多环芳烃(Polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)是分子中含有两个或两个以上稠合芳香烃环的化合物,迄今己发现有200多种PAHs,其中有相当部分具有致癌性,如苯并(a)蒽、苯并(a)芘等。食品基体复杂多样,针对不同类型的基体优化样品制备、高效提取和净化是主要的技术难点。2011年,欧盟规定了食用油中苯并(a)蒽(BaA)、(Chr)、苯并(b)荧蒽(BbF)和苯并(a)芘(BaP)这4种PAHs做为食品中PAHs的检测标志物,并规定总含量不能超过10μg/kg,其中苯并(a)芘的含量不能超过2μg/kg[1]。目前高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)是PAHs的主要检测方法[2],是基于HPLC-FLD对于PAHs这类具有较强荧光特性的物质具有较高的灵敏度和选择性。本文建立了高效液相色谱-荧光检测法对橄榄油中BaA、Chr、BbF和BaP四种物质进行准确的定量分析。由于橄榄油的基质非常复杂,且PAHs亲脂性强、含量低,因此需要通过净化样品以消除干扰,提高检测灵敏度。本文从固相萃取柱、提取溶剂、洗脱溶剂、洗脱体积、氮吹温度等方面,对固相萃取-高效液相色谱法的实验条件进行优化,并检测橄榄油中痕量多环芳烃。本文考察了不同类型的固相萃取柱对目标化合物的净化效果,包括分子印迹柱、Supelclean EZ-POP NP和电荷转移型萃取柱BaP-Ⅱ。结果表明,BaP-Ⅱ利用其与PAHs之间特异性的π-π相互作用更有效的去除橄榄油中的脂质基质[3],提高了灵敏度。本文分别以正己烷、环己烷、异丙醇、乙腈、乙腈/正己烷为提取溶剂,对比不同提取溶剂对PAHs的萃取回收率的影响。结果显示,以正己烷、环己烷和异丙醇为提取溶剂时样品的回收率相近;以乙腈为提取溶剂时,各样品的回收率普遍偏低,可能是由于乙腈的极性偏大导致。通过比较了不同淋洗液体积条件下样品的回收率,表明淋洗溶剂体积对样品回收率没有明显影响。本文还对比了在不同洗脱溶剂(丙酮、乙酸乙酯、乙腈)条件下,BaP-Ⅱ柱对4种PAHs的萃取效果。结果显示,乙腈对除BaP外其他三种目标物的洗脱能力最强;而乙酸乙酯和丙酮对4种PAHs的洗脱能力基本相当。当对实际样品进行处理后发现,由于基质效应以丙酮为洗脱溶剂时得到回收率最好,故以丙酮为洗脱溶剂。同时还考察了洗脱溶剂体积对洗脱效果的影响,分别以8mL、12mL、16mL丙酮为洗脱溶剂,对橄榄油中4种PAHs的萃取回收率进行比较。结果显示,在丙酮溶剂用量达到16mL时可以使大部分目标物洗脱下来,4种PAHs可以得到较优的回收率。氮吹浓缩过程作为前处理过程中的最后一步具有至关重要的作用,因此本文考察了不同温度下氮吹对4种PAHs的回收率影响。结果显示,当氮吹温度为60℃时回收率损失严重。通过条件优化,最终前处理优化方案为:取一定量油样加入2mL异丙醇后作为待上样液。BaP-Ⅱ柱依次用6mL丙酮,2mL异丙醇活化,将2mL上样液加入BaP-Ⅱ柱让其自然流过,加入4mL异丙醇淋洗后,采用16mL丙酮做洗脱液,洗脱液于40℃条件下氮吹浓缩,该方法可以得到较好的提取效果。本文采用了标准曲线法对橄榄油中4种PAHs进行定量分析,其回收率在61.2%~113.6%之间,定量限是0.8~1.58ng/g,线性范围是0.8~44.1ng/g,相关系数均大于0.999,相对标准偏差(RSD)不超过5%。结果表明,优化后的前处理方法提高了橄榄油中4种多环芳烃的检测灵敏度,能更准确的进行定量分析。