小反刍兽疫（Peste des petitsruminants,PPR）是由小反刍兽疫病毒引起小反刍动物（山羊或绵羊）的急性、热性、高度接触性传染病。山羊最易感,患病的山羊主要有:发热、眼鼻分泌物增加、肺炎及腹泻等临床表现。研究表明,PPRV感染宿主后会抑制宿主早期免疫应答,并产生炎症反应。N蛋白是PPRV在感染时表达量最高的免疫原性蛋白,在调节机体的免疫反应方面有着重要的作用。PBMCs是一种免疫细胞,主要包括淋巴细胞（T细胞、B细胞）、单核细胞、树突状细胞,在宿主免疫调节和在病原识别中发挥着重要作用,也可参与宿主的早期免疫应答。目前关于PPRV和N蛋白在体外与山羊PBMCs作用的研究较少。因此,本研究首先对PPRVN蛋白原核表达并纯化,利用重组N蛋白为抗原制备了N蛋白兔多克隆抗体。然后采用PPRV及N蛋白刺激PBMCs,证实PPRV感染PBMCs并在细胞中增殖和复制,通过CCK-8、qRT-PCR、ELISA、流式细胞术等技术分别对细胞因子、表面标记物、细胞增殖及NO释放的评价,检测PPRV及N蛋白对PBMCs的免疫应答效应的影响。本试验为研究PPRV与宿主细胞的相互作用提供理论依据,也为PPRV感染宿主的免疫应答及致病机理奠定基础。通过上述内容,取得以下结论:1、成功构建并表达纯化小反刍兽疫病毒重组N蛋白,并制备了效价较高的N蛋白多克隆抗体。2、成功分离纯度较高的山羊PBMCs,证实PPRV在体外能够感染PBMCs并且在细胞内增殖与复制。PPRV感染后明显抑制PBMCs的增殖。PPRV感染可诱导PBMCs中IL-1β、IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α等mRNA的表达,以及细胞培养上清中IL-1β、IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α等的蛋白分泌。还可促进PBMCs表面标记物CD4、CD8、CD40、CD86、CD80的表达,参与细胞免疫反应。3、此外,PPRV感染PBMCs还能增强NO的释放,促炎性细胞因子介导了 NO产生。4、PPRV重组N蛋白对PBMCs的增殖不仅有明显的抑制作用,还能增加NO的释放。N蛋白刺激PBMCs可诱导IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α等mRNA的表达,并且能够促进细胞上清中细胞因子的蛋白分泌,这与N蛋白在病毒复制过程中发挥的作用有关。还可促进表面标记物CD4、CD8、CD40、CD86、CD80的表达,参与机体的免疫反应。总之,本研究对了解PPRV及N蛋白与宿主细胞的互作关系及免疫效应奠定了基础,为PPRV的防治及疫苗的研发提供了新的思路。