丁香酚和反式肉桂醛干扰致倦库蚊的吸血行为研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xtzzll
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致倦库蚊(Culex pipiens quinquefasciatus)是传播黄热病、疟疾、鼠疫的重要媒介昆虫,严重威胁着人类的身体健康。控制致倦库蚊的数量是一项系统工程,寻找安全的蚊虫防控剂,对其进行开发与利用是防控蚊虫的重要环节。目前,一些防蚊药剂使用时间长,剂量较大,蚊虫已产生严重的抗药性,并且防蚊药剂常常与人体直接接触或施用在家居环境中,以及对室内环境污染,残留毒性等问题,引起人们对卫生防治用药安全性的关注。植物精油具有延缓抗性,低毒,可再生,残留低等优点,成为筛选蚊虫防控剂的重要方向。本论文以致倦库蚊为研究对象,评价了12种精油单体化合物对致倦库蚊的熏蒸活性基础上,进一步研究丁香酚和反式肉桂醛对致倦库蚊击倒活性及行为调控机理,为其应用于致倦库蚊的防治提供理论依据。主要研究结果如下:1、采用三角瓶密闭熏蒸法浓度为24.20μL/L测定了柠檬醛、反式肉桂醛、樟脑、松油醇、丁香酚、柠檬烯、芳樟醇、桉叶素、香芹酮、香茅醇、对伞花烃、γ-松油烯等12种植物精油单体对致倦库蚊成蚊的熏蒸击倒致死活性,KT50分别为40.73、13.67、8.00、7.54、6.43、7.00、5.74、4.41、3.39、13.38、4.21和4.92 min:对致倦库蚊成蚊致死活性较好的香芹酮、丁香酚、芳樟醇、香茅醇、松油醇和反式肉桂醛筛选结果表明,浓度为3μL/L时,6小时熏蒸致死率为86.7%、100%、84.4%、93.8%、100%、100%。丁香酚和反式肉桂醛显示出较好的致死活性。进一步进行系列浓度梯度毒力测定表明,丁香酚和反式肉桂醛对致倦库蚊的LC50分别为0.66μL/L和0.24μL/L。2、采用先精油熏蒸后吸血的方法,测定丁香酚和反式肉桂醛对致倦库蚊吸血率的影响,以丁香酚和反式肉桂醛的LC25(0.46μl/L和0.19μl/L)剂量熏蒸致倦库蚊,死亡率分别为25.66%和23.33%,吸血抑制率分别为87.62%和70.47%,平均每只蚊虫产卵抑制率分别为4.79%和7.21%,卵孵化抑制率分别为-4.79%和4.65%。采用先吸血后精油熏蒸的方法,测定精油对致倦库蚊产卵率的影响,以丁香酚和反式肉桂醛的LC25(0.459μl/L和0.191μl/L)剂量熏蒸致倦库蚊后,死亡率分别为21.67%和23.33%,产卵抑制率分别为11.86%和13.98%,卵孵化抑制率分别为3.60%和2.83%。3、采用精油驱避实验(国标)方法,测定丁香酚和反式肉桂醛浓度为2.20μg/cm~3对致倦库蚊驱避活性结果表明:丁香酚和反式肉桂醛的有效保护时间为60min和150min,致倦库蚊经过丁香酚和反式肉桂醛LC25(0.46μl/L和0.19μl/L)熏蒸处理后第48h吸血抑制率分别为67.25%和63.92%。4、采用EAG测定丁香酚和反式肉桂醛对致倦库蚊触角电位的影响。结果表明,丁香酚和反式肉桂醛对致倦库蚊的触角电位的影响均不明显,不存在剂量的相关性。5、采用三角瓶密闭熏蒸法处理致倦库蚊,用分光光度法测定其体内线粒体呼吸链复合体Ⅰ(NADH-Co Q还原酶)、Ⅱ(琥珀酸脱氢酶)、Ⅲ(细胞色素c还原酶)、Ⅳ(细胞色素c氧化酶)和Ⅴ(ATP合酶)的活性。进一步探讨丁香酚和反式肉桂醛对致倦库蚊熏蒸作用和行为调控机理。结果表明:丁香酚(0.46(?)l/L)对致倦库蚊线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ酶的活性为对照组106.46%、159.69%、146.38%、335.09%和197.32%。反式肉桂醛(0.19(?)l/L)对线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ酶的活性为对照组的90.73%、106.51%、119.82%、343.46%和122.20%。6、采用三角瓶密闭熏蒸法处理致倦库蚊,用分光光度法测定其体内ATP酶,超氧化物气化酶,ATP含量,从生化水平探讨丁香酚和反式肉桂醛对致倦库蚊的熏蒸作用和行为调控机理。结果表明:丁香酚(0.46μl/L)对致倦库蚊Na+/K+-ATPase活性抑制率为35.95%,Ca2+-ATPase抑制率为33.22%,ATP含量提高了216.24%。反式肉桂醛(0.19μl/L)对致倦库蚊Na+/K+-ATPase活性抑制率为21.98%,Ca2+-ATPase抑制率为24.96%,ATP含量提高了208.36%。
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