间充质干细胞对系统性红斑狼疮的免疫调节作用

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目的:探讨体外人间充质干细胞(HMSCs)对系统性红斑狼疮(SLE)的免疫调节作用和小鼠间充质干细胞(mMSCs)联合来氟米特(LEF)对小鼠T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:分别从BALB/c小鼠骨髓和健康人骨髓中分离培养MSCs。(1)用EZ-SepTM Mouse 1X分离异体BALB/c小鼠的脾淋巴细胞,在ConA诱导的同时,先经LEF处理,洗去LEF后,脾淋巴细胞再和mMSCs共同培养。分组:A组:脾淋巴细胞;B组:脾淋巴细胞+mMSCs;C组:LEF处理的脾淋巴细胞;D组:LEF处理的脾淋巴细胞+mMSCs。用MTT比色法检测各组T淋巴细胞的增殖情况,流式细胞术分析各组T淋巴细胞的活化及凋亡情况,定量RT-PCR检测各组T淋巴细胞的IL-2、IL-10 mRNA水平。(2)在PHA刺激下,SLE患者外周血淋巴细胞与不同数量的HMSCs共同培养。检测各组T淋巴细胞的增殖、凋亡情况,分析各组T淋巴细胞的IFN-γ、IL-10、TGF-β1 mRNA水平。(3)分离SLE患者外周血单核细胞,在含rhGM-CSF和rhIL-4的培养条件下制备树突状细胞(DC)。分组:HMSCs处理组、HMSCs未处理组。用流式细胞仪检测各组DC表面CD86、CD83、CD1a和HLA-DR的表达,MTT法检测各组DC刺激淋巴细胞增殖的能力。结果:(1)在体外,mMSCs联合LEF对小鼠T淋巴细胞的增殖、IL-10mRNA的表达有协同抑制作用。(2)HMSCs对由PHA诱导的SLE患者T淋巴细胞的增殖、凋亡均有抑制作用,且抑制作用与HMSCs呈剂量依赖性。HMSCs能促进SLE患者T淋巴细胞TGF-β1 mRNA的表达,抑制IL-10、IFN-γmRNA的表达。(3)HMSCs可以影响SLE患者单核细胞来源的DC分化、成熟、具有抑制DC刺激异体淋巴细胞增殖的能力。结论:(1)mMSCs联合LEF对小鼠T淋巴细胞有一定程度的协同免疫调节作用;(2)HMSCs可能通过抑制SLE患者T淋巴细胞增殖、减少T淋巴细胞凋亡、促进T淋巴细胞TGF-β1 mRNA表达、抑制IL-10、IFN-γmRNA表达及影响SLE患者单核细胞来源DC的发育、成熟和功能的途径,下调SLE患者的免疫反应。
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