汇巨仪器设备有限公司）。头孢美唑钠对照品由中国药品生物制品检定所提供。
2 含量测定
2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[3-5]。色谱柱为奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）；乙腈-甲醇-四氢呋喃-磷酸二氢铵水溶液-10%四丁基氢氧化铵（20∶255∶25∶700∶12.8）为流动相；检测波长为272nm。理论板数按头孢美唑钠峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取注射用头孢美唑钠，精密称定，置10毫升容量瓶内中，加入适量流动相超声溶解，在用流动相定容，摇匀，取续滤液，即得。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取头孢美唑钠对照品适量，用流动相溶解并稀释成每1ml中含10μg的溶液，作为对照溶液。
2.4 阴性溶液的制备
取头孢美唑钠合成过程中原辅料，按照供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在头孢美唑钠出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 准曲线的制备
精密称取头孢美唑钠对照品100.0mg，置25ml容量瓶中，加入水溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取0.2、0.4、0.6、1.2、1.6、2.0mL，置于10mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，头孢美唑钠在80～800μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
精密吸取头孢美唑钠对照品溶液20μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.72%。结果表明，本实验精密度良好。
2.7 重现性试验
分别称取同批注射用头孢美唑钠样品6份，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.78%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8 稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品头孢美唑钠峰面积积分值的RSD为0.78%。结果表明头孢美唑钠至少在4小时内稳定。
2.9 准确度试验
取对照品适量，精密称取已知含量的样品9份，置量瓶中，分别精密加入头孢美唑钠对照品，按项下方法制备成100%、120%、140%。取模拟样品照“含量测定”项下方法试验，计算回收率为99.3%，RSD为0.55%。
2.10 样品含量测定
分别精密吸取对照品溶液10μl，20μl，供试品溶液20μl，注人液相色谱仪，测定，用外标两点法计算，即得，结果三批样品的含量分别为为标示量的99.1%、99.1%、100.9%。
3 讨论
分别考察含1%醋酸0.025mol.L-1醋酸铵溶液-乙腈（75∶25），甲醇-水（35：65），乙腈-甲醇-四氢呋喃-磷酸二氢铵水溶液-10%四丁基氢氧化铵（20∶255∶25∶700∶12.8），乙腈-甲醇-四氢呋喃-磷酸二氢铵水溶液-10%四丁基氢氧化铵（20∶200∶125∶600∶12.8），乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（含三乙胺0.5%，磷酸调pH至3.0）（40：60），乙腈-0.08%磷酸溶液（20：80），0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈-冰醋酸（70：30：1），水-乙腈-三乙胺（80∶20：0.01）不同比例的流动相，结果以乙腈-甲醇-四氢呋喃-磷酸二氢铵水溶液-10%四丁基氢氧化铵（20∶255∶25∶700∶12.8）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-四氢呋喃-磷酸二氢铵水溶液-10%四丁基氢氧化铵（20∶255∶25∶700∶12.8）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量測定。注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量为标示量的105%-95%。
参考文献
[1]彭凤英，卓超，黄文祥，李崇智.头孢美唑钠治疗呼吸系统急性细菌性感染疗效观察[J].重庆医科大学学报，2007（02）.
[2]彭凤英，卓超，黄文祥，李崇智，江南，吴佳玉，熊瑛，王宋平，王荣丽，范贤明，湛晓勤，李多.头孢美唑钠注射剂治疗呼吸系统感染的随机、双盲、多中心临床试验[J].中国抗生素杂志，2006（06）.
[3]王莹莹，龚莉，王成港，王春龙，陈常青.头孢美唑钠的体外降解稳定性[J].中国新药杂志，2012（12）.
[4]蔡尾玉，黄凯文.高效液相色谱法测定注射用头孢美唑钠中头孢美唑含量[J].中国民族民间医药，2012（04）.
[5]边原，何林，夏祺悦.反相高效液相色谱法测定注射用头孢美唑钠的含量[J].中国药业，2010（05）.
关键词：注射用头孢美唑钠；反相高效液相色谱法；含量
注射用头孢美唑钠，适应症为本品适用于治疗由对头孢美唑钠敏感的金黄色葡萄球菌、变形杆菌、摩氏摩根菌、大肠杆菌、肺炎杆菌、普罗维登斯菌属、拟杆菌属所引起的呼吸系统感染、胆道感染、腹膜炎、尿路感染、妇产科、口腔外科等感染[1-2]。反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系，它正好與由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系（正相色谱）相反。RP-HPLC是当今液相色谱的最主要的分离模式，几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。本文采用高校液相测定了注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量。
1 仪器与试药
屹谱仪器U-1810准双光束紫外可见分光光度计（屹谱仪器制造（上海）有限公司）；Aurora-F1实验室自动洗瓶机（杭州喜瓶者生物技术有限公司）；1810-B石英自动双重蒸馏水器（上海康路仪器设备有限公司）；LC-5520高效液相色谱仪（北京东西分析仪器有限公司）；FR224CN奥豪斯电子天平（上海书培实验设备有限公司）；HYYTH-10小型实验室污水处理设备（潍坊浩宇环保有限公司）；HH-601超级恒温水浴（江苏金坛市亿通电子有限公司）；SCQ-7201E双频加热型超声波清洗机（上海声彦超声波仪器有限公司）；UV2800双光束紫外可见分光光度计（四川汇巨仪器设备有限公司）。头孢美唑钠对照品由中国药品生物制品检定所提供。
2 含量测定
2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[3-5]。色谱柱为奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）；乙腈-甲醇-四氢呋喃-磷酸二氢铵水溶液-10%四丁基氢氧化铵（20∶255∶25∶700∶12.8）为流动相；检测波长为272nm。理论板数按头孢美唑钠峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取注射用头孢美唑钠，精密称定，置10毫升容量瓶内中，加入适量流动相超声溶解，在用流动相定容，摇匀，取续滤液，即得。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取头孢美唑钠对照品适量，用流动相溶解并稀释成每1ml中含10μg的溶液，作为对照溶液。
2.4 阴性溶液的制备
取头孢美唑钠合成过程中原辅料，按照供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在头孢美唑钠出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 准曲线的制备
精密称取头孢美唑钠对照品100.0mg，置25ml容量瓶中，加入水溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取0.2、0.4、0.6、1.2、1.6、2.0mL，置于10mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，头孢美唑钠在80～800μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
精密吸取头孢美唑钠对照品溶液20μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.72%。结果表明，本实验精密度良好。
2.7 重现性试验
分别称取同批注射用头孢美唑钠样品6份，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.78%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8 稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品头孢美唑钠峰面积积分值的RSD为0.78%。结果表明头孢美唑钠至少在4小时内稳定。
2.9 准确度试验
取对照品适量，精密称取已知含量的样品9份，置量瓶中，分别精密加入头孢美唑钠对照品，按项下方法制备成100%、120%、140%。取模拟样品照“含量测定”项下方法试验，计算回收率为99.3%，RSD为0.55%。
2.10 样品含量测定
分别精密吸取对照品溶液10μl，20μl，供试品溶液20μl，注人液相色谱仪，测定，用外标两点法计算，即得，结果三批样品的含量分别为为标示量的99.1%、99.1%、100.9%。
3 讨论
分别考察含1%醋酸0.025mol.L-1醋酸铵溶液-乙腈（75∶25），甲醇-水（35：65），乙腈-甲醇-四氢呋喃-磷酸二氢铵水溶液-10%四丁基氢氧化铵（20∶255∶25∶700∶12.8），乙腈-甲醇-四氢呋喃-磷酸二氢铵水溶液-10%四丁基氢氧化铵（20∶200∶125∶600∶12.8），乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（含三乙胺0.5%，磷酸调pH至3.0）（40：60），乙腈-0.08%磷酸溶液（20：80），0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈-冰醋酸（70：30：1），水-乙腈-三乙胺（80∶20：0.01）不同比例的流动相，结果以乙腈-甲醇-四氢呋喃-磷酸二氢铵水溶液-10%四丁基氢氧化铵（20∶255∶25∶700∶12.8）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-四氢呋喃-磷酸二氢铵水溶液-10%四丁基氢氧化铵（20∶255∶25∶700∶12.8）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量測定。注射用头孢美唑钠中头孢美唑钠的含量为标示量的105%-95%。
参考文献
[1]彭凤英，卓超，黄文祥，李崇智.头孢美唑钠治疗呼吸系统急性细菌性感染疗效观察[J].重庆医科大学学报，2007（02）.
[2]彭凤英，卓超，黄文祥，李崇智，江南，吴佳玉，熊瑛，王宋平，王荣丽，范贤明，湛晓勤，李多.头孢美唑钠注射剂治疗呼吸系统感染的随机、双盲、多中心临床试验[J].中国抗生素杂志，2006（06）.
[3]王莹莹，龚莉，王成港，王春龙，陈常青.头孢美唑钠的体外降解稳定性[J].中国新药杂志，2012（12）.
[4]蔡尾玉，黄凯文.高效液相色谱法测定注射用头孢美唑钠中头孢美唑含量[J].中国民族民间医药，2012（04）.
[5]边原，何林，夏祺悦.反相高效液相色谱法测定注射用头孢美唑钠的含量[J].中国药业，2010（05）.