【摘 要】
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目的 研究BMSCs-去上皮细胞羊膜(denuded human amniotic membrane,DHAM)桥接大鼠脊髓横断性损伤断端,促进轴突再生及提高后肢运动功能的作用.方法 取健康产妇正常剖宫产
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第一医院神经外科
【出 处】
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2014全国神经损伤大会暨第三届天坛全国神经创伤学术研讨会
论文部分内容阅读
目的 研究BMSCs-去上皮细胞羊膜(denuded human amniotic membrane,DHAM)桥接大鼠脊髓横断性损伤断端,促进轴突再生及提高后肢运动功能的作用.方法 取健康产妇正常剖宫产术后自愿捐献的羊膜,经联合消化法彻底去除表面上皮细胞制备DHAM,并行HE染色观察.取大鼠骨髓行BMSCs分离、培养,取第4代细胞以PKH26标记后,以1×105个/cm2密度接种于DHAM上制备联合基质(BMSCs-DHAM).倒置相差显微镜和激光共聚焦显微镜观察BMSCs生长状态.另取8周龄雌性Wistar大鼠40只,体重200～220g,制备T9脊髓横断性损伤模型,随机分为4组,每组10只.A、C组分别用BMSCs-DHAM和单纯DHAM包裹脊髓的2个断端, B、 D组分别于脊髓损伤中心注射10μL细胞浓度为1×104个/μL的BMSCs和等量生理盐水.术后12周采用BBB运动评分检测大鼠后肢运动功能恢复情况,行皮层运动诱发电位(motion evoked potential,MEP)测定；生物素化葡聚糖胺(biopinylated dextan amine,BDA)顺行示踪检测及神经丝蛋白200(neuroflament protein 200,NF-200)免疫荧光染色观察.结果 HE染色显示联合消化法成功制备DHAM.镜下观察到BMSCs在DHAM上生长状态良好.术后12周,A组BBB评分达(12.50±1.26)分,明显高于其余各组(P＜0.05).MEP测定显示,A组潜伏期(3.52±2.45)ms及波幅(480.68±18.41)μV,恢复效果优于其余各组(P＜0.05).BDA顺行示踪观察示,A组损伤平面以下BDA通过损伤部位的轴突再生率为54.12％±3.30％,均高于其余各组(P＜0.05)；且A组NF-200免疫荧光染色亦可见大量再生轴突通过损伤部位.结论 BMSCs-DHAM一定程度上提高了脊髓横断性损伤大鼠的后肢运动功能,是一种具有广泛应用前景的基质材料.
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