禽流感病毒RT-PCR检测方法的建立

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本研究参照国内外已发表禽流感病毒(Avian Influenza Virus AIV)的基因序列和AIV相关的RT-PCR检测方法报道,根据AIV高保守、高特异的M1蛋白基因设计一套通用型引物,通过对相关病毒、棉拭子检测,建立了AIV通用型RT-PCR检测方法.根据AIV HA基因设计H5、H7、H9亚型的联合RT-PCR引物,其上下游引物分别位于裂解位点两侧,在确定各亚型单项RT-PCR检测方法的反应条件和反应体系基础上,建立、优化了三联RT-PCR检测方法的反应体系和反应条件,并通过相关病毒、质粒、棉拭子检测,建立了AIV三联RT-PCR检测方法.本研究最终建立了AIV系列RT-PCR检测方法,该方法具有快速、敏感、特异等优点,为AIV的检测、流行病学调查、致病性分析及疫苗使用等奠定了基础.
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