BLM解旋酶属于RecQ解旋酶家族中重要成员之一,在DNA复制、修复重组及端粒稳定有重要的作用,人BLM基因突变易患布鲁氏综合症,常见于多种恶性肿瘤,如肺癌、白血病、前列腺癌。本课题组前期研究证实人BLM基因与前列腺癌易感性相关,可作为治疗前列腺癌的候选基因。LncRNA在癌细胞中的异常表达易引发癌症的发生和发展。本研究以不同株系前列腺癌细胞（LNCaP、22RV-1）和正常前列腺基质成纤维细胞（WPMY-1）为研究对象,通过qRT-PCR、分子克隆、细胞培养、细胞转染、细胞增殖、划痕实验、Western blot等技术,筛选和鉴定与BLM基因相关的LncRNA BLNC203和BLNC246基因,检测在mRNA水平BLM、BLNC203、BLNC246的表达水平,在蛋白水平检测相关基因BLM的表达差异。解析在LncRNA的调控下前列腺癌细胞的增殖效应的研究,为进一步研究以BLM解旋酶基因为抗癌靶标药物及早期诊断治疗提供基础科学依据,主要研究结果如下:1.人BLM基因相关LncRNAs的筛选及其在不同细胞中的表达分析通过在线网站NCBI、miRBase、NONCODE（http://www.noncode.org/）及对BLM相关LncRNAs进行筛选鉴定。结果筛选出与BLM相关的LncRNAs（NONHSAT203515.1 BLNC203）（NONHSAT246735.1 BLNC246）,BLNC203长为862 bp,位于5号染色体上;BLNC246长为375 bp位于3号染色体上。两者含有二级结构和开放阅读框。在不同细胞中qRT-PCR结果显示;以正常人的前列腺基质成纤维细胞（WPMY-1）为对照组,BLM在LNCaP、22RV-1细胞中都低于正常细胞,在LNCaP细胞中是极显著低于正常细胞（P<0.01）;在22RV-1细胞中是显著低于正常细胞（P<0.05）,BLNC203在22RV-1细胞中的表达量都极显著高于正常细胞（P<0.01）,在LNCaP细胞中不显著（P>0.05）。BLNC246在LNCaP细胞中表达量都极显著低于正常细胞（P<0.01）,在22RV-1细胞中不显著（P>0.05）。推测两基因可能在不同细胞中存在不同的表达现象。2.超表达BLNC203、BLNC246对相关基因BLM的影响构建真核表达载体pcDNA3.1（+）-BLNC203和pcDNA3.1（+）-BLNC246转染至不同株系前列腺癌细胞和正常前列腺细胞中,利用qRT-PCR和Western blot技术检测相关基因BLM的表达水平。结果显示:在mRNA水平,正常细胞WPMY-1中空载体对照组与试验组中BLNC203、BLNC246基因的表达上调;BLM基因在空载体对照组与试验组中的表达下调。在前列腺癌细胞LNCaP中空白对照组与试验组中BLNC203、BLNC246基因表达上调,BLM基因在空载体对照组与试验组中的表达仍然上调;在前列腺癌细胞22RV-1中空白对照组与试验组中BLNC203、BLNC246基因的表达上调,BLM基因在空载体对照组与试验组中的表达量是上调。在蛋白水平上,在前列腺癌细胞22RV-1中当超表达BLNC203、BLNC246后,BLM基因的表达量与空载体pcDNA相比表达量上调;在前列腺癌细胞LNCaP细胞中当超表达BLNC203、BLNC246后,BLM基因的表达量与空载体pcDNA相比表达量上调;在正常前列腺基质成纤维细胞WPMY-1中,当超表达BLNC203、BLNC246后,BLM基因的表达量下调。在超表达BLNC203和BLNC246后在mRNA水平和蛋白水平BLM基因在正常细胞中的表达下调,在前列腺癌细胞中则是上调。在mRNA水平与蛋白水平表达模式则保持一致。3.超表达BLNC203和BLNC246对细胞增殖能力和迁移的影响构建成功的超表达载体pcDNA3.1（+）-BLNC203和pcDNA3.1（+）-BLNC246转染至不同株系前列腺癌细胞和正常前列腺细胞中,采用划痕实验检测细胞的迁移能力,CCK8检测细胞的增殖能力。结果显示,在划痕实验中前列腺癌细胞LNCaP和22RV-1在48 h的迁移效果最强,CCK8实验检测细胞的增殖效应显示当超表达BLNC203和BLNC246后与pcDNA空载体相比则是促进了细胞的增殖。综上,本文筛选的两条与人BLM基因相关的LncRNA BLNC203和BLNC246,两条LncRNAs在人不同株系前列腺癌细胞和正常的前列腺基质成纤维细胞中都普遍地表达,当过表达BLNC203和BLNC246后,在前列腺癌LNCaP、22RV-1细胞中,在mRNA水平和蛋白水平,BLM表达都是上调,表达模式则是一致的。本实验研究结果表明BLNC203与BLNC246在前列腺癌细胞LNCaP和22RV-1中过表达时促进了BLM 3’UTR区的表达,并且促进了细胞的增殖能力。