巴旦杏RAPD-PCR反应体系的正交优化

来源 :第五届全国干果生产与科研进展学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wwchao
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以巴旦杏DNA为模板,利用正交设计,研究了dNTPs、Mg2+、Taq酶、随机引物和DNA模板等5种RAPD反应组分浓度变化对扩增结果的影响。结果表明,正交试验的方法可以较为准确地反映各个因素在不同水平上对RAPD-PCR的影响。本试验研究建立的巴旦杏RAPD-PCR最佳反应体系为:25μl反应体系中,10×Taq Buffer 2.5μl,2.0mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTPs,模板DNA为30ng,随机引物0.8μmol/L,Taq聚合酶1.5U。
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