【摘 要】
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青海血蜱(Haemaphysalis qinghaiensis)及其传播的血液原虫病严重威胁着我国畜牧业的发展。目前对蜱的防治主要以药物防治为主。但随着蜱耐约性的产生以及环境污染和药物残留
【出 处】
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中国农业科学研究院 中国农业科学院
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青海血蜱(Haemaphysalis qinghaiensis)及其传播的血液原虫病严重威胁着我国畜牧业的发展。目前对蜱的防治主要以药物防治为主。但随着蜱耐约性的产生以及环境污染和药物残留等严重公共卫生问题的出现迫使人们寻求防治的新途径。在众多控制蜱的方法中,免疫学防制是前景最诱人的方法。本研究采用两种不同的免疫途径制备了羊抗青海血蜱唾液腺蛋白阳性血清和羊抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清。应用Western Blot方法,将上述两种血清分别与青海血蜱唾液腺蛋白提取物杂交以进行蛋白的差异显示。结果表明羊抗青海血蜱唾液腺蛋白阳性血清能识别青海血蜱唾液腺更多的蛋白带。这些差异蛋白的分子量分别为49kDa、35.8kDa、31kDa和23.5kDa。通过制备性电泳,将所发现的差异条带切取回收并免疫家兔,获得兔抗青海血蜱差异蛋白阳性血清。以半饱血青海血蜱的唾液腺、马氏管和卵巢等器官为材料,构建青海血蜱的cDNA表达文库,库容量约为2×10~6pfu/ml。利用兔抗青海血蜱差异蛋白阳性血清对青海血蜱cDNA表达文库进行免疫学筛选,共获得Hq02、Hq03、Hq04、Hq05和Hq06等5个阳性克隆。经鉴定这5个基因均为青海血蜱所固有的新发现基因,它们的大小依次为1085bp、726bp、617bp、847bp利1178bp。在大肠杆菌中分别对Hq02、Hq04和Hq05基因进行了表达,利用表达产物免疫羊所得阳性血清能与青海血蜱天然蛋白发生免疫学反应。说明表达产物具有良好的免疫原性和反应原性。这为研制青海血蜱的分子疫苗奠定了基础。
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