【摘 要】
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目的:探究CD300c是否能促进齿龈间充质干细胞（Gingival mesenchymal stem cells,GMSC）对胶原诱导的关节炎（Collagen induced arthritis,CIA）小鼠的治疗作用,并探讨相关作用机制。方法:用携带CD300C基因的过表达慢病毒载体成功转染GMSC,获得过表达CD300c蛋白的GMSC。选用DBA/1J小鼠,将模型小鼠分为4组,分别为PBS组
【基金项目】
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国家重点研究与发展项目[NO.2017Yfa0105802]； 国家自然科学基金[NO.31600793&81571832]；
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目的:探究CD300c是否能促进齿龈间充质干细胞（Gingival mesenchymal stem cells,GMSC）对胶原诱导的关节炎（Collagen induced arthritis,CIA）小鼠的治疗作用,并探讨相关作用机制。方法:用携带CD300C基因的过表达慢病毒载体成功转染GMSC,获得过表达CD300c蛋白的GMSC。选用DBA/1J小鼠,将模型小鼠分为4组,分别为PBS组、GMSC组、GMSC-LV-CON组和GMSC-LV-CD300c组。免疫第0天皮内注射Ⅱ型胶原与弗氏完全佐剂混合乳液进行首次免疫,免疫第21天皮内注射Ⅱ型胶原与弗氏不完全佐剂混合乳液进行再次免疫,从而构建胶原诱导的关节炎小鼠模型。记录小鼠足爪厚度并进行关节评分。免疫第21天,各组小鼠分别用PBS、GMSC、GMSC-LV-CON和GMSC-LV-CD300c单次尾静脉注射进行治疗。免疫第56天,处死小鼠,Micro-CT检测小鼠足爪关节骨密度,HE染色法检测小鼠脾脏病理变化,流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4+T细胞及其亚群Th1、Th17和Treg百分比,酶联免疫吸附实验检测小鼠血清中相关促炎因子（TNF-α和IL-17A）和抑炎因子（IL-10）含量,蛋白免疫印迹法检测IL-17RA/Act1/NF-κB信号通路主要蛋白表达量。结果:与PBS组相比,实验组均有明显改善,尤其是GMSC-LV-CD300c组。结果显示,实验组关节骨密度增加;脾脏病理程度减轻;脾脏中CD4+T、Th1和Th17的百分比降低,Treg的百分比增加;此外,血清中TNF-α和IL-17A水平降低,而IL-10水平升高;IL-17RA/Act1/NF-κB信号通路主要蛋白IL-17RA、Act1、NF-κB p65和NF-κB p50表达降低。结论:我们首次证明了GMSC联合CD300c治疗类风湿性关节炎的疗效。CD300c促进了GMSC对CIA模型的免疫抑制作用,这可能是通过竞争性抑制CD4+T细胞对滑膜细胞、软骨细胞的破坏,调节Th1、Th17和Treg细胞百分比及其细胞因子含量,以及抑制IL-17RA/Act1/NF-κB相关的炎症通路来发挥作用。
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