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摘要:某宠物医院,就诊的一例泰迪犬,泰迪犬早上吃了狗粮,无明显症状,下午出现严重的腹泻,精神沉郁。为了确定引起泰迪犬的严重腹泻病原菌,对就诊的泰迪犬无菌采集肛拭子进行细菌的分离鉴定,并得到了一株病原菌。对分离的病原菌进行培养特性、形态学观察、生化试验、动物致病性试验的方法进行鉴定,结果显示,从严重的腹泻泰迪犬体内分离的一株病原菌被鉴定为致病性大肠杆菌,致病性大肠杆菌对小鼠具有很强的致病性。对从严重的腹泻泰迪犬体内分离致病性大肠杆菌进行药敏试验,结果显示,头孢曲松、头孢克肟,氟苯尼考、氧氟沙星4种药物敏感;对大观霉素、美洛培南、丁胺卡娜霉素、头孢他啶4种中度敏感,对氨苄西林、林可霉素、强力霉素、阿莫西林4种药物耐药。
关键词:泰迪犬:致病性大肠杆菌;药敏试验;
随着人们现在生活水平的提高,农村及城市中的家庭中的泰迪犬养殖数量越来越多,泰迪犬成为人们生活中重要伴侣动物,泰迪犬健康状态越来越受到人们的关注。致病性大肠杆菌是引起宠物犬腹泻主要的病原菌,当犬感染了大肠杆菌后出现严重的腹泻,严重着可导致败血症,出现突然死亡。
一、发病情况。某宠物医院,就诊的一例泰迪犬,泰迪犬1岁,泰迪犬早上吃了狗粮,无明显症状,下午出现严重的腹泻,精神沉郁。通过询问,泰迪犬已经做过了五连疫苗。
二、病毒性疾病的检测。宠物医院的医护人员对送诊的宠物犬前腿臂静脉采血1mL,用离心机分离血清,按照说明用胶体金试纸条,对分离的血清进行检测犬瘟热、细小病毒、冠状病毒、腺病毒抗原检测,结果显示,检测的犬瘟热、细小病毒、冠状病毒、腺病毒抗原为阴性。排除了犬瘟熱、细小病毒、冠状病毒、腺病毒的感染。
三、细菌的分离鉴定与镜检。对送诊的泰迪犬无菌采集的肛拭子,放入加入0.85%无菌的生理盐水,轻轻摇晃后接种于麦康凯培养基上,37℃培养12-18h,选取单个优势菌落接种于伊红美蓝培养基养基上,37℃培养12h。结果显示,麦康凯培养基上长出粉红色扁圆型小菌落;在伊红美兰培养基上长出边缘整齐并带金属光色的黑色或者黑色的菌落;革兰氏染色镜检可见两端钝圆阴性杆状菌,与报道大肠杆菌特性培养和形态学一致。
四、生化特性试验鉴定。将分离到的细菌按照说明加入生化试剂管内培养,进行生化特性鉴定。结果显示,分离菌株分解D-阿拉伯醇、L天冬氨酸芳胺酶、d-海藻糖、B-葡萄糖苷酶、a-麦芽糖、d-麦芽糖、BN乙酰葡萄糖胺、蔗糖、L-鼠李糖、葡萄糖、麦芽糖、并对甘露醇产酸产气,其中,分离菌株吲哚试验阳性,分离菌株V-P试验呈阴性,丙二酸盐、鸟氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、氧化酶、接触酶阳性;符合大肠杆菌生化特性。
五、分离菌株对小白鼠的致病性试验。对20g左右健康的小鼠的10只并分成2组,每组5只,1组口服大肠杆菌分离株菌液0.5mL(10CFU/mL);2组口服等量的灭菌的生理盐水。观察7d,记录每组小鼠的发病及死亡情况,对于死亡的小鼠进行病原菌鉴定。结果显示,在攻毒后的24h,1组小鼠出现了食欲减退、扎堆,发病率为100%;在试验后的攻毒后的48h,出现死亡,对死亡的小鼠进行剖检,无菌采集死亡的小鼠的肝脏、心血等病料组织进行细菌学鉴定,通过培养特性、形态学观察、生化试验方法进行鉴定,结果显示,分离到的病原菌为大肠杆菌,死亡率为100%;对照组5只小鼠未出现明显的变化,因而,证实了分离到大肠杆菌对小鼠具有很强的致病性。
六、药敏试验。按照美国临床检验标准委员会(NCCLS)推荐的标准K-B纸片法进行试验操作,参照CLSI的标准判断耐药(R)、敏感(s)或中介(I)进行结果判断。将分离的大肠杆菌在无菌的条件下,均匀涂在普通普通培养基上,贴上药敏纸片,37℃培养12-18h,取出来用直尺测量抑菌圈直径,并记录结果。由表1可知,泰迪犬源大肠杆菌对头孢曲松、头孢克肟,氟苯尼考、氧氟沙星4种药物敏感;对大观霉素、美洛培南、丁胺卡娜霉素、头孢他啶4种中度敏感,对氨苄西林、林可霉素、强力霉素、阿莫西林4种药物耐药。
总之,某宠物医院,就诊的1岁泰迪犬,犬瘟热、细小病毒、冠状病毒、腺病毒胶体金试纸条抗原检测为阴性,排除了犬瘟热、细小病毒、冠状病毒、腺病毒等病毒性疾病的感染,无菌采集泰迪犬肛拭子中并得到了一株病原菌,通过培养特性、形态学观察、生化试验、动物致病性试验的方法进行鉴定,分离的病原菌被鉴定为致病性大肠杆菌,因而,证实了引起泰迪犬为腹泻的病原菌为致病性大肠杆菌。因此,进行药敏试验分析其耐药性,结果显示,对头孢曲松、头孢克肟,氟苯尼考、氧氟沙星4种药物敏感,应该选择敏感药物对泰迪犬进行治疗。
(作者单位:河南省新乡市动物疫病预防控制中心)
关键词:泰迪犬:致病性大肠杆菌;药敏试验;
随着人们现在生活水平的提高,农村及城市中的家庭中的泰迪犬养殖数量越来越多,泰迪犬成为人们生活中重要伴侣动物,泰迪犬健康状态越来越受到人们的关注。致病性大肠杆菌是引起宠物犬腹泻主要的病原菌,当犬感染了大肠杆菌后出现严重的腹泻,严重着可导致败血症,出现突然死亡。
一、发病情况。某宠物医院,就诊的一例泰迪犬,泰迪犬1岁,泰迪犬早上吃了狗粮,无明显症状,下午出现严重的腹泻,精神沉郁。通过询问,泰迪犬已经做过了五连疫苗。
二、病毒性疾病的检测。宠物医院的医护人员对送诊的宠物犬前腿臂静脉采血1mL,用离心机分离血清,按照说明用胶体金试纸条,对分离的血清进行检测犬瘟热、细小病毒、冠状病毒、腺病毒抗原检测,结果显示,检测的犬瘟热、细小病毒、冠状病毒、腺病毒抗原为阴性。排除了犬瘟熱、细小病毒、冠状病毒、腺病毒的感染。
三、细菌的分离鉴定与镜检。对送诊的泰迪犬无菌采集的肛拭子,放入加入0.85%无菌的生理盐水,轻轻摇晃后接种于麦康凯培养基上,37℃培养12-18h,选取单个优势菌落接种于伊红美蓝培养基养基上,37℃培养12h。结果显示,麦康凯培养基上长出粉红色扁圆型小菌落;在伊红美兰培养基上长出边缘整齐并带金属光色的黑色或者黑色的菌落;革兰氏染色镜检可见两端钝圆阴性杆状菌,与报道大肠杆菌特性培养和形态学一致。
四、生化特性试验鉴定。将分离到的细菌按照说明加入生化试剂管内培养,进行生化特性鉴定。结果显示,分离菌株分解D-阿拉伯醇、L天冬氨酸芳胺酶、d-海藻糖、B-葡萄糖苷酶、a-麦芽糖、d-麦芽糖、BN乙酰葡萄糖胺、蔗糖、L-鼠李糖、葡萄糖、麦芽糖、并对甘露醇产酸产气,其中,分离菌株吲哚试验阳性,分离菌株V-P试验呈阴性,丙二酸盐、鸟氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、氧化酶、接触酶阳性;符合大肠杆菌生化特性。
五、分离菌株对小白鼠的致病性试验。对20g左右健康的小鼠的10只并分成2组,每组5只,1组口服大肠杆菌分离株菌液0.5mL(10CFU/mL);2组口服等量的灭菌的生理盐水。观察7d,记录每组小鼠的发病及死亡情况,对于死亡的小鼠进行病原菌鉴定。结果显示,在攻毒后的24h,1组小鼠出现了食欲减退、扎堆,发病率为100%;在试验后的攻毒后的48h,出现死亡,对死亡的小鼠进行剖检,无菌采集死亡的小鼠的肝脏、心血等病料组织进行细菌学鉴定,通过培养特性、形态学观察、生化试验方法进行鉴定,结果显示,分离到的病原菌为大肠杆菌,死亡率为100%;对照组5只小鼠未出现明显的变化,因而,证实了分离到大肠杆菌对小鼠具有很强的致病性。
六、药敏试验。按照美国临床检验标准委员会(NCCLS)推荐的标准K-B纸片法进行试验操作,参照CLSI的标准判断耐药(R)、敏感(s)或中介(I)进行结果判断。将分离的大肠杆菌在无菌的条件下,均匀涂在普通普通培养基上,贴上药敏纸片,37℃培养12-18h,取出来用直尺测量抑菌圈直径,并记录结果。由表1可知,泰迪犬源大肠杆菌对头孢曲松、头孢克肟,氟苯尼考、氧氟沙星4种药物敏感;对大观霉素、美洛培南、丁胺卡娜霉素、头孢他啶4种中度敏感,对氨苄西林、林可霉素、强力霉素、阿莫西林4种药物耐药。
总之,某宠物医院,就诊的1岁泰迪犬,犬瘟热、细小病毒、冠状病毒、腺病毒胶体金试纸条抗原检测为阴性,排除了犬瘟热、细小病毒、冠状病毒、腺病毒等病毒性疾病的感染,无菌采集泰迪犬肛拭子中并得到了一株病原菌,通过培养特性、形态学观察、生化试验、动物致病性试验的方法进行鉴定,分离的病原菌被鉴定为致病性大肠杆菌,因而,证实了引起泰迪犬为腹泻的病原菌为致病性大肠杆菌。因此,进行药敏试验分析其耐药性,结果显示,对头孢曲松、头孢克肟,氟苯尼考、氧氟沙星4种药物敏感,应该选择敏感药物对泰迪犬进行治疗。
(作者单位:河南省新乡市动物疫病预防控制中心)