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【摘要】 目的 探析健康人群大肠埃希菌Ⅰ类整合子和耐药性关系。方法 选取150株由健康人群中分离提取的大肠埃希菌作为研究对象，通过对研究对象的抗生素敏感性进行检测，同时使用PCR进行研究对象中的Ⅰ类整合子检测，将检测结果进行统计分析。结果 检测分析结果中，有83株对于三种以上抗生素具有较强的耐受性，大肠埃希菌的耐多药率约为55%；超广谱β-内酰胺酶阳性大肠埃希菌5株，阳性率约为3%；有42株大肠埃希菌携带有Ⅰ类整合子，并且检测结果显示整合子主要分布在不同基因型菌株中。结论 健康人群携带的大肠埃希菌中广泛存在有Ⅰ类整合子，并且和细菌的耐多药性之间有着密切的关系。并且整合子能够在细菌种内进行水平传播，是介导细菌耐药性的重要分子机制。
【关键词】 健康人群；大肠埃希菌；整合子；耐药性；关系；分析研究
文章编号：1004-7484（2014）-06-3630-02
大肠埃希菌是存在于动物以及人类肠道中的正常菌群，容易引起机会性感染，对于人体的健康造成威胁，同时，大肠埃希菌也是耐药基因的储存库，在细菌耐药性传播中有着非常重要的作用和影响。而整合子是一种具有俘获以及切除、表达耐药基因盒的可移动元件类型，Ⅰ类整合子则与肠杆菌科的耐药性之间有着密切的关联性，是医学领域的一个研究重点。下文将以从健康人群粪便标本中分离出的150株大肠埃希菌作为样本进行检测分析，以进行健康人群肠道大肠埃希菌携带Ⅰ类整合子情况以及分子特性、耐药性关系的研究探析，推进医学研究的发展与进步。
1 资料与方法
1.1 一般资料 为了实现对于健康人群大肠埃希菌Ⅰ类整合子与耐压性关系的研究分析，本文选取2009年12月至2010年12月市疾控中心从本地区常驻健康志愿者粪便中分离出的150株大肠埃希菌标本作为分析检测对象。并且对于这150株大肠埃希菌标本按照分离时间的先后顺序进行编号管理，所分离出的大肠埃希菌质量监控符合我国药品生物质制品检定机关的相关要求和规定。
1.2 方法 进行健康人群大肠埃希菌Ⅰ类整合子与耐药性关系分析，首先需要对于分离提取的大肠埃希菌检测标本进行检定，同时通过抗生素敏感试验以及PCR扩增方法对于检测菌种的耐药性以及Ⅰ类整合子情况进行检测，并通过可变区扩增产物内切酶试验、脉冲场凝胶电泳分子分型等方法手段，对于检测菌种的Ⅰ类整合子与分子特性以及耐药性关系进行分析研究。
首先，在对于健康人群大肠埃希菌的耐药性进行检测分析中，采用常规方法对大肠埃希菌菌种标本进行鉴定，同时对于大肠埃希菌的耐药性进行检测分析。其中，进行大肠埃希菌耐药性检测分析中，主要应用21种抗生素，通过进行大肠埃希菌对于21种抗生素的敏感性检测，实现对于大肠埃希菌耐药性的检测和分析。其中，在进行大肠埃希菌对于链霉素以及萘替米星、萘啶酸、四环素、氯霉素、磺胺甲苄啶7种抗生素的敏感性的检测分析中，主要使用纸片扩散法进行检测实现，并根据相关检测标准对于检测分析结果进行判断。
其次，在进行大肠埃希菌Ⅰ类整合子的检测分析中，先通过煮沸法对于大肠埃希菌中的总DNA进行提取，然后对于总DNA中的Ⅰ类整合子进行检测，检测主要通过PCR扩增检测方法实现。在进行PCR扩增检测大肠埃希菌总DNA中Ⅰ类整合子时，对于扩增产物进行限制性核酸内切酶分析，其中酶切图谱相同的扩增子含有相同的基因盒，而不同扩增子通过纯化后进行测序分析，测序结果通过数据库查找进行相似序列检测，以实现同源性检索。最后，通过脉冲场凝胶电泳分子分型检测，并根据电泳检测图谱，对于大肠埃希菌的同源性进行分析。
2 结 果
根据上述对于健康人群大肠埃希菌Ⅰ类整合子与耐药性检测分析方法，在进行大肠埃希菌药物敏感性检测中，150株大肠埃希菌标本中，有83株大肠埃希菌具有良好的三种以上抗生素耐受性，大肠埃希菌的多种药物耐受性比例在55%；另有5株大肠埃希菌标本检测出有超广谱β-内酰胺酶阳性，阳性率约为3%，并且多存在于临床分离菌株的β-内酰胺酶阳性株中。此外，健康人群大肠埃希菌对于亚胺培南以及头孢替坦、头孢吡亏的敏感性为100%，这说明健康人群大肠埃希菌所面临的抗生素选择性压力比临床分离菌株要低。最后，通过对于菌株Ⅰ类整合子与耐药性分析，同时再加上对于健康人群大肠埃希菌Ⅰ类整合子分型检测以及脉冲场凝胶电泳分析显示，52株耐受6种以上抗生素的大肠埃希菌中，37株含有整合子，同时在相同或者是不同基因型菌株中都可以含有相同的整合子。同时，健康人群大肠埃希菌总DNA中Ⅰ类整合子含有情况与菌种耐多药性之间有着密切的关系。并且整合子能够在细菌种内进行水平传播，是介导细菌耐药性的重要分子机制。
3 讨 论
在医学研究领域，一般情况下，Ⅰ类整合子在临床以及食源性致癌病菌中存在比较普遍并且流行。在上文中，对于150株健康志愿者粪便分离出的大肠埃希菌Ⅰ类整合子以及耐药性进行检测分析中显示，首先，该地区健康人群粪便中大肠埃希菌的含有率约为28%。此外，对于大肠埃希菌及Ⅰ类整合子、耐药性关系分析中，耐药基因盒是整合子对于抗生素进行抗性表达的关键，而上文中大肠埃希菌分子分型中，Ⅰ类整合子检测比较常见的是1700bp带型，约占比率为64%。同时在上文的实验分析中，还检测出大肠埃希菌携带基因盒及其耐药性表型之间有着很好的对应关系，而整合子在介导细菌耐药性方面具有重要的作用和影响。因此，健康人群携带的大肠埃希菌中广泛存在有Ⅰ类整合子，并且和细菌的耐多药性之间有着密切的关系，并且整合子能够在细菌种内进行水平传播，是介导细菌耐药性的重要分子机制。
参考文献
[1] 彭萍.超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌检测及耐药性分析[J].檢验医学，2012（9）.
[2] 方小龙，资捷，王莉平，陈群.新生儿病区产ESBLs大肠埃希菌整合子及其耐药性分析[J].中国微生态学杂志，2012（7）.
[3] 徐莉，魏取好，顾华爱.尿液分离大肠埃希菌Ⅰ类整合子分子特征及其与耐药性的关系[J].中华医院感染学杂志，2013（8）.
【关键词】 健康人群；大肠埃希菌；整合子；耐药性；关系；分析研究
文章编号：1004-7484（2014）-06-3630-02
大肠埃希菌是存在于动物以及人类肠道中的正常菌群，容易引起机会性感染，对于人体的健康造成威胁，同时，大肠埃希菌也是耐药基因的储存库，在细菌耐药性传播中有着非常重要的作用和影响。而整合子是一种具有俘获以及切除、表达耐药基因盒的可移动元件类型，Ⅰ类整合子则与肠杆菌科的耐药性之间有着密切的关联性，是医学领域的一个研究重点。下文将以从健康人群粪便标本中分离出的150株大肠埃希菌作为样本进行检测分析，以进行健康人群肠道大肠埃希菌携带Ⅰ类整合子情况以及分子特性、耐药性关系的研究探析，推进医学研究的发展与进步。
1 资料与方法
1.1 一般资料 为了实现对于健康人群大肠埃希菌Ⅰ类整合子与耐压性关系的研究分析，本文选取2009年12月至2010年12月市疾控中心从本地区常驻健康志愿者粪便中分离出的150株大肠埃希菌标本作为分析检测对象。并且对于这150株大肠埃希菌标本按照分离时间的先后顺序进行编号管理，所分离出的大肠埃希菌质量监控符合我国药品生物质制品检定机关的相关要求和规定。
1.2 方法 进行健康人群大肠埃希菌Ⅰ类整合子与耐药性关系分析，首先需要对于分离提取的大肠埃希菌检测标本进行检定，同时通过抗生素敏感试验以及PCR扩增方法对于检测菌种的耐药性以及Ⅰ类整合子情况进行检测，并通过可变区扩增产物内切酶试验、脉冲场凝胶电泳分子分型等方法手段，对于检测菌种的Ⅰ类整合子与分子特性以及耐药性关系进行分析研究。
首先，在对于健康人群大肠埃希菌的耐药性进行检测分析中，采用常规方法对大肠埃希菌菌种标本进行鉴定，同时对于大肠埃希菌的耐药性进行检测分析。其中，进行大肠埃希菌耐药性检测分析中，主要应用21种抗生素，通过进行大肠埃希菌对于21种抗生素的敏感性检测，实现对于大肠埃希菌耐药性的检测和分析。其中，在进行大肠埃希菌对于链霉素以及萘替米星、萘啶酸、四环素、氯霉素、磺胺甲苄啶7种抗生素的敏感性的检测分析中，主要使用纸片扩散法进行检测实现，并根据相关检测标准对于检测分析结果进行判断。
其次，在进行大肠埃希菌Ⅰ类整合子的检测分析中，先通过煮沸法对于大肠埃希菌中的总DNA进行提取，然后对于总DNA中的Ⅰ类整合子进行检测，检测主要通过PCR扩增检测方法实现。在进行PCR扩增检测大肠埃希菌总DNA中Ⅰ类整合子时，对于扩增产物进行限制性核酸内切酶分析，其中酶切图谱相同的扩增子含有相同的基因盒，而不同扩增子通过纯化后进行测序分析，测序结果通过数据库查找进行相似序列检测，以实现同源性检索。最后，通过脉冲场凝胶电泳分子分型检测，并根据电泳检测图谱，对于大肠埃希菌的同源性进行分析。
2 结 果
根据上述对于健康人群大肠埃希菌Ⅰ类整合子与耐药性检测分析方法，在进行大肠埃希菌药物敏感性检测中，150株大肠埃希菌标本中，有83株大肠埃希菌具有良好的三种以上抗生素耐受性，大肠埃希菌的多种药物耐受性比例在55%；另有5株大肠埃希菌标本检测出有超广谱β-内酰胺酶阳性，阳性率约为3%，并且多存在于临床分离菌株的β-内酰胺酶阳性株中。此外，健康人群大肠埃希菌对于亚胺培南以及头孢替坦、头孢吡亏的敏感性为100%，这说明健康人群大肠埃希菌所面临的抗生素选择性压力比临床分离菌株要低。最后，通过对于菌株Ⅰ类整合子与耐药性分析，同时再加上对于健康人群大肠埃希菌Ⅰ类整合子分型检测以及脉冲场凝胶电泳分析显示，52株耐受6种以上抗生素的大肠埃希菌中，37株含有整合子，同时在相同或者是不同基因型菌株中都可以含有相同的整合子。同时，健康人群大肠埃希菌总DNA中Ⅰ类整合子含有情况与菌种耐多药性之间有着密切的关系。并且整合子能够在细菌种内进行水平传播，是介导细菌耐药性的重要分子机制。
3 讨 论
在医学研究领域，一般情况下，Ⅰ类整合子在临床以及食源性致癌病菌中存在比较普遍并且流行。在上文中，对于150株健康志愿者粪便分离出的大肠埃希菌Ⅰ类整合子以及耐药性进行检测分析中显示，首先，该地区健康人群粪便中大肠埃希菌的含有率约为28%。此外，对于大肠埃希菌及Ⅰ类整合子、耐药性关系分析中，耐药基因盒是整合子对于抗生素进行抗性表达的关键，而上文中大肠埃希菌分子分型中，Ⅰ类整合子检测比较常见的是1700bp带型，约占比率为64%。同时在上文的实验分析中，还检测出大肠埃希菌携带基因盒及其耐药性表型之间有着很好的对应关系，而整合子在介导细菌耐药性方面具有重要的作用和影响。因此，健康人群携带的大肠埃希菌中广泛存在有Ⅰ类整合子，并且和细菌的耐多药性之间有着密切的关系，并且整合子能够在细菌种内进行水平传播，是介导细菌耐药性的重要分子机制。
参考文献
[1] 彭萍.超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌检测及耐药性分析[J].檢验医学，2012（9）.
[2] 方小龙，资捷，王莉平，陈群.新生儿病区产ESBLs大肠埃希菌整合子及其耐药性分析[J].中国微生态学杂志，2012（7）.
[3] 徐莉，魏取好，顾华爱.尿液分离大肠埃希菌Ⅰ类整合子分子特征及其与耐药性的关系[J].中华医院感染学杂志，2013（8）.