“亲水性作用色谱（HILIC）”这个称呼存在的时间虽然不长,但是它的历史久远,早在上个世纪三四十年代,就已经有人在用亲水性作用色谱模式来分离碳水化合物了。HILIC是集正相色谱与反相色谱于一身,为极性溶质的分离提供了新选择。HILIC分离的核心是固定相,分离的目标由固定相表面极性基团种类决定。基于以上背景,本文调研了国内外HILIC作用色谱的研究现状,HILIC色谱的组成以及保留机理等,并探讨了硅胶表面修饰聚合物的方式,对比每一种方式的优缺点。最终选择将含糖聚合物通过原子自由基聚合的方式接枝到硅胶表面作为新型的色谱固定相并对其进行了色谱评价,并运用于蛋白的吸附与分离。文章的主要研究工作如下:（1）在前人研究的基础上改良了前驱体2-氨乙基甲基丙烯酰胺盐酸盐（AEMA）的合成方法,采用色谱级甲醇和粗提液自然浓缩的方法,提高了AEMA的产率。（2）本文在硅胶表面的改性过程中,关于引发剂的合成采取两种方式:其一是在裸硅球表面氨基化,得到的氨基硅球与溴异丁酰溴合成大分子引发剂;其二是用商品化的氨基硅胶与键合了环氧丙醇的2-溴异丁酰溴反应合成硅胶引发剂。然后在CuBr/配体做催化的条件下,分别在以上两种方式下得到的溴基化硅球表面引发聚合,接枝含糖单体GAEMA。通过元素分析可得,前者得到的接枝密度是后者的两倍多,且后者的制备程序较为繁杂。因此选择方案一为主合成路线,通过改变反应温度、引发剂浓度和反应时间,优化了硅胶表面GAEMA单体的接枝密度,最终得到最佳接枝密度的SiO₂-g-GAEMA,使其作为HILIC色谱填料进行随后的柱装填实验。（3）我们选用两种碱基对,两种核苷和6种还原性糖,对SiO₂-g-GAEMA进行了一系列的色谱性能评价,该固定相对上述极性溶质表现了良好的分离效果。并探讨了流动相的比例、柱温、缓冲液的配比对SiO₂-g-GAEMA的保留因子的影响,发现该固定相具有典型的HILIC保留特征。SiO₂-g-GAEMA初步用于四种蛋白（玉米蛋白、牛血清蛋白、胰蛋白酶、溶菌酶）的分离,可以在10 min内梯度洗脱快速分离蛋白。该固定相在血清中富集糖肽和极性高度异构化溶质的分离中有应用前景。