【摘 要】
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本研究旨在探讨蓝圆鲹肌肉中脯氨酸内肽酶(PEP)对鱼类胶原肽的降解作用.通过硫酸铵分级沉淀,DEAE-Sephacel阴离子交换层析、Phenyl-Sepharose疏水层析和Q-Sepharose阴离
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本研究旨在探讨蓝圆鲹肌肉中脯氨酸内肽酶(PEP)对鱼类胶原肽的降解作用.通过硫酸铵分级沉淀,DEAE-Sephacel阴离子交换层析、Phenyl-Sepharose疏水层析和Q-Sepharose阴离子交换层析从蓝圆鲹肌肉中分离纯化得到一种脯氨酸内肽酶.SDS-PAGE结果显示其分子质量为82 ku.肽指纹质谱分析得到169个氨基酸残基,与鲷(Neolamprologus brichardi)和斑马鱼(Danio rerio)的PEP序列比对具有高度一致性.将纯化得到的脯氨酸内肽酶与胶原小肽在30℃下反应2h,通过C-18反相柱分离以及电喷雾等离子质谱分析(ESI-MS),证明脯氨酸内肽酶能够降解胶原小肽.以上结果表明,脯氨酸内肽酶通过作用于金属蛋白酶分解产生的胶原肽中的脯氨酸残基,从而达到进一步降解鱼肌肉胶原蛋白的效果.
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