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组织粘合剂是以生物组织为粘合对象,在液体或血液中进行,无毒性、无危害性及对人体适应性优良,在平稳的条件下瞬间完成粘接,操作方便,与生物组织结合牢固,不妨碍生物体的自身修复,并具有杀菌可能的材料。目前最常用的组织粘合剂是氰基丙烯酸正辛酯粘合剂和纤维蛋白粘合剂,均是适合于粘接皮肤、脏器、神经、肌肉、血管、粘膜的软组织粘合剂,具有良好的生物相容性、有止血作用、可完全降解代谢,广泛应用在肝脾外科、心血管外科、神经外科、耳鼻喉科、口腔颌面外科和烧伤科,眼科应用还比较少。 在眼科关于组织粘合剂应用的文献报道较少,尚没有组织粘合剂应用于眼表对眼组织的生物相容性的报道。本课题拟研究组织粘合剂应用于眼表对眼组织的生物相容性,在此基础上探讨组织粘合剂行无缝线羊膜移植和无缝线板层角膜移植手术的可行性以及评价组织粘合剂治疗兔角膜溃疡的效果。本研究为组织粘合剂在眼科的应用提供了实验基础,也为眼科手术的进步和新手术的开展提供了新的思路。组织粘合剂在眼科将具有广阔的应用前景。 第一部分 组织粘合剂眼表应用对眼组织反应的实验研究 目的 研究氰基丙烯酸正辛酯粘合剂(CA)、纤维蛋白粘合剂(FS) 用于眼表对眼组织的刺激性、毒性及病理学改变。 方法 新西兰白兔48只,随机均分为CA组,FS组,碱烧伤组(阳性对照),正常组(阴性对照),每组又均分为不刮除(Ⅰ组)和刮除角膜上皮(Ⅱ组)两个小组,以双眼为实验眼。在CA组(Ⅰ、Ⅱ)角膜重庆医科大学硕士研究生学位论文 3及球结膜表面均匀涂薄层CA; FS组(Ⅰ、Ⅱ)涂薄层FS;阳性对照组(Ⅰ、Ⅱ),以浸有0.5mol/L NaOH溶液直径22mm的圆形滤纸放于角膜及球结膜表面20s;阴性对照组(Ⅰ、Ⅱ)不做处理。术后每日裂隙灯观察眼前段反应,1d、7d测房水蛋白;光镜、电镜查角膜、晶体、视网膜的改变。TUNEL法检测晶体前囊膜上皮、视网膜的细胞凋亡情况。结果 CA组、FS组兔眼无明显刺激性反应;CA组、FS组术后1d、7d的房水蛋白,与阴性对照组比较无显著性差异(P > 0.05),与阳性对照组比较有显著性差异(P < 0.0001)。CA组、FS组角膜、晶体前囊膜上皮、视网膜的光镜、电镜观察未见异常,未检测到晶体前囊膜上皮和视网膜的凋亡细胞。阳性对照组有明显组织病理改变并检测到凋亡的晶体前囊膜上皮细胞、视网膜神经节细胞。结论 CA、FS具有良好的眼组织生物相容性,用于眼表不引起眼组织的刺激性、毒性及病理学改变。 第二部分 组织粘合剂行无缝线羊膜移植治疗角膜碱烧伤的实验研究目的 探讨氰基丙烯酸正辛酯粘合剂和纤维蛋白粘合剂行无缝线羊膜移植(AMT)治疗角膜碱烧伤的可行性及效果。方法 48 只新西兰白兔制作角膜碱烧伤模型,随机均分为三个羊膜移植组(CA 组、FS 组、缝线组)和一个单纯碱烧伤组。CA 组和 FS组分别用 CA、FS 粘贴羊膜于角膜创面,缝线组用 10-0 尼龙线缝合固定羊膜,单纯碱烧伤组不移植羊膜。术后观察羊膜植片溶解吸收脱落和角膜病变转归情况,14、30、60、90d 取角膜做光镜和透射电镜检查 。结果 术后 14d, CA 组羊膜植片无脱落, FS 组、缝线组各有 2眼脱落,羊膜紧贴角膜创面,CA 无降解,FS 开始降解;术后 30d, CA组、FS 组羊膜植片基本溶解,缝线组周边残留少部分羊膜,CA 开始降重庆医科大学硕士研究生学位论文 4解,FS 完全降解,CA 在 60d 完全降解。术后 90d,CA 组、FS 组角膜透明,新生血管 (CNV)完全消退;缝线组角膜中央透明,周边残留极少量 CNV;对照组角膜中央形成 CNV 性白斑。CA 组、FS 组、缝线组角膜显微结构和超微结构明显好于对照组。 结论 组织粘合剂行无缝线缝线羊膜移植治疗角膜碱烧伤可行的。组织粘合剂组效果都优于缝线组。组织粘合剂和羊膜移植的协同作用,可以减轻角膜急性碱烧伤的炎症反应,阻止眼表的进行性溃烂和融解,加速眼表的稳定,促进创面愈合,抑制角膜瘢痕和新生血管形成。 第三部分 氰基丙烯酸正辛酯粘合剂行无缝线板层角膜移植实验研究目的: 探讨氰基丙烯酸正辛酯粘合剂行无缝线板层角膜移植术的可行性。方法: 12 只健康新西兰白兔,以右眼作为手术眼,制作 7mm 板层角膜植床。另取 6 只健康新西兰白兔提供 12 只 7.5mm 异体板层角膜植片。用氰基丙烯酸正辛酯粘合剂将角膜植片粘贴在植床上。术后裂隙灯显微镜观察角膜植片透明度、排斥反应和角膜创伤的愈合情况,术后 14、30、60、90d,取角膜标本进行光镜和透射电镜观察。结果: 12只眼角膜植片全部在位,无感染、无脱落。角膜透明、无新生血管、无排斥反应,植床边缘形成一圈较薄的云翳。组织病理观察,术后30d植片植床层间少量炎症细胞浸润、角膜上皮细胞、内皮细胞形态结构无异常,植床边缘层间有CA;术后90d,植床边缘CA完全降解消失,胶原纤维排列规则整齐。透射电镜观察角膜成纤维细胞超微结构未见异常。结论: 氰基丙烯酸正辛酯粘合剂行无缝线板层角膜移植术是完