非受体酪氨酸激酶通过磷酸化调控eEF2和Gα13的功能

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非受体酪氨酸激酶(non-receptor tyrosine kinase)是存在于细胞质中的对其它蛋白进行酪氨酸磷酸化的激酶,其中以Src家族激酶和Abl家族激酶的功能和调控研究的最为深入。非受体酪氨酸激酶能够介导外界从受体酪氨酸激酶RTKs (Receptor Tyrosine Kinases)、G蛋白偶联受体GPCRs (G Protein-Coupled Receptors)和整联蛋白(Integrin)的信号,调控细胞生长、细胞迁移、细胞生存等多种功能。非受体酪氨酸激酶的异常往往会导致癌症的发生,包括细胞过度增殖以及癌症转移。在这里我们研究了两种激酶的作用,非受体酪氨酸激酶Csk (C-terminal Src Kinase)是特异性的通过磷酸化Src从而抑制其活性的激酶。我们发现Csk存在着一种新的底物eEF2,真核翻译延伸因子eEF2 (Eukaryotic Elongation Factor 2)控制着蛋白质的翻译延伸。然而Csk对它的磷酸化对其翻译功能并无影响,却能够促进eEF2的剪切。我们还发现了eEF2存在着另一种类型的修饰,SUMO化修饰,也能够促进eEF2的剪切。这两种修饰导致eEF2形成剪切片段,其中剪切后小片段会在细胞核周边和核内聚集,引起核纤层的异常和异倍体细胞的产生,这往往是癌症发生的标志,而这种作用有可能是通过对自噬的抑制来完成的。因此Csk有可能通过eEF2的剪切导致细胞核的异常。我们还研究了另一种非受体酪氨酸激酶Abl对异源三聚体G蛋白(Heterotrimeric Guanine-Nucleotide-Binding Protein) Gα13功能的影响。Abl能够与Ga13发生相互作用,且在血小板衍生生长因子PDGF(Platelet-Derived Growth Factor)的刺激下共定位于细胞膜背部褶皱和片状伪足上。Abl能够对G-a13进行酪氨酸磷酸化,磷酸化的Gα13定位到细胞质中,但磷酸化对Gα13-RhoA信号通路的激活并没有影响。我们还发现Abl介导着Gα13与另一种维持肌动蛋白纤维稳定的蛋白EPLIN (epithelial protein lost in neoplasm)发生相互作用,并且反过来Ga13还能影响Abl在PDGF刺激下的激活。这些实验数据有助于我们进一步阐述它们在细胞迁移中的重要作用。
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