【摘 要】
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应用醛化的鸡红细胞经吸附释放方法获得纯化的新城疫病毒(NDV),经triton X-100处理并反复冻融制备新城疫ELISA抗原.应用抗鸡Ig轻链单抗1B7辣根过氧化物酶结合物建立了定量检测NDV抗体水平的ELISA方法.确立了将鸡血清100倍稀释监测ELISA效价(ET)的回归方程y=0.94128x+0.20677(r=0.98163),可用于定量测定.血凝抑制(HI)抗体与ELISA方法的比
【机 构】
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中国兽药制品监察所(北京) 天津市畜牧兽医研究所(天津)
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会
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应用醛化的鸡红细胞经吸附释放方法获得纯化的新城疫病毒(NDV),经triton X-100处理并反复冻融制备新城疫ELISA抗原.应用抗鸡Ig轻链单抗1B7辣根过氧化物酶结合物建立了定量检测NDV抗体水平的ELISA方法.确立了将鸡血清100倍稀释监测ELISA效价(ET)的回归方程y=0.94128x+0.20677(r=0.98163),可用于定量测定.血凝抑制(HI)抗体与ELISA方法的比较试验表明,ELISA法比血凝抑制试验敏感3倍以上,应用建立的ELISA方法比较了卵黄、气管及胆汁中局部抗体与血清抗体的差异.
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用威兰VD-28、英特威CVI988、梅里亚CVI988、南京中牧公司CVI988和北京兽医生物药品厂814等五种MD疫苗分别经皮下注射免疫1日龄SPF鸡,并选用梅里亚CVI988疫苗进行胚胎免疫和二次免疫试验.所有试验鸡于免疫后21日龄用10稀释的京-1株强毒进行攻击,测得五种疫苗保护率分别为18/20、20/20、19/20、20/20和19/20.各疫苗一次免疫组间保护率虽有差异但都不显著(
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本试验首先用PCR方法扩增出传染性法氏囊(IBDV)株VP2基因,将其克隆到T载体上,并进行了序列的分析.然后将其亚克隆到真核表达载体pcDNA4/His/LacZ中,并将该真核表达载体上的CMV启动子和增强子控制的含LacZ和VP2基因表达盒克隆入pUS2基因中,成功的构建了马立克氏病毒的转移载体.然后,通过脂质体方法转染已感染马立克氏病病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,用96孔板稀释法纯化表达
通过RT-PCR反应扩增了H5N1亚型鹅源禽流感病毒完整的HA基因并进行了克隆与序列分析.扩增的HA基因开放性阅读框架由1707个核苷酸组成,共编码568个氨基酸.HA蛋白裂解位点的氨基酸组成为RKKR↓GLF,含连续的碱性氨基酸,具有高致病性AIV HA基因裂解位点的序列特征.进一步构建了真核表达载体pcDNA-HA,通过与MuLV假病毒构建体系的两种质粒pHIT60和pHIT111共转染转化了
禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒任何一种血清型毒株引起各种家禽及野生禽类感染和/或疾病综合症,其病原为禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV),属于正粘病毒科的A型流感病毒属,病毒基因组由8个分段单股负链RNA组成,编码至少10种病毒蛋白.AIV血清亚型众多,根据其表面血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)抗原不同可分为不同的亚型.研究发现,高致病
采用RT-PCR技术特异地扩增了4株H5N1亚型高致病性禽流感病毒的NS基因,将获得的PCR产物分别与T载体进行连接,获得了4个毒株NS基因阳性克隆.阳性克隆序列分析结果显示分离毒株间核苷酸同源率在90.2~98.7﹪之间,氨基酸同源率在82.6~97.8﹪之间.与其它毒株比较A/Chicken/Heilongjiang/P46/2003和A/Chicken/Heilongjiang/G2/200
1957年曾经发生过H2亚型流感的大流行,未来也有重新暴发的可能性.2001年,在日本北海道,我们从迁徙鸭中分离到4株H2亚型流感病毒.为了确定该分离株的进化特性,我们对其进行了全基因组的序列测定与分析.结果表明Dk/Hokkaido/107/01(H2N3)的PB2基因和Dk/Hokkaido/95/01(H2N2)的PA基因属于美洲分支,而其他基因片断则属于欧亚分支,说明流感病毒的内部蛋白基因
1957年曾经发生过H2亚型流感的大流行,未来也有重新暴发的可能性.2001年,在日本北海道,我们从迁徙鸭中分离到4株H2亚型流感病毒.为了确定该分离株的进化特性,我们对其进行了全基因组的序列测定与分析.结果表明Dk/Hokkaido/107/01(H2N3)的PB2基因和Dk/Hokkaido/95/01(H2N2)的PA基因属于禽流感病毒的美洲分支,而其他的基因片段属于欧亚分支.说明内部蛋白基
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