【摘 要】
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目的 探讨组蛋白去甲基化酶5C（KDM5C）通过Hippo-YAP1通路调控人宫颈癌发生的分子机制。方法 采用稳转过表达KDM5C蛋白的CaSki细胞系，应用转录组测序（RNA-seq）技术进行全转录组测序分析差异表达基因，并对这些差异基因进行GO分析、KEGG分析和蛋白互作网络分析。随后用siRNA敲低KDM5C基因，并通过RT-qPCR和Western blotting等反向验证关键受调控基因
【基金项目】
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湖北省卫健委科研项目（WJ2021M219）； “湖北省青年拔尖人才培养计划”经费项目（鄂组函[2021]10号）； 湖北民族大学校内高水平培育项目（PY21007）；
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目的 探讨组蛋白去甲基化酶5C（KDM5C）通过Hippo-YAP1通路调控人宫颈癌发生的分子机制。方法 采用稳转过表达KDM5C蛋白的CaSki细胞系，应用转录组测序（RNA-seq）技术进行全转录组测序分析差异表达基因，并对这些差异基因进行GO分析、KEGG分析和蛋白互作网络分析。随后用siRNA敲低KDM5C基因，并通过RT-qPCR和Western blotting等反向验证关键受调控基因Yes相关蛋白1（YAP1）的表达变化。同时，对过表达KDM5C蛋白的CaSki细胞系通过染色质免疫共沉淀测序（ChIP-seq）技术和ChIP-qPCR方法分析KDM5C蛋白对YAP1基因启动子区间甲基化状态的影响。结果 RNA-Seq分析显示，过表达KDM5C蛋白导致356个mRNA表达明显上调和335个mRNA表达明显下调（P＜0.05）；GO富集分析显示，KDM5C蛋白主要参与机体各种生物发育过程；KEGG富集分析显示，KDM5C蛋白主要参与黏着斑连接、甾类激素生物合成、Hippo-YAP1信号通路、FoxO信号通路、凋亡和感染等过程。RT-qPCR分析结果显示，siRNA敲低基因KDM5C可上调YAP1基因的表达；Western blotting结果也显示，降低KDM5C蛋白的表达可同时上调YAP1和磷酸化YAP1的表达水平（P＜0.05）。ChIP-Seq分析显示，过表达KDM5C蛋白细胞系较对照细胞系可明显升高YAP1基因启动子区间的H3K4me1水平、并降低H3K4me3水平（P＜0.05），ChIP-qPCR分析也验证了这种表达变化（P＜0.05）。结论 KDM5C蛋白通过调控宫颈肿瘤细胞YAP1基因启动子的组蛋白H3K4me1/me3甲基化水平，进而影响YAP1基因的转录；YAP1蛋白作为Hippo-YAP1通路的核心因子，其表达改变直接影响细胞的黏附、增殖和凋亡等过程，进而参与宫颈癌的发生发展。
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