【摘 要】
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验证PI3K/AKT信号通路抑制的有效性，分析PI3K/AKT信号通路对冷却滩羊肉贮藏期间细胞凋亡途径的影响。以滩羊后腿肉为研究对象，采用10 μmol/L PI3K抑制剂LY294002溶液对滩羊肉进行注射处理，4℃条件下分别贮藏0 d、2 d、4 d、6 d、8 d，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-Polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）和蛋白质
【基金项目】
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国家自然科学基金地区科学基金项目（31860427）；
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验证PI3K/AKT信号通路抑制的有效性，分析PI3K/AKT信号通路对冷却滩羊肉贮藏期间细胞凋亡途径的影响。以滩羊后腿肉为研究对象，采用10 μmol/L PI3K抑制剂LY294002溶液对滩羊肉进行注射处理，4℃条件下分别贮藏0 d、2 d、4 d、6 d、8 d，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-Polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）和蛋白质免疫印迹（Western blottiing，WB）分析PI3K、AKT蛋白的表达情况，以此验证PI3K/AKT信号通路抑制的有效性，同时分析滩羊肉贮藏期间能量因子、氧化应激水平、线粒体损伤程度以及Caspase-3活性的变化，以探索PI3K/AKT信号通路对冷却滩羊肉贮藏期间细胞凋亡途径的诱导机制。结果表明：通过蛋白质免疫印迹法（WB）发现PI3K和AKT蛋白表达量均减少，验证了PI3K/AKT信号通路被抑制的有效性；与对照组相比，LY294002处理组线粒体ATP、糖原含量、琥珀酸脱氢酶（SDH）和柠檬酸合成酶（CS）活性显著下降（P ＜ 0.05）；线粒体ROS逐渐增多，氧化应激水平和MPTP开放程度增加；膜电位显著下降（P ＜ 0.05）；凋亡因子Caspase-3活性极显著高于对照组（P ＜ 0.01），表明PI3K/AKT信号通路通过促进ROS产生并与PI3K相互作用，介导了下游Caspase-3的活化，使线粒体结构与功能受损，导致MPTP开放、膜电位降低，进而诱发细胞凋亡。
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