【摘 要】
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NADPH-细胞色素P450还原酶(EC1.6.2.4,NADPH-cytochrome P450 reduc-tase,CPR),是P450的主要电子供体,其与P450的电子传递反应是P450酶系氧化还原反应的限速步骤,是该酶
【机 构】
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西南大学植物保护学院,昆虫学及害虫控制工程重庆市市级重点实验室,重庆400716
【出 处】
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中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会
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NADPH-细胞色素P450还原酶(EC1.6.2.4,NADPH-cytochrome P450 reduc-tase,CPR),是P450的主要电子供体,其与P450的电子传递反应是P450酶系氧化还原反应的限速步骤,是该酶系的重要功能单位.近年来对CPR研究也愈发引起国内外重视,目前主要集中在电子传递、底物作用及基因调控等方面.为探究CPR在柑橘全爪螨P450酶系介导药剂代谢过程中的作用,本研究基于转录组数据库,通过RT-PCR和RACE技术克隆获得柑橘全爪螨P450还原酶cDNA全长,命名为PcCPR.该基因cDNA全长2 260bp,其开放阅读框为2061 bp,编码686个氨基酸残基,预测分子量77.5kDa,理论等电点为5.85.氨基酸序列比对分析发现,同其他物种类似,PcCPR含有细胞色素P450(底物)结合域、FMN结合域、FAD结合域和NADPH结合域.系统发育分析结果表明,PcCPR同二斑叶螨CPR基因亲缘关系最近,同朱砂叶螨同源性次之,相比而言,与昆虫纲亲缘关系稍远.对PcCPR基因在不同发育阶段表达模式研究表明,其在成螨中表达量最低,在幼螨中表达量最高,其次是若螨,两者均显著高于卵和成螨,说明在不同螨态,PcCPR基因所发挥功能存在一定差异,在幼螨、若螨中为P450传递电子能力较强.经4种杀螨剂处理后,该基因表达量均上调,其中哒螨酮处理后,表达水平最高,也暗示其在很大程度上参与了柑橘全爪螨P450对于哒螨酮的代谢过程.本研究系统解析了CPR基因在柑橘全爪螨P450酶系中的作用和地位,对验证P450酶系具体功能和揭示其介导的杀螨剂抗性机制起到重要的推动作用.
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