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【摘要】目的：探讨哮喘患儿诱导痰ECP、嗜酸细胞趋化因子的改变及意义。方法：选取2009年6月～2012年3月我院收治的哮喘门诊及病房住院30例患者作为实验组，同期27例健康儿童作为对照组，用酶联免疫法（ELISA）测定诱导痰上清液中ECP、嗜酸细胞趋化因子浓度。结果：实验组患者的嗜酸细胞/白细胞%、ECP、嗜酸细胞趋化因子水平明显高于对照组患者（P<0.05）；实验组患者诱导痰嗜酸细胞趋化因子浓度、ECP浓度与嗜酸细胞/白细胞%呈现正相关，嗜酸细胞趋化因子浓度与ECP浓度呈正相关。结论：嗜酸细胞趋化因子可能通过对嗜酸细胞的选择性趋化作用，使其释放出ECP等一系列炎性介质参与嗜酸细胞性气道炎症及气流阻塞的发生。
【关键词】哮喘；诱导痰；嗜酸性细胞阳离子蛋白；嗜酸细胞趋化因子
支气管哮喘（简称哮喘）是指由嗜酸性粒细胞、T淋巴细胞和肥大细胞等多种炎性细胞参与的一种气道慢性炎症。嗜酸细胞趋化因子为一种嗜酸细胞选择性化学趋化剂，而嗜酸性细胞阳离子蛋白（ECP，eosinophil cationic protein）为由嗜酸性粒细胞合成与释放的炎性介质及细胞因子，其于哮喘发病中起着重要的作用。本文笔者选取2010年6月～2012年3月我院收治的哮喘门诊及病房住院30例患者作为实验组，同期27例健康儿童作为对照组，探讨哮喘患儿诱导痰ECP、嗜酸细胞趋化因子的改变及意义，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料
选取2010年6月～2012年3月我院收治的哮喘门诊及病房住院30例患者作为实验组，其中男性13例，女性17例，年龄5～13岁，平均年龄（8.1±3.2）岁。选取同期27例健康儿童作为对照组，男性15例，女性12例，年龄5～12岁，平均年龄（7.7±3.1）岁。两组儿童在年龄、性别等方面比较，差异均无统计学意义（P >0.05），具有可比性。
1.2 方法
标本收集和处理：痰诱导及处理方法根据杨海等[1]报道的方法进行。
痰液质控：使用新鲜配制的台酚染色液及苏木精-伊红染色液分别进行染色，计数细胞活性、细胞总数与鳞状上皮细胞百分比，细胞活性>50%、鳞状细胞<20%则为合格痰液。
ECP 测定：采用酶联吸附试验（ELISA）检测，试剂盒购自美国 R&Systems 公司，具体步骤严格地根据试剂盒说明进行操作。嗜酸细胞趋化因子测定：采用ELISA检测，试剂盒购自深圳Jingmei Boitech公司试剂盒，具体操作步骤严格地根据试剂盒说明书进行，最后于酶标仪上双波长读数（主波长为450nm，校对波长为540nm）。
1.3 统计学分析
运用SPSS 17.0统计软件进行统计处理，数据采用均数±标准差（±s）表示，以P<0.05为差异存在统计学意义。
2 结果
2.1 分类细胞计数和ECP、嗜酸细胞趋化因子浓度比较
3 讨论
哮喘本质为慢性气道炎症。有研究证明诱导痰作为非创伤性标本，其用于哮喘的气道炎症情况评价是十分有效的[2]。诱导痰的可行性和安全性使其广泛用于临床研究和实践。
哮喘发病时，活化嗜酸性粒细胞脱颗粒后，能够释放出多种生物活性蛋白，其中以ECP最重要，其被认为系嗜酸性粒细胞活化反映的特异性标志。ECP有着很强的细胞毒性，其通过诱导肥大细胞释放出组胺介导支气管上皮细胞与角质细胞脱落、损伤，进而改变黏膜通透性，并暴露出感觉神经纤维，最后引起气道高反应性。嗜酸细胞趋化因子为C2C趋化因子亚家族中的一员，其是一种强有力的嗜酸细胞选择性化学趋化剂。有研究发现嗜酸细胞趋化因子 mRNA与蛋白在变应性哮喘病人气道壁及气道腔中的表达增加，且至少部分参与对嗜酸细胞的趋化活性。
本研究结果显示，嗜酸细胞趋化因子可能通过对嗜酸细胞的选择性趋化作用，使其释放出ECP等一系列炎性介质参与嗜酸细胞性气道炎症及气流阻塞的发生。
参考文献：
[1] 杨海， 周晓云， 杨小兰， 等. 哮喘儿童诱导痰嗜酸粒细胞阳离子蛋白的测定与临床应用[J]. 海南医学，2012，23（23）：100-101.
[2] Sorva R，Metso T，Turpeinen M，et al. Eosinophil cationic protein in induced sputum as a marker of inflammation in asthmatic children[J]. Pediatr allergy Immunol，1997，8：45-50.
【关键词】哮喘；诱导痰；嗜酸性细胞阳离子蛋白；嗜酸细胞趋化因子
支气管哮喘（简称哮喘）是指由嗜酸性粒细胞、T淋巴细胞和肥大细胞等多种炎性细胞参与的一种气道慢性炎症。嗜酸细胞趋化因子为一种嗜酸细胞选择性化学趋化剂，而嗜酸性细胞阳离子蛋白（ECP，eosinophil cationic protein）为由嗜酸性粒细胞合成与释放的炎性介质及细胞因子，其于哮喘发病中起着重要的作用。本文笔者选取2010年6月～2012年3月我院收治的哮喘门诊及病房住院30例患者作为实验组，同期27例健康儿童作为对照组，探讨哮喘患儿诱导痰ECP、嗜酸细胞趋化因子的改变及意义，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料
选取2010年6月～2012年3月我院收治的哮喘门诊及病房住院30例患者作为实验组，其中男性13例，女性17例，年龄5～13岁，平均年龄（8.1±3.2）岁。选取同期27例健康儿童作为对照组，男性15例，女性12例，年龄5～12岁，平均年龄（7.7±3.1）岁。两组儿童在年龄、性别等方面比较，差异均无统计学意义（P >0.05），具有可比性。
1.2 方法
标本收集和处理：痰诱导及处理方法根据杨海等[1]报道的方法进行。
痰液质控：使用新鲜配制的台酚染色液及苏木精-伊红染色液分别进行染色，计数细胞活性、细胞总数与鳞状上皮细胞百分比，细胞活性>50%、鳞状细胞<20%则为合格痰液。
ECP 测定：采用酶联吸附试验（ELISA）检测，试剂盒购自美国 R&Systems 公司，具体步骤严格地根据试剂盒说明进行操作。嗜酸细胞趋化因子测定：采用ELISA检测，试剂盒购自深圳Jingmei Boitech公司试剂盒，具体操作步骤严格地根据试剂盒说明书进行，最后于酶标仪上双波长读数（主波长为450nm，校对波长为540nm）。
1.3 统计学分析
运用SPSS 17.0统计软件进行统计处理，数据采用均数±标准差（±s）表示，以P<0.05为差异存在统计学意义。
2 结果
2.1 分类细胞计数和ECP、嗜酸细胞趋化因子浓度比较
3 讨论
哮喘本质为慢性气道炎症。有研究证明诱导痰作为非创伤性标本，其用于哮喘的气道炎症情况评价是十分有效的[2]。诱导痰的可行性和安全性使其广泛用于临床研究和实践。
哮喘发病时，活化嗜酸性粒细胞脱颗粒后，能够释放出多种生物活性蛋白，其中以ECP最重要，其被认为系嗜酸性粒细胞活化反映的特异性标志。ECP有着很强的细胞毒性，其通过诱导肥大细胞释放出组胺介导支气管上皮细胞与角质细胞脱落、损伤，进而改变黏膜通透性，并暴露出感觉神经纤维，最后引起气道高反应性。嗜酸细胞趋化因子为C2C趋化因子亚家族中的一员，其是一种强有力的嗜酸细胞选择性化学趋化剂。有研究发现嗜酸细胞趋化因子 mRNA与蛋白在变应性哮喘病人气道壁及气道腔中的表达增加，且至少部分参与对嗜酸细胞的趋化活性。
本研究结果显示，嗜酸细胞趋化因子可能通过对嗜酸细胞的选择性趋化作用，使其释放出ECP等一系列炎性介质参与嗜酸细胞性气道炎症及气流阻塞的发生。
参考文献：
[1] 杨海， 周晓云， 杨小兰， 等. 哮喘儿童诱导痰嗜酸粒细胞阳离子蛋白的测定与临床应用[J]. 海南医学，2012，23（23）：100-101.
[2] Sorva R，Metso T，Turpeinen M，et al. Eosinophil cationic protein in induced sputum as a marker of inflammation in asthmatic children[J]. Pediatr allergy Immunol，1997，8：45-50.