新霉素是由费氏链霉菌产生的一类氨基糖苷类抗生素,主要作用于革兰氏阴性菌,对部分革兰氏阳性菌也有效。本品具有抗菌活性强、作用范围广、理化性质稳定、口服给药不易吸收等特点。但因其存在耳毒性和肾毒性,注射给药易造成肾脏损伤和听力不可逆性损害,因此兽医临床使用常以胃肠道给药为主,主要用于治疗敏感菌引起的动物细菌性肠胃炎和泌尿系统感染,亦用于耳细菌性感染和奶牛乳腺炎的治疗。在食品动物中使用新霉素不可避免会导致动物可食性组织中出现新霉素药物残留,但尚无关于牛可食性组织和牛奶中的新霉素残留量的检测方法。本研究目的在于开发一种高效便捷、灵敏特异的牛可食性组织和奶中新霉素残留量的HPLC-MS/MS检测方法,为牛可食性组织和奶中新霉素的残留监控提供必要的技术支持,这对保障消费者的食品安全、保护我国动物源性食品进出口正常贸易均具有重要的现实意义。本试验建立了牛可食性组织和奶中新霉素残留量的HPLC/MS-MS检测方法。牛肌肉、肝脏、肾脏、脂肪等可食性组织和牛奶中的新霉素残留使用磷酸盐缓冲溶液提取,提取液经蛋白沉淀,经PCX 阳离子SPE小柱净化洗脱,氮吹近干后用1%七氟丁酸醋酸溶液复溶,经HPLC-MS/MS法检测,外标法定量。待测物用0.1%甲酸水（含2 mM乙酸铵）溶液和0.1%甲酸乙腈作为流动相经BEH-C8色谱柱梯度洗脱分离;质谱条件为电喷雾离子源（ESI）,正离子扫描模式,多反应监测（MRM）。基质匹配标准曲线研究结果显示,牛可食性组织和奶中新霉素B添加浓度在20～1000 μg/kg范围内时,可食性组织和牛奶中添加浓度与目标峰面积呈良好线性关系,相关系数均大于0.999;本方法最低检测限为10 μg/kg,最低定量限为20 μg/kg。牛肌肉在20、250、500、1000 μg/kg添加浓度下,新霉素B平均回收率为80.85%～104.19%。牛脂肪在20、250、500、1000 μg/kg添加浓度水平下,平均回收率为60.18%～92.86%;牛肝脏在20、2750、5500、11000 μg/kg添加浓度水平下,平均回收率为60.52%～81.20%;牛肾脏在20、4500、9000、18000 μg/kg添加浓度水平下,平均回收率为75.85%～96.57%;牛奶在20、750、1500、3000 μg/kg添加浓度范围下,平均回收率为62.22%～86.72%。批内变异系数（RSD）均在1.29%～10.43%范围内,批间变异系数（RSD）均在3.33%～8.58%范围内。本试验建立了牛可食性组织和牛奶中新霉素残留量检测的制样和HPLC-MS/MS测定方法,所建立的新霉素标志残留物新霉素残留量的HPLC-MS/MS检测方法适用于牛可食性组织和牛奶中新霉素标志残留物新霉素B的残留量测定。