乙烯反应元件结合蛋白ERF是P2/ERFEBP转录因子家族中的一个亚族,该类转录因子都拥有一个由约60个氨基酸组成的保守的AP2/EREBP结构域。ERF在植物生活史中具有调节生长发育、细胞分化、响应多种激素和逆境胁迫等重要功能。在获得橡胶树胶乳7个编码ERF基因全长cDNA序列信息的基础上,本研究成功克隆了这7个基因的全长cDNA序列和DNA序列,并对部分基因的结构特征、表达特征、原核表达及其生化特征、蛋白互作等进行了深入研究。主要内容及结果如下：1、成功克隆了橡胶树HbERF1-7基因的全长cDNA和DNA序列。测序结果表明,HbERF1-2.5-7基因的全长cDNA和DNA序列一致,说明这5个基因序列不含有内含子；HbERF3和HbERF4基因的全长cDNA编码区分别为777bp和1158bp,其对应的DNA序列分别为918bp和2627bp。分析结果表明,HbERF3和HbERF4基因分别含有一个内含子,大小为141bp和1472bp。结构分析表明,HbER1-7都具有典型的AP2/ERF结构域,与蓖麻(Ricinus communis)、毛果杨(Populus trichocarpa)、葡萄(Vitis vinifera)和番茄(Solanum lyopersicum)等高等植物中相对应的ERF蛋白的同源性在49%-87%之间。与拟南芥18个ERF成员进行聚类分析,将HbERF1、HbERF5和HbERF6归入B1簇,HbERF2归入B4簇,HbERF3和HbERF4归入B2簇,HbERF7归入B6簇。2、克隆了HbERF3转录起始位点5’上游1572bp的调控序列。分析发现,该序列具有典型的真核生物核心启动子区,并且在转录起始位点上游包含ABRE、ARR1AT.CGTCA-motif、MYCCONSENSUSAT.WRKY71OS在内的多种与激素、胁迫应答以及生长发育调控相关的顺式作用元件。3、分析了HbERF1-5在橡胶树不同组织以及叶片在不同激素(JA.SA.ABA.ET)处理下的表达情况。结果显示,HbERF1,HbERF3和HbERF4在叶片中表达量最高,其中HbERF3在胶乳中表达量与叶片基本一致,HbERF2在树皮中表达量最高,HbERF5在根中表达量最高；JA和SA处理,大部分基因的表达都呈现先升高后降低的趋势,而ABA和ET处理,基因的表达多表现为升高后继续维持较高的表达量。4、构建了HbERF1-7基因的原核表达载体pGEX-HbERF1-7,利用大肠杆菌成功获得了HbERF1/2/5/7目的蛋白；成功构建了3个植物过量表达载体pCAMBIA1304-HbERFY5/6/7,并获得了经PCR鉴定的15个株系的转基因烟草植株,相关的生理检测及功能鉴定工作正在进行之中。5、构建了pGBKT7-HbERF1/2/4/5/7酵母双杂交诱饵载体,载体自激活检测证实,这5个载体均不具有自身转录激活活性,可用于酵母双杂交筛选互作蛋白。利用酵母双杂交技术,对HbERF5的互作蛋白进行了筛选,成功筛选到能与HbERF5转录因子互作的蛋白——橡胶延伸因子(REF)、一种胶乳中富集的蛋白和AP2的α亚基。