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【摘要】 目的 通过生龙葵水煎液及龙葵果汁对小白鼠的急性毒性试验研究，为生龙葵及龙葵果汁的安全性评价提供理论依据。方法 用最大浓度最大容积的生龙葵水煎液，每日三次对小白鼠灌胃给药；用不同浓度相同体积的龙葵果汁对小白鼠给药一次。连续观察1周，记录小白鼠毒性反应情况。结果 4.12g.mL-1生龙葵水煎液无动物死亡；龙葵果汁除最大剂量组40g·kg-1有个别死亡外，其他组无异常。结论 生龙葵的最大给药量为494.4g·kg-1，龙葵果汁的最大耐受量为36g·kg-1，本试验提示生龙葵的毒性很小，作为野菜食用及食品开发是很安全的；但龙葵果有一定毒性，开发成果汁饮料要注意用量。
【关键词】 生龙葵；龙葵果汁；最大给药量；最大耐受量
龙葵，别名白花菜；多生于村边、路旁、园边、荒地。广西隆林、凌云、靖西、融水、金秀等有分布。味甘苦，性微寒，有小毒。凉血解毒，清热利尿，抗癌，降血压。可用于小便不利、膀胱炎、慢性支气管炎、高血压、狂犬咬伤、肝癌、食道癌等[1]。广西民间流行吃野菜来养生，龙葵是市场上最常见的野菜之一。食用龙葵食品及其果汁饮料是否安全，为了评价野菜龙葵的毒性，本文通过观察生龙葵嫩叶水煎液及龙葵果汁灌胃给药对小白鼠的急性毒性反应。
1 资料与方法
1.1 材料 昆明种小白鼠150只，SPF，体重20±2.0g，雌雄各半，购于广西医科大学实验动物中心，合格号：SCXK（桂）：2009-0802。生龙葵（购于降桥村菜市），龙葵果（熟果，采集于沙江河岸边），制成含生药材4.12g.mL-1的药液100.0mL，1.0g.mL-1的果汁100.0mL备用。
1.2 方法与结果
1.2.1 预试验[2-3] 取20只禁食14h以上的昆明种小白鼠，雌雄各半，随机分为2组，给药组用含生药4.12g.mL-1的生龙葵药液按0.4mL/10g的给药量（最大给药量）灌胃给药，此浓度为12号灌胃器能抽吸的最大浓度；对照组灌胃给予同等量的饮用水[4]。连续观察1周，结果给药组与对照组均无动物死亡，无法按常规测定LD50，故进行最大给药量测定。
取20只禁食14h以上的小白鼠，雌雄各半，随机分为2组，给药组用含果汁1.0g.mL-1的龙葵果汁按0.4mL/10g的给药量（最大给药量）灌胃给药，此浓度为12号灌胃器能抽吸的最大浓度；对照组灌胃给予同等量的饮用水[4]。连续观察1周，结果给药组有1只动物死亡，无法按常规测定LD50，故进行最大耐受量测定。
1.2.2 最大给药量测定试验[3] 选取健康小鼠40只，雌雄各半，平均体重20±2.0g，随机分为2组。小鼠禁食（不禁水）约14h后用含生药4.12g.mL-1生龙葵水煎液按0.40mL/10g的最大给药量灌胃给药，每日三次，间隔6小时。对照组灌胃给予同等量的饮用水[4]。给药后，小鼠正常饲养于清洁饲养室，室温（24±2）℃，相对湿度45%-60%，观察动物的活动、皮毛、饮食、体重、粪便有无异常改变，并观察有无中毒症状及死亡（若有死亡，则进行解剖及病理学检验），连续观察1周。1周后处死动物进行解剖，与对照组比较，观察心、肝、脾、肺、肾、胃肠、膀胱、性腺（子宫、卵巢或睾丸和附睾）等主要脏器有无异常变化。
1.2.3 最大耐受量测定试验[3] 选取健康小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组。小鼠禁食（不禁水）约14h后用含果汁1.00g.mL-1、0.90g.mL-1、0.81g.mL-1、0.73g.mL-1、0.66g.mL-1龙葵果汁按0.40mL/10g的最大给药量灌胃给药。给药后小鼠正常饲养于清洁饲养室，室温（24±2）℃，相对湿度45%-60%，观察动物的活动、皮毛、饮食、粪便有无异常改变，并观察有无中毒症状及死亡（若有死亡，则进行解剖及病理学检验），连续观察1周。1周后处死动物进行解剖，与对照组比较，观察心、肝、脾、肺、肾、胃肠、膀胱、性腺（子宫、卵巢或睾丸和附睾）等主要脏器有无异常变化。
1.2.4 实验结果 生龙葵水煎液给药后大多数小鼠活动明显减少，少数静卧不动，呈昏睡状，闭目等，但轻敲笼具有抬头或躲避反应。灌胃后2小时内动物极少进食，大小便正常，有少数小鼠先喝水再进食。3小时后动物的活动、饮食等逐渐恢复正常。连续观察7天，小鼠活动、皮毛、粪便正常，存活情况，见表1。采食量变化，见表2。体重变化，见表3。实验后，处死动物后进行解剖，与对照组比较，其主要脏器心、肝、脾、肺、肾、胃肠、膀胱、性腺（子宫、卵巢或睾丸和附睾）均未发现明显的异常病变。
龙葵果汁给药后大多数小鼠活动明显减少，少数静卧不动，呈昏睡状等，轻敲笼具有抬头或躲避反应。在给药第二天，第1组7号雄性小鼠死亡，立即解剖，肉眼观察未发现心、肝、脾、肺、肾、胃肠、膀胱、附睾有异常。3小时后动物的活动、饮食等逐渐恢复正常。连续观察7天，未见其它异常或不良反应，也无动物死亡，见表4。处死动物后进行解剖，与对照组比较，其主要脏器心、肝、脾、肺、肾、胃肠、膀胱、性腺（子宫、卵巢或睾丸和附睾）均未发现明显的异常。
高剂量给药组40g·kg-1有1只小鼠死亡，其他给药组无动物死亡，故龙葵果汁对小鼠灌胃给药的最大耐受量为36g·kg-1。
2 讨论
从实验结果表1可知，生龙葵的最大给药量为494.4g·kg-1，相当于拟临床成人用量的494.4倍（临床成人体重按60kg计算，每日服药按生药计为1.0g·kg-1）；由表2可知，给药组与对照组采食量变化无明显差异；由表3可见给药组与对照组体重变化无明显差异；表4可得出龙葵果汁给小鼠灌胃给药的最大耐受量为36g·kg-1，相当于拟临床成人用量的72倍（临床成人体重按60kg计算，每日服药按生药计为0.5g·kg-1），动物能完全耐受。一般认为[5]，按体重计算，小鼠一日最大给药量相当于成人临床日用量的100倍以上则较为安全。本试验表明生龙葵作为野菜食用比较安全，而龙葵果汁有一定毒性。提示把生龙葵当野菜吃时，可放心食用，可以作为食品开发；而要把龙葵果汁开发成饮料时，要注意用量，不能超过耐受量。至于生龙葵能否长期食用，会不会出现蓄积中毒，还需要进一步作长期毒性试验研究，结合动物毒性反应结果作综合分析以评价其毒性。
参考文献
[1] 邹节明，钟小清，吕高荣，等.广西特色中草药资源选编[M].北京：科学出版社，2011：781-782.
[2] 卫生部药政管理局.中药新药临床研究指南[S].北京：人民卫生出版社，1999：203-204.
[3] 李仪奎，金若敏，王钦茂，等.中药药理实验方法学[M].2版.上海：上海科学技术出版社，2006：1005-1006.
[4] 张国恩，杨德华，钱玉中，等.痹康饮合剂急性毒性实验研究[J].中成药，2005，27（3）：339-340.
[5] 谢秀琼，张世臣.中药新制剂开发与应用[M].2版.北京：北京人民出版社，2000：540-540.
【关键词】 生龙葵；龙葵果汁；最大给药量；最大耐受量
龙葵，别名白花菜；多生于村边、路旁、园边、荒地。广西隆林、凌云、靖西、融水、金秀等有分布。味甘苦，性微寒，有小毒。凉血解毒，清热利尿，抗癌，降血压。可用于小便不利、膀胱炎、慢性支气管炎、高血压、狂犬咬伤、肝癌、食道癌等[1]。广西民间流行吃野菜来养生，龙葵是市场上最常见的野菜之一。食用龙葵食品及其果汁饮料是否安全，为了评价野菜龙葵的毒性，本文通过观察生龙葵嫩叶水煎液及龙葵果汁灌胃给药对小白鼠的急性毒性反应。
1 资料与方法
1.1 材料 昆明种小白鼠150只，SPF，体重20±2.0g，雌雄各半，购于广西医科大学实验动物中心，合格号：SCXK（桂）：2009-0802。生龙葵（购于降桥村菜市），龙葵果（熟果，采集于沙江河岸边），制成含生药材4.12g.mL-1的药液100.0mL，1.0g.mL-1的果汁100.0mL备用。
1.2 方法与结果
1.2.1 预试验[2-3] 取20只禁食14h以上的昆明种小白鼠，雌雄各半，随机分为2组，给药组用含生药4.12g.mL-1的生龙葵药液按0.4mL/10g的给药量（最大给药量）灌胃给药，此浓度为12号灌胃器能抽吸的最大浓度；对照组灌胃给予同等量的饮用水[4]。连续观察1周，结果给药组与对照组均无动物死亡，无法按常规测定LD50，故进行最大给药量测定。
取20只禁食14h以上的小白鼠，雌雄各半，随机分为2组，给药组用含果汁1.0g.mL-1的龙葵果汁按0.4mL/10g的给药量（最大给药量）灌胃给药，此浓度为12号灌胃器能抽吸的最大浓度；对照组灌胃给予同等量的饮用水[4]。连续观察1周，结果给药组有1只动物死亡，无法按常规测定LD50，故进行最大耐受量测定。
1.2.2 最大给药量测定试验[3] 选取健康小鼠40只，雌雄各半，平均体重20±2.0g，随机分为2组。小鼠禁食（不禁水）约14h后用含生药4.12g.mL-1生龙葵水煎液按0.40mL/10g的最大给药量灌胃给药，每日三次，间隔6小时。对照组灌胃给予同等量的饮用水[4]。给药后，小鼠正常饲养于清洁饲养室，室温（24±2）℃，相对湿度45%-60%，观察动物的活动、皮毛、饮食、体重、粪便有无异常改变，并观察有无中毒症状及死亡（若有死亡，则进行解剖及病理学检验），连续观察1周。1周后处死动物进行解剖，与对照组比较，观察心、肝、脾、肺、肾、胃肠、膀胱、性腺（子宫、卵巢或睾丸和附睾）等主要脏器有无异常变化。
1.2.3 最大耐受量测定试验[3] 选取健康小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组。小鼠禁食（不禁水）约14h后用含果汁1.00g.mL-1、0.90g.mL-1、0.81g.mL-1、0.73g.mL-1、0.66g.mL-1龙葵果汁按0.40mL/10g的最大给药量灌胃给药。给药后小鼠正常饲养于清洁饲养室，室温（24±2）℃，相对湿度45%-60%，观察动物的活动、皮毛、饮食、粪便有无异常改变，并观察有无中毒症状及死亡（若有死亡，则进行解剖及病理学检验），连续观察1周。1周后处死动物进行解剖，与对照组比较，观察心、肝、脾、肺、肾、胃肠、膀胱、性腺（子宫、卵巢或睾丸和附睾）等主要脏器有无异常变化。
1.2.4 实验结果 生龙葵水煎液给药后大多数小鼠活动明显减少，少数静卧不动，呈昏睡状，闭目等，但轻敲笼具有抬头或躲避反应。灌胃后2小时内动物极少进食，大小便正常，有少数小鼠先喝水再进食。3小时后动物的活动、饮食等逐渐恢复正常。连续观察7天，小鼠活动、皮毛、粪便正常，存活情况，见表1。采食量变化，见表2。体重变化，见表3。实验后，处死动物后进行解剖，与对照组比较，其主要脏器心、肝、脾、肺、肾、胃肠、膀胱、性腺（子宫、卵巢或睾丸和附睾）均未发现明显的异常病变。
龙葵果汁给药后大多数小鼠活动明显减少，少数静卧不动，呈昏睡状等，轻敲笼具有抬头或躲避反应。在给药第二天，第1组7号雄性小鼠死亡，立即解剖，肉眼观察未发现心、肝、脾、肺、肾、胃肠、膀胱、附睾有异常。3小时后动物的活动、饮食等逐渐恢复正常。连续观察7天，未见其它异常或不良反应，也无动物死亡，见表4。处死动物后进行解剖，与对照组比较，其主要脏器心、肝、脾、肺、肾、胃肠、膀胱、性腺（子宫、卵巢或睾丸和附睾）均未发现明显的异常。
高剂量给药组40g·kg-1有1只小鼠死亡，其他给药组无动物死亡，故龙葵果汁对小鼠灌胃给药的最大耐受量为36g·kg-1。
2 讨论
从实验结果表1可知，生龙葵的最大给药量为494.4g·kg-1，相当于拟临床成人用量的494.4倍（临床成人体重按60kg计算，每日服药按生药计为1.0g·kg-1）；由表2可知，给药组与对照组采食量变化无明显差异；由表3可见给药组与对照组体重变化无明显差异；表4可得出龙葵果汁给小鼠灌胃给药的最大耐受量为36g·kg-1，相当于拟临床成人用量的72倍（临床成人体重按60kg计算，每日服药按生药计为0.5g·kg-1），动物能完全耐受。一般认为[5]，按体重计算，小鼠一日最大给药量相当于成人临床日用量的100倍以上则较为安全。本试验表明生龙葵作为野菜食用比较安全，而龙葵果汁有一定毒性。提示把生龙葵当野菜吃时，可放心食用，可以作为食品开发；而要把龙葵果汁开发成饮料时，要注意用量，不能超过耐受量。至于生龙葵能否长期食用，会不会出现蓄积中毒，还需要进一步作长期毒性试验研究，结合动物毒性反应结果作综合分析以评价其毒性。
参考文献
[1] 邹节明，钟小清，吕高荣，等.广西特色中草药资源选编[M].北京：科学出版社，2011：781-782.
[2] 卫生部药政管理局.中药新药临床研究指南[S].北京：人民卫生出版社，1999：203-204.
[3] 李仪奎，金若敏，王钦茂，等.中药药理实验方法学[M].2版.上海：上海科学技术出版社，2006：1005-1006.
[4] 张国恩，杨德华，钱玉中，等.痹康饮合剂急性毒性实验研究[J].中成药，2005，27（3）：339-340.
[5] 谢秀琼，张世臣.中药新制剂开发与应用[M].2版.北京：北京人民出版社，2000：540-540.