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[摘要] 目的 分析子宫颈癌中Annexin a7和Galectin-3的表达及其重要意义。方法 分别对Annexin a7和Galectin-3在正常子宫颈组织、子宫颈上皮内瘤变以及子宫颈癌组织中的表达进行检测，通过检测结果对Annexin a7和Galectin-3表达与相应病例参数之间的关系进行探讨。结果 正常子宫颈组织和子宫颈上皮内瘤变中Annexin a7蛋白、Galectin-3蛋白的表达明显低于子宫颈癌组织，差异显著，具有统计学意义（P<0.01）；子宫颈腺癌中Annexin a7蛋白、Galectin-3蛋白的表达也明显高于子宫颈鳞癌，同样具有统计学意义（P<0.05）；淋巴结转移、肿瘤的实际大小以及深肌层浸润与Annexin a7的关系十分密切，而淋巴结转移、分化程度以及深肌层浸润与Galectin-3的表达有密切关系。结论 在子宫颈癌的发展、浸润等过程中Annexin a7和Galectin-3具有一定的参与度，在淋巴结转移过程中二者存在协同作用的可能性。
[关键词] 淋巴结转移；子宫颈癌；Annexin a7；Galectin-3
文章编号：1004-7484（2014）-03-1308-02
临床实践证明，子宫颈癌患者死于转移的比例较高，而淋巴结转移是其主要转移途径之一。有鉴于此，要想提高子宫颈癌的诊治效果，需对淋巴结转移的机制进行必要的研究。有研究认为[1]，在Annexin a7转运至核周线粒体的过程中，Galectin-3起到了媒介或传递的作用，在肿瘤细胞凋亡过程中Annexin a7在发挥抑制作用的同时还对线粒体的完整性进行了调节。本次研究使用免疫组化PV9000两步法对Annexin a7和Galectin-3在正常子宫颈组织、子宫颈上皮内瘤变和子宫颈癌中的表达进行了检测，以进一步探讨其与子宫颈癌淋巴结转移的关系及相应的作用机制。
1 资料与方法
1.1 研究对象 收集我院于2010年6月——2013年8月间存档的子宫颈癌标本共164例，这些患者年龄为27-70岁，平均年龄（45.8±6.2）岁。上述患者以鳞癌为主，共130例，腺癌34例。本次研究中选取的病例在术前没有行放化疗。子宫颈鳞癌患者中有75例出现了不同程度的淋巴结转移，从癌细胞分化程度上来看，低分化15例，中分化62例，高分化53例。有51例为子宫颈上皮内瘤变，其中CIN1、CIN2、CIN3各17例。选取30例正常子宫颈标本作为对照。
1.2 检测方法 本次研究所选取的标本均经经验丰富的病理医师观察确诊。检测方法为免疫组化PV9000两步法PV9000试剂盒及DAB显色剂（上海研域生物科技有限公司生产），鼠抗人Annexin a7单克隆抗体（Santa Crua公司生产），鼠抗人Galectin-3单克隆抗体（Dako公司生产）。按试剂盒上的说明书进行操作，DAB与苏木精分别用于显色和复染。以胞质为棕黄色着色判定Annexin a7为阳性细胞，使用甲状腺乳头状癌切片用于Galectin-3阳性对照，以PBS作为阴性对照。
1.3 判断方法 以胞质为棕黄色着色，Annexin a7和Galectin-3呈棕黄色颗粒，对显色进行评分。评分标准为：0分：细胞质未着色；1分：阳性细胞的着色细胞百分率为25%或低于25%；2分：着色细胞百分率为26%-50%；3分：着色细胞百分率为51%-75%；4分：着色细胞百分率高于75%。细胞质染色强度的计分标准为：1分：淡黄色；2分：棕黄色；3分：棕褐色（确定染色强度和深浅时应与背景着色进行对比）。对10个高倍视野进行观察之后，取各项得分的平均值，以两项之和为总评分。总得分<2分时为阴性，总得分为2-7分时为阳性。
1.4 统计学处理 本次研究中涉及到的数据均采用SPSS17.0软件进行分析和处理，采用Spearman等级相关分析法进行分析，以r值对相关性进行衡量。
2 结 果
2.1 Annexin a7和Galectin-3表达在不同子宫颈组织中的比较 通过对30例正常子宫颈组织和51例子宫颈上皮内瘤变以及164例子宫颈腺癌中Annexin a7和Galectin-3表达进行分析，正常子宫颈组织和子宫颈上皮内瘤变中Annexin a7蛋白、Galectin-3蛋白的表达明显低于子宫颈癌组织，差异显著，具有统计学意义（P<0.01）；子宫颈腺癌中Annexin a7蛋白、Galectin-3蛋白的表达也明显高于子宫颈鳞癌，同样具有统计学意义（P<0.05），见表1。
2.2 Annexin a7和Galectin-3与子宫颈癌临床病理指标的关系 淋巴结转移、肿瘤的实际大小以及深肌层浸润与Annexin a7的关系十分密切，而淋巴结转移、分化程度以及深肌层浸润与Galectin-3的表达有密切关系。二者均与患者的年龄及分化程度无明显关系（P>0.05）。
3 讨 论
现阶段，在恶性肿瘤中Annexin a7表达上调的机制尚不明确。李欣等[2]經过研究认为，在子宫颈鳞癌组织中Annexin a7的表达比在正常子宫颈组织中高，其可起到抑制子宫颈癌细胞凋亡的作用。本次研究发现，在子宫颈癌组织中Annexin a7的表达明显比正常子宫颈组织和子宫颈上皮内瘤变要高，这意味着子宫颈癌的发生与Annexin a7存在着一定的关系。
有研究认为，基质金属蛋白酶可以分解Galectin-3，而Galectin-3分解之后在肿瘤的发展过程中发挥着较为重要的作用[3]。樊祥山等[4]证实乳腺浸润性导管癌中Galectin-3的高表达与淋巴结分期和转移存在一定的关系。本次研究认为Galectin-3的阳性率随着子宫颈癌组织分化程度的加深依次降低，这种结论与杨承纲等[5]的研究结果是相符的。本次研究表明，在子宫颈癌的发展、浸润等过程中Annexin a7和Galectin-3具有一定的参与度，在淋巴结转移过程中二者存在协同作用的可能性，在对子宫颈癌的鉴别和诊断过程中具有一定的应用价值。
参考文献
[1] Yu F，Finley R J，Raz A，et al.Galectin-3 translocates to the perinuclear menbranes and inhibitscytochrome c release from the mitochondria.A role for synexin in galectin-3 traslocation[J].J Biol Chem，2002，277（18）：15819-27.
[2] 李欣，陈雪，王小杰，等.膜联蛋白A7低表达对子宫颈癌Hela细胞系增值与凋亡的影响[J].解剖学报，2010，41（4）：572-573.
[3] Shekhar M P，Nangia-Makker P，Tait L，et al.Alterations in galectin-3 expression and distribution correlate with breast cancer progression：functional analysis of galectin-3 in breast epithelial-endothelial interactions[J].Am J Pathol，2004，165（6）：1931-1941.
[4] 樊祥山，余慧萍，孟凡青.乳腺浸润性导管癌肿Ezrin、GaLectin-3的表达及临床病理意义[J].临床与实验病理学杂志，2008，24（1）：31-36.
[5] 杨承纲.半乳凝素-3在宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞状细胞癌中的表达及其意义[J].实用妇产科杂志，2012，28（2）：105-107.
[关键词] 淋巴结转移；子宫颈癌；Annexin a7；Galectin-3
文章编号：1004-7484（2014）-03-1308-02
临床实践证明，子宫颈癌患者死于转移的比例较高，而淋巴结转移是其主要转移途径之一。有鉴于此，要想提高子宫颈癌的诊治效果，需对淋巴结转移的机制进行必要的研究。有研究认为[1]，在Annexin a7转运至核周线粒体的过程中，Galectin-3起到了媒介或传递的作用，在肿瘤细胞凋亡过程中Annexin a7在发挥抑制作用的同时还对线粒体的完整性进行了调节。本次研究使用免疫组化PV9000两步法对Annexin a7和Galectin-3在正常子宫颈组织、子宫颈上皮内瘤变和子宫颈癌中的表达进行了检测，以进一步探讨其与子宫颈癌淋巴结转移的关系及相应的作用机制。
1 资料与方法
1.1 研究对象 收集我院于2010年6月——2013年8月间存档的子宫颈癌标本共164例，这些患者年龄为27-70岁，平均年龄（45.8±6.2）岁。上述患者以鳞癌为主，共130例，腺癌34例。本次研究中选取的病例在术前没有行放化疗。子宫颈鳞癌患者中有75例出现了不同程度的淋巴结转移，从癌细胞分化程度上来看，低分化15例，中分化62例，高分化53例。有51例为子宫颈上皮内瘤变，其中CIN1、CIN2、CIN3各17例。选取30例正常子宫颈标本作为对照。
1.2 检测方法 本次研究所选取的标本均经经验丰富的病理医师观察确诊。检测方法为免疫组化PV9000两步法PV9000试剂盒及DAB显色剂（上海研域生物科技有限公司生产），鼠抗人Annexin a7单克隆抗体（Santa Crua公司生产），鼠抗人Galectin-3单克隆抗体（Dako公司生产）。按试剂盒上的说明书进行操作，DAB与苏木精分别用于显色和复染。以胞质为棕黄色着色判定Annexin a7为阳性细胞，使用甲状腺乳头状癌切片用于Galectin-3阳性对照，以PBS作为阴性对照。
1.3 判断方法 以胞质为棕黄色着色，Annexin a7和Galectin-3呈棕黄色颗粒，对显色进行评分。评分标准为：0分：细胞质未着色；1分：阳性细胞的着色细胞百分率为25%或低于25%；2分：着色细胞百分率为26%-50%；3分：着色细胞百分率为51%-75%；4分：着色细胞百分率高于75%。细胞质染色强度的计分标准为：1分：淡黄色；2分：棕黄色；3分：棕褐色（确定染色强度和深浅时应与背景着色进行对比）。对10个高倍视野进行观察之后，取各项得分的平均值，以两项之和为总评分。总得分<2分时为阴性，总得分为2-7分时为阳性。
1.4 统计学处理 本次研究中涉及到的数据均采用SPSS17.0软件进行分析和处理，采用Spearman等级相关分析法进行分析，以r值对相关性进行衡量。
2 结 果
2.1 Annexin a7和Galectin-3表达在不同子宫颈组织中的比较 通过对30例正常子宫颈组织和51例子宫颈上皮内瘤变以及164例子宫颈腺癌中Annexin a7和Galectin-3表达进行分析，正常子宫颈组织和子宫颈上皮内瘤变中Annexin a7蛋白、Galectin-3蛋白的表达明显低于子宫颈癌组织，差异显著，具有统计学意义（P<0.01）；子宫颈腺癌中Annexin a7蛋白、Galectin-3蛋白的表达也明显高于子宫颈鳞癌，同样具有统计学意义（P<0.05），见表1。
2.2 Annexin a7和Galectin-3与子宫颈癌临床病理指标的关系 淋巴结转移、肿瘤的实际大小以及深肌层浸润与Annexin a7的关系十分密切，而淋巴结转移、分化程度以及深肌层浸润与Galectin-3的表达有密切关系。二者均与患者的年龄及分化程度无明显关系（P>0.05）。
3 讨 论
现阶段，在恶性肿瘤中Annexin a7表达上调的机制尚不明确。李欣等[2]經过研究认为，在子宫颈鳞癌组织中Annexin a7的表达比在正常子宫颈组织中高，其可起到抑制子宫颈癌细胞凋亡的作用。本次研究发现，在子宫颈癌组织中Annexin a7的表达明显比正常子宫颈组织和子宫颈上皮内瘤变要高，这意味着子宫颈癌的发生与Annexin a7存在着一定的关系。
有研究认为，基质金属蛋白酶可以分解Galectin-3，而Galectin-3分解之后在肿瘤的发展过程中发挥着较为重要的作用[3]。樊祥山等[4]证实乳腺浸润性导管癌中Galectin-3的高表达与淋巴结分期和转移存在一定的关系。本次研究认为Galectin-3的阳性率随着子宫颈癌组织分化程度的加深依次降低，这种结论与杨承纲等[5]的研究结果是相符的。本次研究表明，在子宫颈癌的发展、浸润等过程中Annexin a7和Galectin-3具有一定的参与度，在淋巴结转移过程中二者存在协同作用的可能性，在对子宫颈癌的鉴别和诊断过程中具有一定的应用价值。
参考文献
[1] Yu F，Finley R J，Raz A，et al.Galectin-3 translocates to the perinuclear menbranes and inhibitscytochrome c release from the mitochondria.A role for synexin in galectin-3 traslocation[J].J Biol Chem，2002，277（18）：15819-27.
[2] 李欣，陈雪，王小杰，等.膜联蛋白A7低表达对子宫颈癌Hela细胞系增值与凋亡的影响[J].解剖学报，2010，41（4）：572-573.
[3] Shekhar M P，Nangia-Makker P，Tait L，et al.Alterations in galectin-3 expression and distribution correlate with breast cancer progression：functional analysis of galectin-3 in breast epithelial-endothelial interactions[J].Am J Pathol，2004，165（6）：1931-1941.
[4] 樊祥山，余慧萍，孟凡青.乳腺浸润性导管癌肿Ezrin、GaLectin-3的表达及临床病理意义[J].临床与实验病理学杂志，2008，24（1）：31-36.
[5] 杨承纲.半乳凝素-3在宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞状细胞癌中的表达及其意义[J].实用妇产科杂志，2012，28（2）：105-107.