【摘 要】
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目的：获得肾脏特异性表达Cre重组酶的转基因小型猪,为进一步利用Cre-Loxp系统建立条件性基因敲除小型猪动物模型提供工具。方法：通过改造实验室已有的诱导性表达Cre重组酶
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春,130062
【出 处】
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2011东莞第二届国际小型猪学术论坛暨大型实验动物生物医药研究应用研讨会
论文部分内容阅读
目的：获得肾脏特异性表达Cre重组酶的转基因小型猪,为进一步利用Cre-Loxp系统建立条件性基因敲除小型猪动物模型提供工具。方法：通过改造实验室已有的诱导性表达Cre重组酶表达载体pET28a(+)-Mxl-Cre-BGHpolyA-FRT2neoR,构建肾脏特异性表达Cre重组酶表达载体pET28a(+)-AQP2-Cre-BGHpolyA-FRT2neoR。用Fngene HDTransfection Reagent介导转染小型猪成纤维细胞,并利用(G418筛选细胞克隆。利用PCR鉴定成功整合pET28a(+)-AQP2-Cre-BGHpolyA-FRT2neoR的阳性细胞克隆。通过核移植、胚胎移植方法建立转基因小型猪。利用PCR鉴定转基因小型猪Cre表达载体的整合情况。结果：共出生12头小型猪,PCR鉴定表明全部整合了Cre表达载体。结论：建立了肾脏特异性表达Cre重组酶的转基因小型猪,为进一步建立条件性基因敲除小型猪动物模型提供了工具。
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