葱白超临界CO2萃取物化学成分及黄酮的含量研究

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葱白为是百合科(Liliaceae)葱属(Allium)植物小葱(Allium fisturosum L. var. caespitosum Makio)的新鲜鱗茎,原产于亚洲西部,我国南方广泛地栽培,作为人们日常食用的蔬菜及调味品,同时也是临床防病治病的中医良药。小葱具有发表解肌、利肺通阳、解毒消肿之功效。其葱白超临界CO2萃取物(搏心通原料药)具有很好的降血脂活性,为了阐明其降脂的物质基础,本课题对葱白超临界CO2萃取物的化学成分及其含量进行了一系列的研究。通过硅胶柱溶剂梯度洗脱,自小葱葱白超临界CO2萃取物中获得了7个化学部位,对其中的4个部位采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备色谱等分离方法,分离得到7个单体化合物,应用UV、MS、1H-NMR,13C-NMR、HPLC-MS等波谱学分析方法,鉴定了其中5个化合物的化学结构,分别为β-谷甾醇(Ⅰ)、儿茶素(Ⅳ)、表儿茶素(Ⅴ)、紫云英苷(Ⅵ)、山柰酚-3-O-β-D-(2-O-β-D-葡萄吡喃糖基)-葡萄吡喃糖苷(Ⅶ)。另2个化合物的结构尚在鉴定之中。已鉴定的5个化合物,均为首次从该植物中分离得到。通过硅胶柱溶剂梯度洗脱,自小葱葱白和葱叶超临界CO2萃取物分别得到7个化学部位(A-G),利用气相色谱-质谱联用的分析方法,对其中的后3个化学部位(E-G)的化学成分进行定性和定量的比较分析得出:二者成分类型基本一致,都具有烷烃、烯烃、醛酮类化合物、酯类、甾体类化合物和含氮类化合物,但在含量上存在显著性差异。甾体类化合物是葱白超临界CO2萃取物中的特征性成分,葱叶超临界CO2萃取物中高级不饱和脂肪酸的含量略高于葱白超临界CO2萃取物中的。在对葱白超临界CO2萃取物的化学成分分离和鉴定的基础上,以山柰酚为对照品,采用三氯化铝比色法,建立了小葱葱白和葱叶超临界CO2萃取物中的总黄酮含量测定方法,结果表明:所建立的含量测定方法精密度、重现性、稳定性良好,加样回收率在98.4%-104.4%之间,RSD=2.32%,葱白超临界CO2萃取物中总黄酮的平均含量为0.912%,葱叶CO2提取物中总黄酮的平均含量为0.758%。又同时采用高效液相色谱法(HPLC)对二者中的山柰酚和槲皮素的进行了定量分析,结果表明:该方法精密度、重现性、稳定性良好,加样回收率在97.43%-104.18%之间,RSD<3%,葱白超临界CO2萃取物中山柰酚和槲皮素含量分别为0.154%和0.120%,葱叶超临界CO2萃取物中山柰酚和槲皮素含量分别为0.117%和0.103%。
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