【摘 要】
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根据GenBank中已发表的CAV纤突基因序列,设计合成2对4条引物,用已建立的PCR方法,对犬2型腺病毒沈阳分离株第5代强毒(SY-V5)、经蚀斑克隆驯化的第60代毒弱毒(SY-V60)、SY-V60
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根据GenBank中已发表的CAV纤突基因序列,设计合成2对4条引物,用已建立的PCR方法,对犬2型腺病毒沈阳分离株第5代强毒(SY-V5)、经蚀斑克隆驯化的第60代毒弱毒(SY-V60)、SY-V60在易感犬体上传5代的回收毒(SY-CP5)、美国疫苗毒(US-V20)4个毒株的纤突基因进行了扩增,PCR产物经纯化后进行基因序列测定,测序结果经拼接后得到了一个由1632个核苷酸组成的纤突蛋白全基因序列,编码543个氨基酸。测定的犬2型腺病毒与GenBank中的标准的CAV-2强毒株(Toronto A26/61)纤突蛋白基因序列的比较结果表明:我国流行的CAV-2 SY株强毒与Toronto A26/61株相同;驯化克隆毒株SY-V60株与其在犬体上传5代后的犬体传代毒SY-CP5相同,与驯化前的SY-V5相比,在1134位发生碱基颠换,由原来的天冬酰氨(N)变为赖氨酸(K),并导致N-X-S/T潜在糖基化位点发生改变,美国疫苗毒该部位也发生同样的突变,我们测定和比较的CAV-2强毒株有5个潜在的N-联糖基化位点,弱毒仅有4个位点;US-V20与Toronto株差异较大,有11个碱基发生变化,导致8个氨基酸的变异,而我们驯化克隆的毒株与TorontoCAV-2标准株及我国的强毒株(SY-V5)差异较小,仅1个氨基酸发生变化。
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