耐药性质粒接合传递效率的高灵敏、快速定量检测

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耐药菌通过接合的方式把耐药性质粒(R-plasmid)传递给敏感菌,是自然界中耐药基因在不同菌株之间进行横向传递的主要途径。检测耐药性质粒的接合传递效率对于监控抗生素的污染和耐药基因的传播、评估耐药菌的安全风险及控制"超级细菌"的传播具有重大的意义。利用实验室自行研制的超高灵敏流式检测装置(HSFCM),本文建立了一种灵敏、快速、定量检测耐药性质粒接合传递效率的新方法。以携带表达β-内酰胺酶(β-lactamase)耐药质粒的供体菌为模型,我们使用特异性抗体分别对β-内酰胺酶和受体菌的表面抗原进行荧光标记,通过HSFCM对单个细菌散射光和双色荧光信号的同时检测,可实现供体菌、受体菌、和质粒接合受体菌的明确分辨,从而实现耐药性质粒接合传递效率和丢失效率的快速、准确测定。该方法的建立将为细菌耐药研究提供先进的分析手段。
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