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本论文主要应用了定点突变、细胞转染、EMSA, ChIP、亚硫酸氢盐测序PCR, western blot、免疫组化、转基因小鼠等技术,对Miwi基因高度时空特异性表达的机制进行了研究。研究表明Miwi基因核心启动子区域-106-+181中的一个ccaat box(-97—93)和一个E2 box (-82—-77)对转录活性至关重要，在体内，转录因子NF-Y与USF分别通过与该ccaat box和E2 box结合发挥转录激活功能。同时转录因子USF结合位点E2 box中的CpG二核苷酸的甲基化抑制USF与该位点的结合，从而控制Miwi基因的组织特异性表达。构建Miwi基因启动子-122—+181区域驱动报告基因EGFP表达的转基因表达载体，并制备转基因小鼠观察该片段是否能够决定Miwi基因在雄性生殖细胞中特异表达，结果表明，Miwi启动子-122—+181区域的303bp的DNA片段确实能够指导外源基因在雄性生殖细胞中从粗线期到圆形精子细胞时期特异表达。