论文部分内容阅读
维甲酸X受体(RXR)是核受体超家族成员之一,是一种配体激活因子,它以同源二聚体或者与其他核受体结合成异源二聚体的形式起作用。最近的研究表明,RXR在三丁基锡(TBT)致海产腹足类雌性个体性畸变的过程中起着重要作用。本研究首先采用RT-PCR和RACE-PCR技术克隆了杂色鲍RXR基因的cDNA全长序列,该基因全长2405bp,包括663bp的5’非编码区和416bp的3’非编码区,编码441个氨基酸。生物信息学分析显示该基因具有核受体超家族所特有的结构域,DNA结合域(DBD)的氨基酸序列与静水锥实螺(lymnaea stagnalis)、光滑双脐螺(Biomphalaria glabrata)以及疣荔枝螺(Thais clavigera)该区域的序列相似度分别为100%、100%、98%:其配体结合域(LBD)与以上三种腹足类物种的相似度分别为97%、97%、95%。生物进化分析显示,相对于其它的无脊椎动物,腹足类RXR的配体结合域(LBD)与脊椎动物更加接近。其次运用Real-time PCR技术研究了RXR在头神经节、血淋巴、肝胰腺、肌肉、外套膜以及卵巢中的表达情况,结果显示RXR在杂色鲍的外套膜和肌肉中的表达量最高,且雄性外套膜组织和肌肉组织的表达明显高于雌性,而在雌性个体血淋巴中的表达量最低。为了了解RXR在有机锡致鲍性畸变中的作用,本研究将雌鲍分为四组,分别注射三丁基锡(TBT)、三苯基锡(TPT)、9顺式维甲酸(9CRA)和牛血清结合蛋白(BSA),注射浓度为1μg/gwet wt,其中BSA组作为对照组。Real-timePCR定量分析RXR的mRNA在卵巢中表达水平变化的结果显示,两个月后,RXR在TPT组和9CRA组卵巢中的表达量显著高于对照组(P<0.05),而TBT组与对照组相比并无显著差异。TPT和9CRA均能够引起RXR在杂色鲍卵巢中表达量的变化,由此我们推测RXR在有机锡致杂色鲍性畸变过程中可能起着重要作用。