【摘 要】
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目的建立一种检测呼吸道偏肺病毒逆转录-环介导等温扩增的方法(RT-LAMP)。方法通过对偏肺病毒N基因特异性序列的6个独立的区域设计6条RT-LAMP引物包括2条内引物、2条外引物、
【机 构】
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武汉大学,生命科学学院,病毒学国家重点实验室;
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目的建立一种检测呼吸道偏肺病毒逆转录-环介导等温扩增的方法(RT-LAMP)。方法通过对偏肺病毒N基因特异性序列的6个独立的区域设计6条RT-LAMP引物包括2条内引物、2条外引物、2条环引物,建立RT-LAMP的检测体系,在链置换DNA聚合酶的作用下,在等温65℃一个小时,就可以完成核酸扩增的反应。并对武汉市儿童医院卜7月份120例疑感染者的咽试子同时采用实时荧光RT-PCR和RT-LAMP进行偏肺病毒核酸的检测。结果通过凝胶电泳能观察到RT-LAMP扩增产物的存在即梯状条带,且采用这个体系检测120份咽试子中30份阳性反应和RT-PCR检测结果一致。结论偏肺病毒核酸的RT-LAMP检测方法由于快速、简单、特异、灵敏、成本低,对实验仪器设备要求不高,适用于基层医疗机构临床检测和现场快速诊断。
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