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本论文以泌乳奶牛乳腺组织为原料,采用组织块培养技术,研究培养基内不同氨基酸模式对奶牛乳腺上皮细胞的增殖、α-酪蛋白合成、激素(IGF-I、GH、PRL)和甘油三酯(TG)分泌以及脂肪代谢合成关键酶(FAS、ME、G-6-PDH)活性的影响。试验结果如下:(1)利用氨基酸平衡指数调整三种氨基酸(Met、Lys、Leu)比例设计不同氨基酸指数的试验组(共6个组),采用组织培养法体外培养乳腺组织15天。结果表明:随着培养天数的增加,细胞数量逐渐增加,第十天各组细胞数量分别达到最高,乳腺上皮细胞生长曲线呈“S”形。不同氨基酸模式对乳腺细胞生长有显著影响,与氨基酸不平衡组相比,氨基酸平衡、理想组更能促进细胞生长,各组间差异显著(P<0.05)。(2)第九、十天分别取样,采用SDS-PAGE和ELISA法测α-酪蛋白分泌量。结果表明:培养生成的乳腺上皮细胞,具有正常分泌乳蛋白功能;且不同氨基酸模式对乳腺细胞α-酪蛋白分泌有显著影响,试验组比对照组高,其中第Ⅰ组最高,且各组间差异显著(P<0.05)。这表明培养基内不同氨基酸模式可以影响乳腺上皮细胞的数量,进而调控乳蛋白的合成。(3)第九、十天分别取样,采用放免法测激素分泌量。试验表明:不同氨基酸模式下,乳腺上皮细胞可分泌IGF-I、GH、PRL三种激素;且对三种激素分泌量影响差异显著(P<0.05),其中第Ⅴ组为最高且显著高于其它组,这表明激素的合成与分泌受培养基内不同氨基酸模式的调控,进而说明培养基内氨基酸平衡状态可以直接影响激素的合成与分泌。(4)第九、十天分别取样,采用直接连续监测法酶活测定技术测定脂肪代谢合成关键酶的活性。试验发现:不同氨基酸模式对乳腺细胞培养物中脂肪代谢合成关键酶(FAS、ME、G-6-PDH)活性和甘油三酯(TG)分泌产生了显著影响,通过提高脂肪代谢合成关键酶的活性,提高了甘油三酯的分泌进而促进脂肪的合成。综上所述:在培养基内不同氨基酸模式作用下,乳腺上皮细胞数量在第九天或第十天达到最多,同时激素(IGF-I、GH、PRL)和甘油三酯(TG)分泌量、α-酪蛋白合成量最高以及脂肪代谢合成关键酶(FAS、ME、G-6-PDH)活性最强。培养基内不同氨基酸模式不仅影响α-酪蛋白的合成,还提高脂肪代谢合成关键酶的活性,提高了甘油三酯的分泌进而促进脂肪的合成。氨基酸是乳蛋白合成的主要前体物质,在乳成分前体物中起着核心作用,但只有与其它两种前体物数量充足、比例适当时才能达到最好效果,乳腺内营养物质的代谢具有协同和整体效应。