青海血蜱cDNA表达文库的构建和“隐藏抗原”基因的筛选、克隆与表达

来源 :中国农业科学研究院 中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shen41941395
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
青海血蜱(Haemaphysalis qinghaiensis)及其传播的血液原虫病严重威胁着我国畜牧业的发展。目前对蜱的防治主要以药物防治为主。但随着蜱耐约性的产生以及环境污染和药物残留等严重公共卫生问题的出现迫使人们寻求防治的新途径。在众多控制蜱的方法中,免疫学防制是前景最诱人的方法。本研究采用两种不同的免疫途径制备了羊抗青海血蜱唾液腺蛋白阳性血清和羊抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清。应用Western Blot方法,将上述两种血清分别与青海血蜱唾液腺蛋白提取物杂交以进行蛋白的差异显示。结果表明羊抗青海血蜱唾液腺蛋白阳性血清能识别青海血蜱唾液腺更多的蛋白带。这些差异蛋白的分子量分别为49kDa、35.8kDa、31kDa和23.5kDa。通过制备性电泳,将所发现的差异条带切取回收并免疫家兔,获得兔抗青海血蜱差异蛋白阳性血清。以半饱血青海血蜱的唾液腺、马氏管和卵巢等器官为材料,构建青海血蜱的cDNA表达文库,库容量约为2×10~6pfu/ml。利用兔抗青海血蜱差异蛋白阳性血清对青海血蜱cDNA表达文库进行免疫学筛选,共获得Hq02、Hq03、Hq04、Hq05和Hq06等5个阳性克隆。经鉴定这5个基因均为青海血蜱所固有的新发现基因,它们的大小依次为1085bp、726bp、617bp、847bp利1178bp。在大肠杆菌中分别对Hq02、Hq04和Hq05基因进行了表达,利用表达产物免疫羊所得阳性血清能与青海血蜱天然蛋白发生免疫学反应。说明表达产物具有良好的免疫原性和反应原性。这为研制青海血蜱的分子疫苗奠定了基础。
其他文献
体育课堂是学生们在日常教室内学习之外的,可以接触室外的课程.体育是通过体育老师的带领,师生互动,掌握身体练习方式.传统的体育教学针对体能上的训练,而忽视了理论上的教育
《红楼梦》的悲剧描写,是从“大观园”开始的.“大观园”是贾府为元妃建的“省亲别墅”,是家族荣华富贵的象征,也是演绎《红楼梦》“千红”、“万艳”社会人生悲剧的艺术舞台
在高中教学工作中,数学是一门难度极高也十分重要的科目,传统的教学方式逐渐不能满足教学的需求,而随着网络技术、多媒体技术等技术手段被应用到教育工作中,高中数学课程也逐
在5,10,15,20-四苯基卟啉及其金属配合物的β位引入阳离子型修饰基团溴化吡啶鎓盐,得到β-[2-(6-吡啶溴化盐)己氧基]萘基-5,10,15,20-四苯基卟啉及其Cu(II),Ni(II),Zn(II)配
现阶段我国的科技迅猛发展带动了教育业的不断发展,而高中历史教学改革在整个高中教学改革过程中也是极其重要的.高中历史作为一门必考科目,其知识点较多且杂乱零散,这使得很
国外选别重金属矿石和砂矿时,广泛应用矿物资源有限公司制造的理查特螺旋选矿机和圆锥选矿机。该公司制造四种槽体断面形状(决定螺旋选矿机的应用范围和适宜的条件)不同的螺
在高段语文教学中,锻炼学生的语言能力、写作能力、阅读能力是语文教师教学最终教学目标,其中,阅读能力的获取途径包括语文教科书阅读与课外阅读.在应试教育影响下,目前教师
在新课改的背景下,对初中政治教学提出了新的要求.在传统的政治教学中,教师大多要求学生进行死记硬背,对学生进行填鸭式的教学,这样不利于培养学生的综合能力和提高学生的政
语文写作是小学生最难解决的问题,也是语文教师在教学过程中的一个重要问题.写作是一项全面的培训,学生可以写作和写作,使用文字来制作句子,选择材料和构建,以及思考逻辑.最
初中物理教学非常重视学生基础知识的整合,要求教师将教学方法与教材内容结构联系起来.只有从正确的角度出发,才能激发学生的学习热情,鼓励他们认识到物理学的重要意义.科学