【摘 要】
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选用4头猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)血清抗体阴性的普通断奶仔猪,无菌取脾脏,分离淋巴细胞,分为对照组和试验组进行体外培养。试验组在培养体系中加入一定量的
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(30471302)
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选用4头猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)血清抗体阴性的普通断奶仔猪,无菌取脾脏,分离淋巴细胞,分为对照组和试验组进行体外培养。试验组在培养体系中加入一定量的PCV2。分别在培养后的0、2、4、6、12、24、36和48 h收获淋巴细胞。用电子显微镜、DNA琼脂糖凝胶电泳对细胞凋亡进行定性测定,用流式细胞术对细胞周期和细胞凋亡率进行定量测定,同时测定了凋亡相关蛋白半胱天冬酶3(Caspase-3)的表达情况。结果显示,PCV2作用后不同时间,DNA电泳均呈现出具细胞凋亡特征的梯形条带;电镜下出现细胞凋亡各期的形态学变化。从培养后4 h开始,试验组淋巴细胞凋亡率均显著高于对照组(P<0.05);而表示细胞增殖活性的增殖指数(PI),试验组在2、4、6、12和24 h均比对照组显著下降(P<0.05);表达Caspase-3的细胞百分率,除0 h外,试验组均显著高于对照组(P<0.05)。上述结果表明,PCV2能引起体外培养的仔猪淋巴细胞凋亡率增加,细胞增殖活性下降,且Caspase-3是PCV2诱导淋巴细胞凋亡的重要调节物。
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