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[摘 要]目的 制备护肝口服液，并建立该制剂的质控方法。方法 用薄层色谱法对该处方中的丹参、白芍进行鉴别，以双波长薄层扫描仪测定丹参中原儿茶醛含量，作为质控标准。结果 原儿茶醛在0.32～1.27 mg/ml浓度范围内，浓度与峰面积呈线性关系，r=0.999 0，RSD=1.37%；加样回收率为97.90%，n=5。结论 该制剂制备工艺简单，质量控制方法可靠。
[关键词]护肝口服液 制备 质量控制
中图分类号：R181.3 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）34-0398-01
护肝液是我院临床多年应用的医院制剂，它具有益气补血、健脾养肝、升高白细胞之功效。临床主要用于用于慢性肝损害的辅助治疗。
1 制备
1.1 仪器与试剂 CS.930型双波长薄层扫描仪（日本岛津），定量毛细血管（美国Dranmond公司），硅胶薄层板（烟台化工研究所）。
原儿茶醛对照品（由中国药品生物制品检定所提供），所用试剂均为分析纯，护肝口服液（本院自制）。
1.2 处方及制法
1.2.1 处方 鸡血藤1.5 kg，女贞子1 kg，山茱萸0.25 kg，黄精0.75 kg，丹参3 kg，熟地黄0.5 kg，当归0.25 kg，党参0.5 kg，白芍0.5 kg，川芎0.25 kg制成1 000 ml护肝口服液。
1.2.2 制法 以上中药饮片，川芎、当归饮片分别用水蒸馏法提取样挥发油成份，所得芳香液另置贮。药渣与其余几味（阿胶除外）中药饮片浸泡2 h后加热煎煮3次，第1次2 h，第2、3次分别1 h，过滤，合并3次滤液浓缩至8 000 ml，加入阿胶烊化，冷藏24 h后，过滤，于滤液中加入川芎、当归的芳香水液，搅拌均匀后静置12 h，过滤，滤液用蒸馏水调整总量至10 000 ml，搅匀，调pH值至3.8～5.50；灌封，于100℃，30 min流通蒸汽水灭菌。即得。
1.2.3 阴性对照品的制备 将处方中去除丹参白芍饮片后制成阴性对照品，制法同1.2.2。
2 质控标准
2.1 性状 本品为棕红色液体，气微香，味微甜。
2.2 检查 本品的pH值应为3.8～5.50，相对密度1.06～1.12，卫生学检查应符合规定。
2.3 鉴定
2.3.1 丹参的鉴别 吸取本品10 ml，入分液漏斗中用稀盐酸调pH至2，用乙酸乙酯萃取3次，10 ml/次，弃去水层，乙酸乙酯层入100 ml蒸发皿中，于水浴上挥干，残渣加甲醇溶解，并定容至5 ml，作为供试品溶液。另取丹参饮片5 g加水100 ml煎煮30 min，加水补足减少水分，滤过，滤液用稀盐酸调pH值至2，并用乙酸乙酯萃取3次，10 m/次l，乙酸乙酯液在水浴上蒸干。残渣以甲醇溶解，并定容至5 ml，作为对照药材溶液。再取原儿茶醛对照品，以甲醇配制成每1 ml含1 mg的溶液为对照溶夜。照薄层色谱法吸取上述3种溶液6、5、5 μl和阴性对照液5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯.乙酸乙酯.甲酸为展开剂，展开，取出、晾开。自然显色，供试品溶液与原儿茶醛、丹参对照材料在色谱图相应位置，显示相同棕灰色的斑点；喷浓硫酸显色剂显色，供试品溶液与原儿茶醛，丹参对照药材在色谱图相应位置上，显示相同红颜色的斑点，阴性对照品在色谱图相应位置未显示相同斑点。
2.3.2 白芍的鉴别 吸取本品10 ml，入分漏斗中用稀盐酸调pH至2，用水饱和的乙醚萃取3次，10 ml/次，弃去水层，乙醚层入100 ml蒸发皿中，于水浴上挥干乙醚，残查加甲醇溶解，并定容至5 ml，作为供试品溶液。另取白芍饮片5 g，入250 ml圆底烧瓶中，加入80 ml甲醇，水浴加热1 h滤过，滤液中100 ml蒸发皿中，水溶上蒸至小体积，并定容至100 ml，作为对照溶液。照薄层色谱法吸取上述2种溶液5、5 μl和阴性对照液5 μl，分别点于同一硅胶G.CMCNa薄层板上，以氯仿.甲醇.乙酸乙酯为开剂，展开，取出、晾干。喷浓硫酸香兰素显色剂显色，供试品色谱中，在与对照品药材色谱相应位置上显示相同的红色斑点，阴性对照品在相应位置未显示相同斑点。
2.4 含量测定
2.4.1 对照品溶液的制备 精密称取原儿茶醛2.200 mg，置2 ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀即得（每1 ml溶液含原儿茶醛1.100 mg）。
2.4.2 测定方法 精密量取本品10 ml，置分液漏斗中，用稀盐酸调pH至2～3，用乙酸乙酯振摇提取3次，10 ml/次，弃去水层，乙酸乙酯层放入100 ml蒸发皿中，水浴上挥散至尽，然后以少量甲醇溶解至5 ml量瓶中。室温后加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
按照薄层色谱法，吸取供试品溶液3 μl，对照品溶液2、5 μl，分别点于同一硅胶G.CMCNa薄层板上，以苯.乙酸乙酯.甲醇（80：20：4）为展开剂，展开，取出，充分晾干。于扫描波长λs=290 mm，λR=370 mm测定供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算即得。
本品每10 ml含原儿茶醛（C7H6O3）不得少于0.320 mg。
2.4.3 3批样品测试结果，按2.4.2测3批样品；标准品的浓度为1.100 mg/ml。
2.4.4 线性关系考察 精密吸取原儿茶醛对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 μl，照薄层色谱法试验，分别点于同一薄层板上，按上述方法与条件扫描测定，其积分值分处为315.275、650.513、1085.735、1515.13、1871.085。经回归处理得Y=397.6X.105.33 r=0.999 0，证明原儿茶醛在0.32～1.27 mg/ml范围内，浓度与峰面积是良好的线性关系。
2.4.5 加样回收实验，精密吸取已知含量的样品溶液5份，各5 ml，分别加入原茶醛（取原儿茶醛4.00 mg，用甲醇定容至5 ml），对照品0.480 3、0.631 2 mg、各2份；0.301 3 mg各1份加入样品溶液中，按上述方法提取实验，计算加样回收率。
3 稳定性考察
根據《新药审批办法》中有关中药部分的修定和补充规定，按照《中国药典》方法对3批升白肝口服液进行初步稳定实验，以不同批号的样品于室温条件下，10 ml棕色玻璃瓶连续观察3个月，按质检标准进行考察，显示稳定性无变化。
4 讨论
采用薄色色谱法对本品中丹参、白芍进行定性鉴别，方法简便，重现性好。
根据本品有效化学成份，选择薄色色谱法将丹参中的原儿茶醛作为该制剂的质量控制指标是合适的。实验证明，薄层色谱法准确、灵敏、简便、效果满意。
参考文献
[1] 王北婴.中药新药研究与申报.北京中国中医药出版社，1995：189.
[2] 中医药典一部附录IIIB，2000年版，化学工业出版社，2000：37.
[3] 朱诸芝，任家钟.治肝灵口服液的制备、质量控制及临床应用.中国药房，2001，12（2）：89.
[关键词]护肝口服液 制备 质量控制
中图分类号：R181.3 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）34-0398-01
护肝液是我院临床多年应用的医院制剂，它具有益气补血、健脾养肝、升高白细胞之功效。临床主要用于用于慢性肝损害的辅助治疗。
1 制备
1.1 仪器与试剂 CS.930型双波长薄层扫描仪（日本岛津），定量毛细血管（美国Dranmond公司），硅胶薄层板（烟台化工研究所）。
原儿茶醛对照品（由中国药品生物制品检定所提供），所用试剂均为分析纯，护肝口服液（本院自制）。
1.2 处方及制法
1.2.1 处方 鸡血藤1.5 kg，女贞子1 kg，山茱萸0.25 kg，黄精0.75 kg，丹参3 kg，熟地黄0.5 kg，当归0.25 kg，党参0.5 kg，白芍0.5 kg，川芎0.25 kg制成1 000 ml护肝口服液。
1.2.2 制法 以上中药饮片，川芎、当归饮片分别用水蒸馏法提取样挥发油成份，所得芳香液另置贮。药渣与其余几味（阿胶除外）中药饮片浸泡2 h后加热煎煮3次，第1次2 h，第2、3次分别1 h，过滤，合并3次滤液浓缩至8 000 ml，加入阿胶烊化，冷藏24 h后，过滤，于滤液中加入川芎、当归的芳香水液，搅拌均匀后静置12 h，过滤，滤液用蒸馏水调整总量至10 000 ml，搅匀，调pH值至3.8～5.50；灌封，于100℃，30 min流通蒸汽水灭菌。即得。
1.2.3 阴性对照品的制备 将处方中去除丹参白芍饮片后制成阴性对照品，制法同1.2.2。
2 质控标准
2.1 性状 本品为棕红色液体，气微香，味微甜。
2.2 检查 本品的pH值应为3.8～5.50，相对密度1.06～1.12，卫生学检查应符合规定。
2.3 鉴定
2.3.1 丹参的鉴别 吸取本品10 ml，入分液漏斗中用稀盐酸调pH至2，用乙酸乙酯萃取3次，10 ml/次，弃去水层，乙酸乙酯层入100 ml蒸发皿中，于水浴上挥干，残渣加甲醇溶解，并定容至5 ml，作为供试品溶液。另取丹参饮片5 g加水100 ml煎煮30 min，加水补足减少水分，滤过，滤液用稀盐酸调pH值至2，并用乙酸乙酯萃取3次，10 m/次l，乙酸乙酯液在水浴上蒸干。残渣以甲醇溶解，并定容至5 ml，作为对照药材溶液。再取原儿茶醛对照品，以甲醇配制成每1 ml含1 mg的溶液为对照溶夜。照薄层色谱法吸取上述3种溶液6、5、5 μl和阴性对照液5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯.乙酸乙酯.甲酸为展开剂，展开，取出、晾开。自然显色，供试品溶液与原儿茶醛、丹参对照材料在色谱图相应位置，显示相同棕灰色的斑点；喷浓硫酸显色剂显色，供试品溶液与原儿茶醛，丹参对照药材在色谱图相应位置上，显示相同红颜色的斑点，阴性对照品在色谱图相应位置未显示相同斑点。
2.3.2 白芍的鉴别 吸取本品10 ml，入分漏斗中用稀盐酸调pH至2，用水饱和的乙醚萃取3次，10 ml/次，弃去水层，乙醚层入100 ml蒸发皿中，于水浴上挥干乙醚，残查加甲醇溶解，并定容至5 ml，作为供试品溶液。另取白芍饮片5 g，入250 ml圆底烧瓶中，加入80 ml甲醇，水浴加热1 h滤过，滤液中100 ml蒸发皿中，水溶上蒸至小体积，并定容至100 ml，作为对照溶液。照薄层色谱法吸取上述2种溶液5、5 μl和阴性对照液5 μl，分别点于同一硅胶G.CMCNa薄层板上，以氯仿.甲醇.乙酸乙酯为开剂，展开，取出、晾干。喷浓硫酸香兰素显色剂显色，供试品色谱中，在与对照品药材色谱相应位置上显示相同的红色斑点，阴性对照品在相应位置未显示相同斑点。
2.4 含量测定
2.4.1 对照品溶液的制备 精密称取原儿茶醛2.200 mg，置2 ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀即得（每1 ml溶液含原儿茶醛1.100 mg）。
2.4.2 测定方法 精密量取本品10 ml，置分液漏斗中，用稀盐酸调pH至2～3，用乙酸乙酯振摇提取3次，10 ml/次，弃去水层，乙酸乙酯层放入100 ml蒸发皿中，水浴上挥散至尽，然后以少量甲醇溶解至5 ml量瓶中。室温后加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
按照薄层色谱法，吸取供试品溶液3 μl，对照品溶液2、5 μl，分别点于同一硅胶G.CMCNa薄层板上，以苯.乙酸乙酯.甲醇（80：20：4）为展开剂，展开，取出，充分晾干。于扫描波长λs=290 mm，λR=370 mm测定供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算即得。
本品每10 ml含原儿茶醛（C7H6O3）不得少于0.320 mg。
2.4.3 3批样品测试结果，按2.4.2测3批样品；标准品的浓度为1.100 mg/ml。
2.4.4 线性关系考察 精密吸取原儿茶醛对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 μl，照薄层色谱法试验，分别点于同一薄层板上，按上述方法与条件扫描测定，其积分值分处为315.275、650.513、1085.735、1515.13、1871.085。经回归处理得Y=397.6X.105.33 r=0.999 0，证明原儿茶醛在0.32～1.27 mg/ml范围内，浓度与峰面积是良好的线性关系。
2.4.5 加样回收实验，精密吸取已知含量的样品溶液5份，各5 ml，分别加入原茶醛（取原儿茶醛4.00 mg，用甲醇定容至5 ml），对照品0.480 3、0.631 2 mg、各2份；0.301 3 mg各1份加入样品溶液中，按上述方法提取实验，计算加样回收率。
3 稳定性考察
根據《新药审批办法》中有关中药部分的修定和补充规定，按照《中国药典》方法对3批升白肝口服液进行初步稳定实验，以不同批号的样品于室温条件下，10 ml棕色玻璃瓶连续观察3个月，按质检标准进行考察，显示稳定性无变化。
4 讨论
采用薄色色谱法对本品中丹参、白芍进行定性鉴别，方法简便，重现性好。
根据本品有效化学成份，选择薄色色谱法将丹参中的原儿茶醛作为该制剂的质量控制指标是合适的。实验证明，薄层色谱法准确、灵敏、简便、效果满意。
参考文献
[1] 王北婴.中药新药研究与申报.北京中国中医药出版社，1995：189.
[2] 中医药典一部附录IIIB，2000年版，化学工业出版社，2000：37.
[3] 朱诸芝，任家钟.治肝灵口服液的制备、质量控制及临床应用.中国药房，2001，12（2）：89.