【摘 要】
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以犬2型腺病毒(CAV-2)为载体构建出能表达FPVVP2蛋白的重组病毒.首先通过PCR从FPVGT-2株细胞培养物中扩增出VP2蛋白基因,将其克隆到真核表达质粒pVAX1中,并将其中含有FPVVP2
【机 构】
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军事医学科学院11所,长春,130062
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会
论文部分内容阅读
以犬2型腺病毒(CAV-2)为载体构建出能表达FPVVP2蛋白的重组病毒.首先通过PCR从FPVGT-2株细胞培养物中扩增出VP2蛋白基因,将其克隆到真核表达质粒pVAX1中,并将其中含有FPVVP2基因的完整表达盒酶切后(CMV-VP2-PolyA)进一步定向克隆到含有CAV-2E3区的穿梭质粒pVAX△E3中,构建出pVAX△E3VP2.用SalⅠ+NruⅠ双酶切pVAX△E3VP2,回收含有目的基因的表达盒,将其定向克隆入含有CAV-2全基因组的骨架质粒pPoly2-CAV-2中,获得重组质粒pCAV-2-FPV-VP2.ClaⅠ+AscⅠ酶切pCAV-2-FPV-VP2释放出感染性重组基因组,转染MDCK细胞,获得了重组病毒CAV-2-VP2.该重组病毒能使MDCK细胞产生腺病毒样细胞病变.Westernblot检测证实,该重组病毒能表达具有免疫学活性的VP2蛋白.动物免疫试验表明,该重组病毒可以有效地诱导免疫猫产生抗FPV和CAV-2抗体.
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