论文部分内容阅读
[摘 要]Q-active四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱以其高质量精度Full Scan 质量精度（小于1ppm）和Full Scan同时激发二级质谱（ddms）等强大功能，18min内即可定性复杂化妆品基质中15种糖皮质激素化合物；采用仪器自带Mass Frontier 7.0软件对筛查出15种化合物结构进行二级碎裂得到理论二级碎片的M/Z 与实测特征碎片比较，其质量精度仍在1.0ppm左右，从而更加确证了筛查结果的准确性。
[关键词]Q-Exactive， 四極杆-静电场轨道阱、高分辨质谱，糖皮质激素
中图分类号：TQ173.4+1 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2013）12-0244-02
糖皮质类激素属甾体类化合物，具有强大的抗炎作用，对许多皮肤性炎症非常有效。但长期大量使用会导致皮质功能亢进综合征、加重感染不良后果。近年来，化妆品中糖皮质类激素的检测受关注，国内外均有文献报道[1]。采用检测方法包括高效液相色谱法[2]和液相色谱-联用质谱法[3]。标准GB/T24800.2-2009《化妆品中四十一种糖皮质激素的测定液相色谱串联质谱法和薄层层析法》中建立了较为系统地测定化妆品中糖皮质激素的方法，但采用低分辨率四级杆建立方法比较繁复（如需确认每种化合物的母离子-子离子-碰撞能量等）。高分辨质谱由于具有质量范围宽、扫描速度快、灵敏度高（全扫描模式）的优点，且可提供母离子和碎片离子的精确质量数[4]，因此采用QE高分辨质谱，只需采用简单的Full-Scan加自动触发ms/ms二级质谱就可以完成准确的定性，且不会因为目标化合物的增加而损失灵敏度。本文采用赛默飞世尔科技Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱18分钟内准确定性了化妆品基质样品中15种糖皮质激素。
1.实验部分
1.1 仪器与试剂
Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱（赛默飞世尔科技Thermo Fisher Scientific公司）。配置有H-ESI Ⅱ源，液相色谱系统为戴安Ultimate 3000 超高压液相色谱带自动进样器，色谱柱为Thermofisher Hypersil Gold C18（2.1×100mm I.D.，1.9μm粒径），流动相采用乙腈/水，均为HPLC级；样品为化妆品空白基质加标样品
1.2 仪器条件
流 动 相 ：有机相-乙腈（2mM NH4AC）/水相-（2mM NH4AC+0.05% HAC ）正离子
有机相-乙腈（2mM NH4AC）/水相-（2mM NH4AC ）负离子
流速：300ul/min 进样量：5.0μl
洗脱梯度 ： time 有机相（乙腈） 流速（ul/min）
质谱条件（ESI）：电离模式：HESI-Ⅱ（电喷雾电离）；毛细管电压：3500V（正/负）；鞘气：40arb；辅助气：10arb；雾化温度：300℃；分辨率：70，000；扫描模式：fullscan（全扫描）/ddms；质量范围：m/z（100-1000）
2.实验结果与讨论
2.1 方法优化
相比传统三重四级杆质谱，Q-Exactive 无需任何前期的方法优化，采用全扫描（full scan）直接进样分析。分析结果可见，15种化合物可在18分钟全部检测，且质量偏差均在1ppm以内。表1为QE筛查化妆品基质定性结果。
2.2 二级质谱定性确认与Q-Exactive 二级碎片离子质量精度
Q-Exactive可以在做Full Scan的同时自动触发做ms/ms，采集到每个化合物的二级质谱图与GB/T 24800.2-2009中规定每种化合物二级特征碎片相符；通过软件Mass Frontier 7.0 得到的曲安奈德理论特征碎片（M/Z 397.20095）与实际测定二级碎片质量偏差在1ppm左右，见图1。
3.结论
采用Q-Exactive筛查化妆品基质中的糖皮质激素类，无需方法开发，用full scan+ddms/ms自动触发二级质谱，且一级和二级质谱质量精度均在1ppm以内，完全保证筛查结果的准确性。Q-Exactive高分辨质谱将在复杂基质未知组分定性中发挥更强大的作用。
参考文献
[1] 谭建华，熊小婷，赵田甜，贾芳，王继才，席绍峰，李慧勇，吴玉銮.化妆品中糖皮质类激素的快速测定.现代食品科学，2012，（02）.
[2] 吴大南，郑和辉，李洁.高效液相色谱法检测化妆品中6种糖皮质激素，中国卫生检验杂志.2006，（3）.
[3] 王传现，刘正一，倪昕路，韩丽，方晓明，张社.高效液相色谱-串联质谱法检测化妆品中糖皮质激素类违禁药物.分析仪器，2008（06）.
[4] 冯红，潘桂湘.高分辨质谱在中药化学成分分析中的应用.辽宁中医药大学学报.2012（8）.
[关键词]Q-Exactive， 四極杆-静电场轨道阱、高分辨质谱，糖皮质激素
中图分类号：TQ173.4+1 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2013）12-0244-02
糖皮质类激素属甾体类化合物，具有强大的抗炎作用，对许多皮肤性炎症非常有效。但长期大量使用会导致皮质功能亢进综合征、加重感染不良后果。近年来，化妆品中糖皮质类激素的检测受关注，国内外均有文献报道[1]。采用检测方法包括高效液相色谱法[2]和液相色谱-联用质谱法[3]。标准GB/T24800.2-2009《化妆品中四十一种糖皮质激素的测定液相色谱串联质谱法和薄层层析法》中建立了较为系统地测定化妆品中糖皮质激素的方法，但采用低分辨率四级杆建立方法比较繁复（如需确认每种化合物的母离子-子离子-碰撞能量等）。高分辨质谱由于具有质量范围宽、扫描速度快、灵敏度高（全扫描模式）的优点，且可提供母离子和碎片离子的精确质量数[4]，因此采用QE高分辨质谱，只需采用简单的Full-Scan加自动触发ms/ms二级质谱就可以完成准确的定性，且不会因为目标化合物的增加而损失灵敏度。本文采用赛默飞世尔科技Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱18分钟内准确定性了化妆品基质样品中15种糖皮质激素。
1.实验部分
1.1 仪器与试剂
Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱（赛默飞世尔科技Thermo Fisher Scientific公司）。配置有H-ESI Ⅱ源，液相色谱系统为戴安Ultimate 3000 超高压液相色谱带自动进样器，色谱柱为Thermofisher Hypersil Gold C18（2.1×100mm I.D.，1.9μm粒径），流动相采用乙腈/水，均为HPLC级；样品为化妆品空白基质加标样品
1.2 仪器条件
流 动 相 ：有机相-乙腈（2mM NH4AC）/水相-（2mM NH4AC+0.05% HAC ）正离子
有机相-乙腈（2mM NH4AC）/水相-（2mM NH4AC ）负离子
流速：300ul/min 进样量：5.0μl
洗脱梯度 ： time 有机相（乙腈） 流速（ul/min）
质谱条件（ESI）：电离模式：HESI-Ⅱ（电喷雾电离）；毛细管电压：3500V（正/负）；鞘气：40arb；辅助气：10arb；雾化温度：300℃；分辨率：70，000；扫描模式：fullscan（全扫描）/ddms；质量范围：m/z（100-1000）
2.实验结果与讨论
2.1 方法优化
相比传统三重四级杆质谱，Q-Exactive 无需任何前期的方法优化，采用全扫描（full scan）直接进样分析。分析结果可见，15种化合物可在18分钟全部检测，且质量偏差均在1ppm以内。表1为QE筛查化妆品基质定性结果。
2.2 二级质谱定性确认与Q-Exactive 二级碎片离子质量精度
Q-Exactive可以在做Full Scan的同时自动触发做ms/ms，采集到每个化合物的二级质谱图与GB/T 24800.2-2009中规定每种化合物二级特征碎片相符；通过软件Mass Frontier 7.0 得到的曲安奈德理论特征碎片（M/Z 397.20095）与实际测定二级碎片质量偏差在1ppm左右，见图1。
3.结论
采用Q-Exactive筛查化妆品基质中的糖皮质激素类，无需方法开发，用full scan+ddms/ms自动触发二级质谱，且一级和二级质谱质量精度均在1ppm以内，完全保证筛查结果的准确性。Q-Exactive高分辨质谱将在复杂基质未知组分定性中发挥更强大的作用。
参考文献
[1] 谭建华，熊小婷，赵田甜，贾芳，王继才，席绍峰，李慧勇，吴玉銮.化妆品中糖皮质类激素的快速测定.现代食品科学，2012，（02）.
[2] 吴大南，郑和辉，李洁.高效液相色谱法检测化妆品中6种糖皮质激素，中国卫生检验杂志.2006，（3）.
[3] 王传现，刘正一，倪昕路，韩丽，方晓明，张社.高效液相色谱-串联质谱法检测化妆品中糖皮质激素类违禁药物.分析仪器，2008（06）.
[4] 冯红，潘桂湘.高分辨质谱在中药化学成分分析中的应用.辽宁中医药大学学报.2012（8）.