【摘 要】
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血管内皮细胞参与血管形成、血管稳态维持、血栓形成、炎症和血管重建等生理和病理过程。血管内皮细胞在血管功能控制方面扮演了重要角色,对血管自身稳定起主要调控作用。
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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血管内皮细胞参与血管形成、血管稳态维持、血栓形成、炎症和血管重建等生理和病理过程。血管内皮细胞在血管功能控制方面扮演了重要角色,对血管自身稳定起主要调控作用。
为了便于通过Cre/LoxP系统研究相关基因在血管内皮细胞中的功能,本文创建了Tie2-Cre转基因小鼠,利用血管内皮细胞特异性表达的Tie2基因的启动子和增强子驱动Cre重组酶基因在血管内皮细胞中表达。通过显微注射的方法将15.9kb的转基因片段Tie2-Cre引入小鼠受精卵,获得子代小鼠57只,经基因型鉴定有6只小鼠在基因组上整合有Tie2-Cre基因,整合率为11%。通过多组织的RT-PCR证实在所有组织都能检测到Cre重组酶的转录。为了验证Cre重组酶在转基因小鼠中表达的细胞分布及其在体内介导重组的功能,将Tie2-Cre转基因小鼠分别与Smad4条件基因打靶小鼠和ROSA26转基因小鼠交配。Tie2-Cre;Smad4Co/+小鼠的多组织基因组DNA的PCR结果显示Cre重组酶在所有包含血管内皮细胞的组织中表达并能介导LoxP间的重组。对Tie2-Cre;ROSA26双转基因胚胎进行LacZ染色的结果显示,Cre重组酶在所有被检测组织的血管内皮细胞中特异性表达。
所有这些结果证实,Tie2-Cre转基因小鼠可作为血管内皮细胞谱系分析和在血管内皮细胞进行条件基因打靶的理想工具小鼠。
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